《科室讲座》PPT课件

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1、流式细胞术在白血病中的临床应用新疆自治区人民医院检验科莫红梅一、简介流式细胞术二、简介白血病三、流式细胞术在白血病中的应用(结合病例分析)一、简介流式细胞术1.流式细胞术(flowcytometry,FCM):以流式细胞仪测量悬浮细胞的一种现代细胞分析技术。综合运用电子、激光、计算机和流体力学等与荧光标记、分子免疫学、分子遗传学及分子生物学等结合,对细胞的生理功能和特性进行分析。散射光信号RightAngleLightDetectorCellComplexitySSCForwardLightDetectorCellSurfaceA

2、reaFSCIncidentLightSource前向角散射光(FSC,ForwardScatter)细胞相对大小及其表面积侧向角散射光(SSC,SideScatter)细胞粒度及细胞内相对复杂性LaserFALSSensor流式细胞仪的检测信号荧光信号使用荧光标记的单克隆抗体染色,做多色分析荧光信号的强弱,反映了细胞抗原的表达含量荧光信号双色直接染色外周全血细胞散射光双参数点图 (红细胞溶解后)二、简介白血病造血干细胞分化过程的不同阶段发生分化阻滞、凋亡障碍和恶性增殖而引起的一组异质性的造血系统恶性肿瘤。1.白血病:常见的恶性肿瘤之

3、一根据白血病细胞的成熟程度和自然病程:急性:原始细胞、早期幼稚细胞为主,自然病程仅数月慢性:较成熟幼稚细胞和成熟细胞为主,自然病程常为数年淋系、髓系(单核和粒细胞)急淋、急非淋(急性髓系白血病)慢淋、慢粒根据主要受累的细胞系可分:2、白血病的病因放射因素化学因素病毒因素遗传因素其它血液病:慢粒、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化、MDS、PNH、淋巴瘤、MM3、发病率占癌症发病率的5%,我国发病率2-4/10万,美国9.6/10万,欧洲4.3-9.0/10万。我国白血病的流行现状及特点急性:慢性5.5:1急性髓系白血病最

4、多,其次急淋、慢粒,慢淋少成人急白以急粒为多见儿童以急淋为多见慢粒白血病随年龄增长发病率逐渐升高慢淋在50岁以后才明显增多男性略高于女性1.18:1现有的分型:FAB1976年形态分类1985-1986MIC:MorphologyImmunologyCytogeneticsWHO1995-1997细胞遗传学NCI1990FAB1991年修订:急性髓系白血病M0急性髓系白血病微分化型M1急性粒细胞白血病未分化型M2急性粒细胞白血病部分分化型M3急性早幼粒细胞白血病M4急性粒单核细胞白血病M5急性单核细胞白血病M6红白血病M7急性巨核白血

5、病急性淋巴细胞白血病B细胞系T细胞系4、临床特点起病:发病急骤或缓慢起病急者往往可没有前驱症状,突然发病,以发热、多部位出血、进行性苍白或骨、关节疼痛等为首发症状。起病缓慢者以苍白、乏力、虚弱和食欲减退等症状开始,可进行性加重,以后多有发热、出血等。发热是最常见症状。感染原因:中性粒细胞减少或缺乏;中性粒细胞功能异常;免疫功能尤其是细胞免疫功能低下,或化疗、糖皮质激素的应用;白血病细胞在全身各脏器广泛浸润,尤其是高白细胞浸润后使组织缺氧,局部组织出血、坏死,增加了细菌滋生机会。抗生素的使用不正确,尤其是条件致病菌及真菌的感染发热和感染

6、急白:几乎所有患者都有不同程度出血,其中以M3和M5出血重。慢性白血病:不常见原因:血小板质和量异常DIC:M3易发生凝血因子缺乏出血原因:骨髓中红细胞系的造血被白血病细胞增殖所替代或受到白血病细胞分泌的抑制因子所抑制,使骨髓中红细胞的生成减少,并使幼稚红细胞对红细胞生成素的反应减弱。无效红细胞生成;幼稚红细胞增生异常。溶血:多见于ALL、CLL,急白合并DIC时常有微血管病性溶血。其它:急慢性失血及某些抗代谢化疗药物贫血白血病细胞大量繁殖,使骨髓内张力增高而发生疼痛;白血病细胞也可浸润骨皮质和骨膜,发生局部肿块,还可以引起骨皮质破坏

7、缺损引起疼痛;白细胞坏死引起高尿酸血症致痛风、融骨性粒细胞肉瘤等,均可引起骨痛。肢体剧烈疼痛多见于ALL,儿童白血病多浸润关节,成人主要疼痛部位在胸骨、肋骨及脊椎等。骨、关节疼痛神经系统白血病细胞常可侵及中枢神经系统,以蛛网膜及硬脑膜的浸润常见。消化系统消化道的出血常见肝、脾、淋巴结肿大急白的淋巴结肿大多为表浅的轻度肿大,质地较软,多局限在颌下、颈部、腹部及腹股沟等处。绝大多数T-ALL有纵膈淋巴结的肿大,但较少引起气管、颈静脉压迫等症状。巨脾主要见于CML晚期及其急变、幼淋巴细胞白血病。呼吸系统肺部浸润以AML多见,侵犯胸膜发生胸腔

8、积液以ALL多见,亦可见于AML-M5,多为血性,可见较多白血病细胞。泌尿系统心脏五官及口腔白血病细胞浸润口腔黏膜可引起牙龈肿胀增生、巨舌、牙龈出血及口腔溃疡,以AML-M4和M5最常见;眼眶与球后为绿色瘤的好发部位。乳

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