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1、临床实验室中,PCR技术及其应用江苏大学周滔提纲病毒性心肌炎的临床实例分析柯萨奇病毒的实验室检测方法引申,PCR技术,以及DNA测序六月,18区30床女病人主诉:上感(鼻塞,轻微咳嗽,无痰,无咽痛),乏力(需扶墙走,不能拿东西),头晕.体温38.5°C体征:胸痛(瞬间痛)无胸闷,发痛前有牙龈肿痛两周,未见脓,未闻及心包摩擦音,奔马律.BP:92/62mmHg,P:92/min.六月30日入院时:2,3,aVF导联抬高0.2mV.CK503U/L,CK-MB56U/L.(当时未查Tro)7月2日:K3.1(3.5-5.5)mmol/L,Tro5.27(0-0.1)mmol/L,CK-MB79.
2、44(0.00-16.00)mmol/L,CK1123.0(20-200)U/L,hs-CRP11.53(0.0-3.00)mg/L.ECG:Ⅱ,Ⅲ,aVF导联提示下壁ST段抬高;V4,5,6提示心尖导联抬高.好转以后T波倒置,异常Q波,有演变表现心超:收缩功能下降,室壁活动下降,无间断性,普遍的活动降低.病毒性心肌炎?急性心肌梗死?初步诊断甲强龙腎上腺皮质激素,下调免疫反应.(渐停)罗氏芬,抗感染.多巴胺,强心升血压VitC,VitB6,二磷酸果糖,营养心肌Kcl,Mgcl2采取措施实验室后继推荐检查病毒抗体效价滴定:Ab效价>640?(>320为可疑)ELISA查柯萨奇病毒IgM,IgG
3、.PCR作为临床科研常用的基因诊断方法,其扩增片段的特异性主要由引物决定,所以设计引物成为PCR成功的关键.在此,以柯萨奇病毒B3(CVB3)为例柯萨奇病毒B组3型GenBank:AY752944.2球形,衣壳20面体,核心为单正RNA病毒,有衣壳蛋白(VP)编码VP1tgtcaggctattgaaggacactcctttcatttcgcaggaaaactttttccagggcccagtggaagacgcgataacagccgctatagggagagttgcggat<2500acagtccgataacttcctgtgaggaaagtaaagcgtccttttgaaaaaggtcccgggtc
4、accttctgcgctattgtcggcgatatccctctcaacgccta241024202430244024502460247024802490accgtgggtacagggccaaccaactcagaagctataccagcactcactgctgctgagacaggtcacacgtcacaagtagtgccgggtgacaccatgcaga<2600tggcacccatgtcccggttggttgagtcttcgatatggtcgtgagtgacgacgactctgtccagtgtgcagtgttcatcacggcccactgtggtacgtct25102520253025402
5、5502560257025802590cacgccacgttaagaactaccattcaaggtccgagtcaaccatagagaacttcctatgtaggtcagcatgcgtgtactttacggagtatgaaaactcagg<2700gtgcggtgcaattcttgatggtaagttccaggctcagttggtatctcttgaaggatacatccagtcgtacgcacatgaaatgcctcatacttttgagtcc261026202630264026502660267026802690tgccaagcggtatgctgaatgggtattaacaccacgaca
6、agcagcacaacttaggagaaagctagaattctttacctacgtccggttcgacctggagctg<2800acggttcgccatacgacttacccataattgtggtgctgttcgtcgtgttgaatcctctttcgatcttaagaaatggatgcaggccaagctggacctcgac271027202730274027502760277027802790acgtttgtcataacaagtactcaacagccctcaaccacacagaaccaagacgcacagatcctaacacaccaaattatgtatgtaccaccaggtggac
7、ctg<2900tgcaaacagtattgttcatgagttgtcgggagttggtgtgtcttggttctgcgtgtctaggattgtgtggtttaatacatacatggtggtccacctggac281028202830284028502860287028802890>TaqII
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