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1、5667!"8#$%"958#&酿酒科技:%;856671%3;958!"#$%&’()*"+,-."/+./01/.2+%3%,4!!小曲中霉菌的分离纯化鉴定吴雪梅!广东九江酒厂有限公司"广东佛山<5=56>#摘要$小曲中的微生物主要有霉菌!酵母以及少量的细菌"在小曲上能看到的菌丝基本上都属于霉菌#以广东省九江酒厂有限公司提供的小曲为出发菌"采用土豆汁培养基进行纯培养"选取长有5?7个单菌落的平板进行分离纯化"制成纯培养菌$通过菌落特征%形态!制片标本和生理生化试验对纯培养菌进行鉴定$共分离出根霉菌株@株"经鉴定"其中根霉属7株"毛霉属9株"曲霉属>株"青霉属9株$&小雨’关键
2、词$小曲(霉菌(分离(纯化(鉴定中图分类号$1-589;9%A@>’>>%1A@5<;B文献标识码$C文章编号$9669’@5=8&5667#68’66>>’65!"#$%$&’()*+,%’-’./&’()/)01..%"0’&$&’()(-2(30’)4’/(5,DEF$/’(/"&G$)+,H%+,I"$J")+,K"LM"33/&4N%;!MH;"O%L2)+"G$)+,H%+,<5=56>"N2"+)#678&%/.&PQ".&%R/L"+S")%#$()"+34"+.3$HL(%3H"(".&%T4(/)+HL()33#$)+M"M4%UR).M/&")"M2/V"L
3、"R3/(4./3"$(%+S")%#$)3(%LMR/3%+,LM%(%3H;F")%#$W&%V"H/HR4G$)+,H%+,I"$J")+,K"LM"33/&4X)L$L/H)LLM)&M$WR).M/&")U%&W$&/.$3M$&/R4W%M)M%J$"./.$3M$&/(/H"$("M2/+5?7L"+,3/.%3%+4W3)M/LX/&/L/3/.M/HU%&L/W)&)M"%+)+HW$&"U".)M"%+M%W&%H$./W$&/.$3M$&/R).M/&");12&%$,2M2/).Y.&/H"M)M"%+%UM2/.$3M$&/R).M/&")&)..&/H
4、"M)M"%+(/M2%HL.%V/&/H.%3%+4.2)&).M/&"LM".L"U%&("M)R3/ML)(W3/L)+HR"%.2/(".)3M/LM#"+"+/!"#$%&’(LM&)"+LX/&/L/W)&)M/H"+.3$H"+,U%$&!")$%&’(LM&)"+L"%+/*’+%!LM&)"+L"M2&//,(&-!.)//’(LM&)"+L)+H%+/&-0)+)//)’*LM&)"+;&1&)+;R4ZE[Z)+,#9":;(%08
5、品"其产量约占全国白酒总种粉备用’称取小曲种粉9,"放入盛有@@(3无菌水并带有玻璃产量的六分之一9]’小曲是小曲白酒的糖化发酵剂"其培养和保存珠的三角瓶中"振摇9?5("+"浸泡数分钟后再振摇9?5("+"使种及应用方法是我国劳动人民智慧和经验的结晶"至今仍有其理论粉与水充分混合"将菌分散’用一支9(3无菌吸管从三角瓶中吸价值和实用价值’取9(3混浊液注入盛有@(3无菌水的试管中"以此类推"制成96’小曲中的微生物主要有霉菌(酵母以及少量的细菌"在小曲上5"96’>"96’7"96’<各种稀释度的种粉溶液’用9(3无菌吸管分别从看到的菌丝基本上都属于霉菌"霉菌可以说是小曲的大
6、户’分离纯96’7"96’<稀释度的试管中吸取9(3放入无菌培养皿中"再注入化并鉴定小曲霉菌"是了解小曲菌系及酶系的基础"具有重要意7<6e适量的_KC"摇匀(静置"使其凝固后把平板倒置于>6e义’培养箱中培养’培养95?9=2后"用小刀把平板上的单个菌落挖分离是纯化的准备"而鉴定时必须以菌种纯培养为样品"才能出"置于另一空白_KC平板上"继续培养’作菌种鉴定"因而菌种纯化很关键’现时科研单位多采用显微技术9;<纯化方法作单细胞分离以获得纯培养"但在企业单位并不具备这样的实验待菌落在平板上生长进入旺盛期时"用无菌接种环挑取少量条件’利用普通的实验器材"采用简单的试验方法"同样
7、能获得所孢子作平板划线"经5?>次平板划线后该菌已得到初步纯化’从需菌种的纯培养’培养十几小时的划线平板上选取单菌落"用小刀将其挖出并移植于空白_KC平板上"继续培养’待该菌落生长处于旺盛期时"用接9材料和方法种环挑取适量气生菌丝放入盛有966(3无菌水并带有玻璃珠的9;9试验材料三角瓶内"振摇5("+"制成均匀的孢子液"采用小曲种粉稀释的方广东省九江酒厂有限公司提供的小曲’法"进行96倍递增稀释"制成96’5?96’<稀释度的孢子液"用无菌9;5培养基吸管分别吸取9(3各稀释度