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1、动物科技学院脂肪间充质干细胞杨公社Adipose-derivedMesenchymalStemCells汇报提纲研究背景脂肪干细胞优点及表面标记多向分化潜能猪脂肪干细胞分离培养、诱导分化及其建系应用前景及待解决的问题一、研究背景动物体内，脂肪组织不仅是重要的能量贮存库和赋形组织，还是保持内环境稳定及具有分泌激素和细胞因子的重要部位。脂肪细胞增殖与分化失常是导致肥胖及Ⅱ型糖尿病的重要因素。因此，脂肪细胞分化的研究一直是国内外医学及生物学领域的研究热点之一。干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞。目前的成体干细胞主要是骨髓来源
2、的间充质干细胞。胚胎干细胞因道德伦理问题限制了其应用。骨髓来源的间充质干细胞是一类具有多向分化潜能的细胞，但骨髓穿刺给病人带来的痛苦大，且只能得到少量细胞(大约1个间充质干细胞/105基质支持细胞)，因而存在取材困难、病人不易接受的缺点。因此，国内外研究人员积极寻找可替代的干细胞来源。背景知识2001年Zuk等首次从病人脂肪组织悬液中分离获得了有多向分化能力的细胞，并将其命名为抽脂处理细胞（PLA）。PLA在特异性诱导剂下可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。之后，多个研究小组相继证实，脂肪组织中确实存在着
3、与骨髓间充质干细胞相似的成体干细胞。脂肪间充质干细胞的发现进一步拓宽了脂肪组织领域的研究。背景知识二、脂肪源间充质干细胞的优点首先，从人类医学角度说，获取脂肪间充质干细胞比骨髓源性干细胞容易的多。皮下脂肪切除术是一种普通的外科手术，其安全性高、对患者带来的痛苦小。即AMSCs具有易获得性、安全、可迅速扩增及多向分化能力等特点，其将成为具有广阔治疗应用前景的一类成体干细胞。其次，脂肪组织比骨髓中所含干细胞比率大。通过成纤维细胞集落形成单位比较脂肪组织显示，成人骨髓来源细胞中成纤维细胞集落形成单位出现频率为1/50000
4、～1/1000000，而当脂肪组织用胶原酶消化，除去上层漂浮的成熟脂肪细胞，下层细胞中成纤维细胞集落形成单位的频率为1/100，说明脂肪组织中干细胞数目至少是骨髓的500多倍。脂肪间充质干细胞优点最后，从经济和社会效益看，从脂肪组织中获取干细胞可将原本认为是废弃物的脂肪，如临床上脂肪抽吸术后的脂肪组织及动物屠宰后不可实用的内脏脂肪等变为干细胞库的重要来源，具有极大的经济与社会效益。脂肪间充质干细胞优点关于脂肪间充质干细胞标志，目前尚无统一标准。一般认为，脂肪间充质干细胞和骨髓间充质干细胞均表达CD44、CD105、S
5、TRO-1、CD166及CD117。其中CD117是一种干细胞因子受体，在全能或多能干细胞中表达，包括胚胎干细胞。表面标记除了上述几种标记外，脂肪间充质干细胞也表达其他多种分子标记，包括CD29（β1-整合素，在血管发生治疗中起重要作用）、CD44（透明质酸盐）和CD49e（α5-整合素，在细胞粘附纤连蛋白中起重要作用）等。表面标记不同研究组对脂肪间充质干细胞表面标记的鉴定结果并不完全一致，如Gronthos等发现AMSCs不表达STRO-1，但Zuk等发现表达STRO-1。这些不一致的结果可能与细胞所处状态及纯度有
6、关。表面标记报道文献AMSCs表面标记阳性阴性Gronthos，2001CD44、CD49d、CD49e、CD54、CD55、CD59、CD105、CD106和HLA-ABCCD14、CD45、CD50、CD56、HLA-DR和骨髓基质细胞表面分子STRO-1Zuk，2002CD13、CD29、CD44、CD105、CD71、STRO-1CD14、CD16、CD31、CD34、CD45、CD106、CD56DeUgarte，2003CD13、CD29、CD44、CD105、CD90、STRO-1CD49d、CD54、
7、CD34、CD106Aust，2004CD10、CD13、CD29、CD44、CD90、和HLA-ABCCD11b、CD45和HLA-DR表面标记近几年的研究结果表明，在合适诱导剂下，脂肪间充质干细胞和骨髓干细胞一样，可向脂肪、软骨、成骨、神经元细胞、成肌细胞、血管内皮细胞等方向分化。三、多向分化潜能多向分化潜能StremBM,2005多向分化潜能分化方向相关文献骨骼肌Mizuno,2002；Bacou,2004；陈希平,2004心肌Rangappa,2003；Planat-Benard,2004；Yamada,20
8、06(棕色脂肪组织)；张端珍,2005；王燕,2005成骨Zuk,2001,2002；Halvorsen,2000；Hattori,2004；陈希哲,2004软骨Huang,2004；Winter,2003；严笠,2005脂肪Zuk,2001,2002；Sen,2001；VonHeimburgD,2001神经Safford,2004；Ashji
