《寄生虫实验技术》PPT课件

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1、寄生虫实验技术病原学检查血清学检查病原学检查粪便检查血液检查法排泄物与分泌物等的检查其它组织器官检查粪便检查直接涂片法厚涂片透明法浓聚法沉淀法毛蚴孵化法浮聚法肛门拭子检查法试管滤纸检查法虫卵计数法定量透明法淘虫检查法带绦虫孕节检查法直接涂片法检查蠕虫卵、原虫包囊和滋养体。简便，连作3次以提高检出率。滴一滴生理盐水于载玻片，用牙签挑取绿豆大小的粪块，在生理盐水中涂抹均匀；厚度以可辨认下面的字迹为宜。也可固定后染色。一般在低倍镜下检查，用高倍镜观察时加盖片。检查包囊时用碘液。检查隐孢子虫卵囊时用金胺酚改良抗酸染色法。厚涂片透明法取约5mg粪便，置于载玻片上，覆以浸

2、透甘油－孔雀绿溶液的玻璃纸片，轻压，使粪便铺开。置于30～36℃温箱中约半小时或25℃约1小时。待粪膜稍干，即可镜检。沉淀法原虫包囊和蠕虫卵等比重大时效果较好。重力（离心）沉淀法：取粪便20～30g，加水混悬后用2～3层湿纱布过滤；滤液静置25分钟或离心（1500～2000rpm）1～2分钟，重复洗涤直至上清液清澈为止。最后取沉渣涂片镜检。检查包囊时，换水间隔时间宜延长至约6h。浮聚法利用比重较大的液体，使原虫包囊或蠕虫卵上浮，集中于液体表面。检查钩虫卵效果最好。饱和盐水浮聚法：取黄豆粒大的粪便置于浮聚瓶中，加入少量饱和盐水调匀，再慢慢加入饱和盐水到液面略高于

3、瓶口但不溢出为止。在瓶口覆盖一载玻片，静置15分钟后，将载玻片迅速提起翻转，镜检。可用硫酸锌或蔗糖代替饱和盐水。毛蚴孵化法在适宜温度的清水中，血吸虫卵内的毛蚴短时间内可孵出。取粪便约30g，先经沉淀法浓集，将粪便沉渣倒入三角烧瓶内，加清水至瓶口，在20～30℃的条件下经4～6小时后肉眼或放大镜观察结果。如水面下有白色点状物作直线来往游动，即是毛蚴。必要时也可用吸管将毛蚴吸出镜检。毛蚴促孵法将沉淀法处理后的粪便沉渣置于三角瓶内，不加水，或将粪渣置于吸水纸上，再放在20～30℃温箱中过液。检查时，加清水，2小时后就可见到孵出的毛蚴。肛门拭子检查法适于肛周产卵（蛲虫

4、），或肛门附近可发现虫卵（带绦虫）的寄生虫虫卵检查法。棉签拭子法：将湿棉签或角匙在肛门周围擦拭，随后将其放入盛有饱和盐水的试管中充分溶解，然后取液面液体进行镜检，也可离心后取沉渣镜检。透明胶带法：用长约6cm，宽约2cm的透明胶带粘擦肛门周围皮肤，取下胶带，平贴在玻片上镜检。试管滤纸培养法也称钩蚴培养法。根据钩虫卵在适宜条件下可在短时间内孵出幼虫的原理设计的方法。加水约1ml于洁净试管内，将滤纸剪成与试管等宽但管稍长的T字型纸条。取粪便约0.2～0.4g，均匀地涂抹在纸条竖条的上部2／3处，再将纸条插入试管，下端浸泡在水中，粪便不接触水面。在20～30℃条件下

5、培养3天后肉眼或放大镜检查试管底部。钩蚴在水中作蛇形游动，虫体透明。虫卵计数法斯陶尔（Stoll）氏法。在三角烧瓶的颈部画56和60ml两个刻度。先加0.1mol/LNaOH溶液至56ml处，再加粪便到60ml处，然后放进玻璃珠充分摇动混悬。取0.075或0.15ml粪液置于载玻片，镜下计算虫卵数。乘以200或100得每克粪便虫卵数。雌虫数＝每克粪便虫卵数×24小时粪便克数/ 已知雌虫每天排卵总数成虫总数＝雌虫总数×2定量透明法蠕虫卵的检查及计数。将约4×4cm的100目尼龙网或金属筛网覆盖粪便，自筛网上刮取粪便，填满置于载玻片上的定量板的模孔。掀起定量板，将

6、留下的粪样覆盖一含甘油－孔雀绿溶液的约为5.0～2.6cm的玻璃纸条，展平加压后粪便铺成长椭圆形。经1～2h粪便透明后镜下计数。将所得虫卵数×24，再乘粪便性状系数，即为每克粪便虫卵数。淘虫检查法考核驱虫疗效，粪便中淘取蠕虫鉴定计数。取服药后24～72小时的全部粪便，加水搅拌，用筛（40目）或纱布滤出粪渣，经水反复冲洗后，倒在盛有清水的大型玻皿内。检查混杂在粪渣中的虫体时，应在玻皿下衬以黑纸。带绦虫孕节检查法绦虫节片用清水洗净，置于两载玻片之间，轻轻压平，对光观察内部结构，并根据子宫分支情况鉴定虫种。也可用注射器从孕节后端正中部插入子宫内徐徐注射炭素墨汁或卡红

7、，待子宫分支显现后计数。血液检查诊断疟疾、丝虫病。皮肤消毒后用取血针刺破皮肤，挤出血滴，用载玻片蘸取。然后用一边缘光滑的载片为推片，将血滴推成血膜。充分晾干后，用甲醇或无水酒精对血膜进行固定。然后进行染色，晾干后镜检。排泄物与分泌物的检查1．痰液　可查肺吸虫卵、棘球蚴的原头蚴、粪类圆线虫幼虫、蛔蚴、钩蚴等。先用直接涂片法检查，阴性时改用浓集法。浓集法：收集多量痰液置玻璃杯中，加入等量10％NaOH溶液，搅匀后置37℃温箱内消化，待痰液变为稀液时分装离心管内，以1500rpm离心5～10分钟，取沉渣涂片检查。排泄物与分泌物等的检查2．十二指肠液和胆汁：检查贾第鞭

8、毛虫滋养体、华支睾吸虫卵、肝片形吸血卵