资源描述：
《热休克蛋白70对氧化应激所致核仁素裂解的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、CN4321262/R中国动脉硬化杂志2004年第12卷第4期373[文章编号]100723949(2004)1220420373205·实验研究·热休克蛋白70对氧化应激所致核仁素裂解的影响王慷慨,蒋磊,刘可,刘梅冬,王浩,易宇欣,袁灿,鄂顺梅,石永忠,肖献忠(中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,湖南省长沙市410078)[关键词]病理学与病理生理学; 热休克蛋白70对氧化应激所致核仁素裂解的影响; 免疫印迹法; 热休克蛋白70; 核仁素; 氧化应激; 过氧化氢; 热休克反应[摘 要]为探讨热休克蛋白70对氧化应激(0.5mmolPL过氧化氢)所致核仁素裂解的影响及其
2、机制,采用免疫印迹技术检测氧化应激诱导核仁素的裂解;通过热休克反应和构建热休克蛋白70转基因细胞观察热休克反应与热休克蛋白70对核仁素裂解的影响,同时采用免疫共沉淀技术检测热休克蛋白70与核仁素之间的相互作用。结果发现,0.5mmolPL过氧化氢可导致多种细胞的核仁素发生裂解(有80kDa裂解片断出现),而且最早出现裂解片段的时间都在过氧化氢处理30min到1h左右;热休克预处理及转热休克蛋白70后均引起热休克蛋白70的表达明显增加,同时显著抑制抑制氧化应激所致核仁素裂解片段的出现,免疫共沉淀结果显示在氧化应激时热休克蛋白70与核仁素直接结合,形成复合物。以上结果提示,
3、热休克反应与热休克蛋白70可以显著抑制氧化应激所致核仁素的裂解,其机理与氧化应激时热休克蛋白70与核仁素直接结合有关。[中图分类号]R363[文献标识码]AEffectofHeatShockProtein70onCleavageofNucleolinInducedbyOxidativeStressWANGKang2Kai,JIANGLei,LIUKe,LIUMei2Dong,XIAOWei2Min,WANGHao,YIYu2Xin,YUANCan,EShun2Mei,SHIYong2Zhong,andXIAOXian2Zhong(DepartmentofPathophy
4、siology,XiangyaMedicalCollege,CentralSouthUniversity,Changsha410078,China)[KEYWORDS]HeatShockProtein70;Nucleolin(C23);OxidativeStress;HydrogenPeroxide;HeatShockRe2sponse[ABSTRACT]AimToobservethecleavageofnucleolin(alsonamedC23)duringapoptosisinducedbyoxidativestressandclarifytheeffectofh
5、eatshockprotein70(HSP70)oncleavageofnucleolinanditspossiblemolecularmechanism.Meth2ods0.5mmolPLhydrogenperoxide(H2O2)wasaddedintoculturedcellstomimicoxidativestress.CleavageofC23werede2tectedbyusingimmunoblotting;Heatshockresponse(HSR)andHSP70transgeniccelllineswereusedtoobservetheeffect
6、ofHSRandHSP70oncleavageofC23inducedbyoxidativestress,andtherelationshipbetweenHSP70andC23wasevaluatedbyusingco2immunoprecipitation.ResultsActivityofcaspase23increasedsignificantlyafter2hof0.5mmolPLH2O2treatment,andreachedpeakat12h.ThecleavageofC23appeared30minto1haftertreatmentofH2O2asin
7、dicatedbyacleavedfrag2mentationof80kDa,whichwassignificantlyinhibitedbyHSRandHSP70.Furthermoreco2immunoprecipitationstudyindicatedthatHSP70couldbinddirectlytoC23duringH2O2treatment.ConclusionsOxidativestresscouldinducetheactivationofcaspase23,cleavageofC23andapoptosis;and
