耶罗维亚酵母对葡萄上OTA产生菌株的拮抗作用及其机制的初步研究

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1、万方数据耶罗维亚酵母对葡萄上OTA产生菌株的拮抗作用及其机制的初步研究AntagonismofYarrowialipolyticaincontrollingtheochratoxinAproducingisolatesofgrapesandthepossiblemechanismsinvolved姓名2015年6月万方数据独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人存导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的

2、研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完伞意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：．王旋于建Ⅵ侈年占月多日万方数据学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人屯子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许沧文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国学位论文全文数据库》并向社会提供查洵，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社

3、会提供查询。论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生院办理。本学位论文属于不保密学位论文作者签名：兰子粪Ml多年易月岁日～匕。日叩L／§移阳铄年签厂>淄r3教∞副?指万方数据江苏大学硕十学位论文摘要赭曲霉毒素(OTA)为一种由青霉属霉菌等代谢生成的一种有毒的次级代谢物。赭曲霉毒素被证实对实验动物身体具有多种毒副作用，如致突变性、致畸j生等，所以对人类和动物的身体安全存在巨大的负面危害。利用物理方法控制葡萄及其制品中OTA污染，抑制水果表面致病霉菌的生长繁殖或降低已经产生的赭曲霉毒素含量，但不能将OTA彻底地去除。而化学方法虽然具有高效性，但安全性问题堪忧。拮抗生物防治法

4、是^种对环境无污染、对动植物健康无威胁的方法，被认为是现阶段最具有发展前景的无公害方法。拮抗生物处理法是利用某些有益微生物对真菌具有很强的抑制作用，或者对毒素具有降解作用。尤其是成为重点研究对象的酵母菌类真菌，其代谢产物中一般没有对人体有毒有害的物质，安全性相对细菌更安全，且酵母菌的遗传物质相对稳定、细胞效价高、对不适宜生长的逆境环境卜．也具有一定的耐受性，同时酵母菌细胞可以与化学药剂及物理处理共同发挥作用。所以拮抗酵母菌发展为牛物防治法中的主要研究目标。本研究论文采用我们课题组实验章已经筛选分离并鉴定的耶罗维亚酵母(y，咖D砂ica)为研究对象，探究了FZ矽。纱fic

5、口对由OTA产牛菌O．1引起的葡萄采后果实青霉病害的生物抗病效果，在体内试验中探究了葡萄果实自然腐烂率及浆果各种贮藏品质指标的作用，初步研究了y助D，∥fca抑制OTA产生菌0—1生长=繁殖的牛理机制及F，咖。砂fc口体外抑制OTA产生菌的生长繁殖及其降解OTA的分子机制。丰要研究结果如下：1牙0用高效液相荧光检测法和紫外荧光检测法相结合的方法，从病害葡萄的表面、果肉组织巾分离并筛选到儿株OTA产生菌株，测序分析其中产毒素含量最高的一株霉菌O．1的5．8SrDNA—ITS区的基因序列，并对其形态学进行了鉴定。2．不I一的气候影响着赭曲霉毒素产生菌的种类及其OTA浓度，对

6、葡萄制品的污染状况也有很大的影响，研究不I—j的碳源、氮源、无机盐、pH、温度等因素对产毒菌株0．1的生长和产毒素含量的影响发现，培养条件不同，岛青霉O一1菌丝生K和产毒素能力也不同。111万方数据耶罗维亚酵母对葡萄上赭曲霉毒素A产生菌株的拮抗作用及其机制的初步研究3．ylipolytica能够有效控制由产毒素菌株P．is&n西cum引起的产后葡萄病害，降低青霉病的发病率，减少葡萄产后损失，并对果实的贮藏品质没有不良影响。Y．1ipolytica抑制产毒素菌株0-1的生理机制包括以下几方面：Klipolytica能迅速在葡萄创伤处牛长繁殖，同霉菌Pislandicum0

7、一I竞争伤口处的营养和空问；在体外培养基试验处理中Y．1ipolytica能有效地抑制Pislandicum的菌丝体的延伸和霉菌孢子的芽管的萌发。4．通过蛋白质组学技术，对Elipolytica与P．islandicum0一l共同培养条件下，对霉菌蛋白的影响作了分析，发现霉菌菌丝中与基础代谢相关的蛋白均被酵母菌细胞抑制。对Y．1ipolytica降解OTA20h后酵母细胞蛋白进行了分离、比较和鉴定。关键词：OTA，岛青霉菌，Y．1ipolytica酵母菌，拮抗生物，防治机制，蛋白质组万方数据江苏大学硕十学位论文AbstractOchrat