《蛋白质合成》课件

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1、第六章RNA的翻译——蛋白质的合成翻译（蛋白质的生物合成）:以氨基酸为原料以mRNA为模板以tRNA为运载工具以核糖体为合成场所起始、延长、终止各阶段蛋白因子参与合成后加工成为有活性蛋白质6.1参与蛋白质生物合成的物质氨基酸mRNAtRNA核糖体酶及蛋白质因子ATP、GTP6.1.1tRNA1.tRNA的结构二级结构分为五个主要的臂：携带氨基酸的接臂；TψC臂;反密码子臂;双氢尿嘧啶(DHU)臂；附加臂。tRNA结晶的X光衍射结果表明,所有的tRNA分子均为L形状2.tRNA作用是氨基酸的特异“搬

2、运工具”.起“接合器”作用mRNA摆动配对3.tRNA的种类（1）起始tRNA与延伸tRNA起始tRNA特异地识别翻译起始信号AUG，原核生物起始tRNA携带甲酰甲硫氨酸（fMet），真核生物携带甲硫氨酸（Met）。只能结合于核糖体的肽位延伸tRNA在翻译延长中发挥作用只能结合于核糖体的氨基酰位（2）同功tRNA(isoacceptingtRNAs)携带氨基酸相同而反密码子不同的一组tRNA称为同功tRNA(isoacceptingtRNAs)。(3)校正tRNA：抑制基因（suppressor）

3、或校正基因无义抑制（nonsensesuppressor）错义抑制（missensesuppressor）校正tRNA的特点：校正tRNA必须与正常的tRNA竞争结合密码子无义突变的校正tRNA必须与释放因子（RF）竞争识别密码子错义突变的校正tRNA必须与该密码的正常tRNA竞争校正效率很低，通常为1-5％校正的相对性6.1.2核糖体—蛋白质制造厂1.核糖体结构及种类由大小二亚基组成给位（P位，肽位）：起始时，tRNAimet结合于核糖体的肽位延长成肽后，肽链转到此位。受位（A位，氨基酰位）：延

4、长成肽时，氨基酰tRNA就加入此位。核糖体种类(胞质中)游离的核糖体---合成细胞固有蛋白与粗面内质网结合的核糖体---合成带有信号肽的分泌性蛋白质2．核糖体的装配多核糖体一条mRNA链上同时具有许多个核糖体（每隔80核苷酸有一个核糖体）一条mRNA可同时合成多条多肽链3.核糖体的活性位点（1）mRNA结合位点　在16SrRNA的3`端有一段顺序同多数原核生物的mRNA(AUG上游3-9个碱基)的核糖体结合位点有互补关系，以便使mRNA结合在小亚基上。（2）P位点　肽酰基位点亦称肽基部位或放位，

5、是与延伸中的肽酰tRNA的结合位点。偏于小亚单位（小亚基“头部”，大亚基“座斗、扶手”）。（3）A位点　氨酰基位点亦称氨基酸部位或受位，是接受氨酰基tRNA的部位，偏于大亚单位（大亚基“座斗”，右侧“扶手”；小亚基“头部”和“颈部”）。（4）肽酰转移后与即将释放的tRNA结合的位点——E位点，偏于小亚单位。与肽酰tRNA由A部位移位到P部位有关的转移酶的结合位点亦称转移酶Ⅱ，简称G因子，位于大亚基。肽酰转移酶的催化位点亦称转移酶I或T因子，是肽链形成时，催化氨基酸之间形成肽键的肽合成酶(催化P位

6、上肽酰tRNA的羟基与处在A位上氨酰基tRNA的氨基之间形成肽链)。位于大亚基上6.1.3可溶性蛋白质因子起始因子延长因子释放因子initiationfactorsIFeukaryoteinitiationfactorseIFelongationfactorsEFeukaryoteelongationfactorseEFreleasefactorsRF6.1.4能量与酶ATP、GTP,多种酶6．2肽链的合成原核生物氨基酸的活化与转运肽链合成的起始肽链的延长“核糖体循环”肽链合成的终止蛋白质的加工、

7、修饰一、氨基酸的活化与转运酶催化反应氨基酰tRNA合成酶绝对专一性1个A.A1个氨基酰tRNA合成酶活化A.A---活化“-COOH”消耗2个ATP活化A.A+tRNA氨基酰tRNA酶的两个位点结合位点结合正确的A.A活化水解位点保证A.A序列的正确性第一步反应第二步反应消耗2ATP3’-CCA-OH二、肽链合成的起始所需的条件游离的核糖体大小亚基mRNA5’端的起始信号起始tRNA--tRNAimetGTP三种可溶性起始因子(IF)三种起始因子IF1IF2IF3辅助IF3有GTP酶活性特异识别f

8、met-tRNAimet形成fmet-tRNAimet-IF2-GTP促进30S小亚基结合mRNA终止时：促使核糖体解离30s起始复合物形成1.核糖体亚基的拆离2.mRNA在小亚基上就位3.fmet-tRNAfmet的结合起始序列（SD序列）30S小亚基与mRNA识别、结合IF1、IF3协助fmet-tRNAfmet-IF2-GTP通过其反密码与mRNA上的起始密码AUG相配对SD序列(shine-Dalgarno序列):---原核生物1.位于起始密码上游25个核苷酸，2.序列富含