《液态芯片技术》PPT课件

《《液态芯片技术》PPT课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、液态芯片技术1１.生物芯片概况电子芯片和生物芯片被称为20世纪最伟大的两个发现。生物芯片是分子生物学和信息学的结晶。根据其基材的不同大致可分为玻璃片芯片、膜基芯片、硅基芯片、光纤芯片等。它们的共同的特点是在固态基材上极小的面积里合成或固定上许多核酸或蛋白探针，使芯片上的每个或几个点代表一个基因或蛋白。利用生物芯片，科学家们可以通过一个实验对成千上万的基因或蛋白指标进行分析。生物芯片已成为生命科学领域中非常重要的手段。　但遗憾的是，这些芯片的致命弱点就是其信息质量的稳定性和可重复性比较差，操作也较繁琐。正因为如此，芯片临床应用受到了很大的限制。2美国Luminex公司开发的液态

2、芯片系统克服了这个缺点，成为正在崛起的一种标准化的新一代生物芯片技术平台，既能为后基因组时代的科学研究提供强大的技术支持，又能作为高通量的新一代分子诊断技术平台在临床分子诊断领域大显身手。Luminex1003２.液态芯片简介美国Luminex公司开发出的液态芯片技术平台是一种全新概念的生物芯片。该技术的核心是把微小的乳胶颗粒（5.6um）用荧光染色的方法进行编码，每种颜色的微粒（或称为荧光编码微粒）代表一种检测标志物。应用时，把针对不同检测物的彩色编码微粒混合后再加入微量病人标本，在悬液中靶分子与微粒进行特异性地结合。最后用激光流式仪判定后由电脑以数据信息的形式记录下来。因

3、为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以一个微量液态反应体系中同时检测100个指标。Luminex公司称之为“xMap”技术，这个词用中文很难翻译。又因含微粒的溶液肉眼观是澄清透明的，所以又有"liquidchip,液态芯片"之称。该仪器在我国SFDA进口注册时被称为“多功能流式点阵仪”。4液态芯片技术平台应用非常广泛，编码微粒上可以包被蛋白也可以连接核酸，所以液态芯片既可以用来检测蛋白（蛋白芯片），也可以检测核酸变化（基因芯片）。51.液态芯片原理把微小的乳胶颗粒（Beads,微球）分别染成不同的（多达100种）荧光色。把针对不同检测物的核酸（互补链）

4、或蛋白（如抗原抗体）以共价方式结合到特定颜色的微球上。应用时，先把针对不同检测物的、用不同颜色编码的微球混合，再加入被检测物（被测物可以是血清中的抗原、抗体、或酶等，也可以是PCR产物）。在检测核酸检测抗原检测抗体6悬液中的微球与被检测物特异性地结合，并加上荧光标记。检测：微球成单列通过两束激光，一束判定微球的颜色从而决定被测物的特异性（定性）；另一束测定微球上的荧光标记强度从而决定被测物的量（定量）。所得到的数据经电脑处理后可以直接用来判断结果。7液态芯片机理图8荧光编码微球（5uM)液态芯片核心技术及其机理9两种荧光染料经过不同比例混合，可以将乳胶颗粒染成上百中颜色。10

5、两种荧光染料经过不同比例混合，可以将乳胶颗粒染成上百中颜色。11用来检测核酸(DNA或RNA)12混合针对不同生物靶点的（不同颜色的）乳胶颗粒液态芯片核心技术及其机理应用13杂交信号的激光识别和定量分析液态芯片核心技术及其机理14液态芯片的技术每个颗粒都是一个独立的、特异性的反应单位。针对不同临床指标的颗粒可以放在一个反应体系内。硬件和软件体系具有区分上百种检测物的能力。15４.液态芯片优点液态芯片的独特设计使得它拥有常规的检测方法所不具备的特点：□高效：因为许多颜色的乳胶颗粒可以放在同一个反应体系内，所以一次可同时检测多种（100种）生理病理指标。这与传统逐个检测的方式效率

6、有很大的不同。□高敏感：每个乳胶微粒上都以共价结合的方式包被上许多抗原、抗体或核酸分子，因其参与反应的分子多，产生的信号就强。具Qiagen公司的报道，用该平台检测IL－8时，其灵敏度为0.01pg，达到了非常惊人的水平。□快速：因为杂交或免疫反应在悬浮的液相中进行，所以反应需要时间短，杂交后常不用清洗就可以直接读数，所以检测效率大大高于固相杂交。所用时间从几小时缩短到十几16分钟。□重复性好：固相芯片不能很好地应用于临床诊断，其中一个重要的原因是其重复性差。它是固液杂交方式的芯片目前难以克服的技术障碍。但液态芯片杂交发生在均相的液体环境中，其结果稳定，重复性非常好。另外，每

7、个指标在一个反应体系中有1000－5000颗相同的微粒。检测时，抽取其中的100－500颗读数，最终的数据是取其均值，这样已经把误差减到最小。相比固相芯片每个指标只有1－2个数据，其数据的可靠性就会差很多。□唯一被FDA批准用于临床诊断的生物芯片：具不完全统计，目前已有4家美国公司基于液态芯片技术平台的产品获得FDA的批准用于临床诊断。他们分别是ZeusScientific公司开发的AtheNAMulti-Lyte芯片用于自身免疫病9种抗体检测，INOVA公司开发的也是应用于自身免疫病检测的液态芯片，O