《转基因和克隆动物》PPT课件

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1、转基因动物和克隆动物一、转基因动物转基因动物:指染色体基因组中整合有外源基因并能遗传给后代的一类动物。整合到动物染色体基因组的外源基因被称为转基因。当制备转基因动物时外源基因可能只整合到动物的部分组织细胞的基因组,也可能整合进动物所有组织细胞的基因组中。如果动物所有的细胞均整合有外源基因,则具有将外源基因遗传给子代的能力,通常把这类动物称为转基因动物.如果只有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因的动物,把这类动物称为嵌合体动物(Chimericanimal)只有当外源基因整合入的细胞恰为生殖细胞时,才能将其携带的外源基因遗传给子代,否则

2、,外源基因将不能传给子代。一般用胚胎干细胞法、逆转录病毒载体法制备的第1代转基因动物均为嵌合体动物,而显微注射法得到的第1代转基因动物中,也约有20%为嵌合体动物。二、转基因动物研究进展㈠转基因动物研究的简要回顾1977年,Gordon首先用微注射的方法将外源mRNA和DNA注射到非洲爪赡胚胎,发现被注入的核酸完全有功能。1980年Brinster等利用小鼠胚胎作了类似的研究,表明外源DNA能够在胚胎细胞转录表达。这些工作奠定了生产可以“获得新功能”的转基因动物的科学思想和方法。从1980年底至1981年,有6个研究组相继报道成功地获得

3、了转基因小鼠。Palmiter将5’调控区缺失后的大鼠生长激素基因与小鼠金属硫蛋白1基因启动子相连接,然后将融合基因注入受精小鼠的雄原核,生出21只小鼠,其中7只为转基因阳性鼠。在阳性鼠中,2号鼠在出生后74天时,体重达到同窝非转基因小鼠平均体重的1.87倍,这便是著名的“超级小鼠”.1985年Hammer等利用该方法成功地制作了转基因兔、绵羊和猪。上述三起研究被认为是动物转基因研究历程上的里程碑.转基因动物研究与开发是整个生命科学中近年来发展最为迅速的领域,1997年,仅各种不同类型的转基因(transgenic)小鼠就达到了804种

4、.1988年4月12日美国专利局批准了第一个转基因动物“原癌小鼠”(oncomouse)专利,稍后还获得了欧洲专利局批准,打破了“动物生命不允许专利”的铁律。1998年,美国和欧洲专利局共批准了42种转基因动物专利,登记注册了88种专利申请。转基因动物研究正在全世界范围内形成一个前所未有的高潮。并将成为21世纪生物技术领域的支柱性产业。毫无疑问,动物转基因正在改变农业、医药、生物材料,甚至是整个生命科学的研究与发展面貌。2009年2月15日...美国食品和药物管理局刚批准首个转基因动物表达的抗血栓药物ATryn,人类终于有了第一个转基因

5、动物生产的药物上市用于临床。我国的转基因研究起步较晚,从80年代初期开始了转基因动物的研究。中国科学院发育所率先成功地将人-珠蛋白基因、大肠杆菌galk和gpt基因、牛及人生长激素等基因,分别注入小鼠受精卵,获得了多种转基因小鼠。中国科学院水生所在国际上首先开展了转基因鱼的研究,并最早获得了转基因鲫鱼个体,转基因鱼是目前国内获得最为成功的一种转基因动物。我国较大规模地进行转基因动物的研究与产业化开发是由我国“863’计划资助,也是“863”计划最早实施的高技术项目之一。经过十几年的努力工作,取得了许多十分显著的成绩先后获得了生长速度快

6、、瘦肉率高、对某些病毒有一定抗性的转基因猪,在乳腺组织中能够表达人药用蛋白凝血因子IX、人生长激素、人红细胞生成素等的转基因羊。最近,还成功地获得了转基因牛。1997年,“动物乳腺生物反应器”的研究与开发列为“863”计划的重大项目,表明一个新的转基因动物研究与产业化开发高潮已经在我国形成。通过将纯化的DNA分子导入动物种系生殖细胞基因组,从而实现对动物基因组的遗传修饰并使其稳定传代,常用方法:显微注射法;胚胎干细胞法;逆转录病毒转染法转基因技术原理显微注射法同步获得供体雌鼠(超排的)和受体母鼠(前者是通过注射雌激素的雌鼠与正常雄鼠交配

7、而得;后着是通过与接扎雄鼠交配产生)供体鼠注射人绒毛促性腺激素(HCG)32h后,采集受精卵,此时受精卵有清晰的原核。用显微注射法将纯化的外源基因片段导入受精卵的雄原核内将微注射后经鉴定为存活的受精卵移植到同步交配的假孕母鼠的输卵管(或子宫)内。其中一部分移植卵能够继续生长发育成个体鉴定子代鼠中外源基因的整合和表达。转基因动物品系的建立。优点能将外源基因导入动物生殖细胞,从而实现对整个动物机体的基因修饰;可以在机体整体水平研究基因表达所导致的生物学效应研究周期短;缺点基因整合位点的随机性;基因表达的位置效应;胚胎干细胞法将外源基因直接导

8、入胚胎干细胞,经体外培养筛选后,通过显微操作将其注射到囊腔中,在移植入受体的子宫内,使其发育为嵌合体的转基因动物。胚胎干细胞(ES)是指从囊胚期的内细胞团中分离出来的胚胎细胞,能在体外培养,具有发育全能性的

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