专题二微生物的实验室培养

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1、到目前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学有关课题1微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用微生物的分类原生生物界原核生物界真菌界变形虫、草履虫、衣藻酵母菌、青霉菌、根霉菌细菌放线菌蓝藻支原体衣原体病毒无细胞结构微生物基础知识特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用.微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物无细胞结构原核细胞真核细胞细菌的外形与大小图1-1常见的三种细菌典型形态球菌（coccus)杆菌（bacilus)螺旋菌观察细菌常用光学显微

2、镜,以微米(1um=1/1000mm)作为测量它们大小的单位。肉眼的最小分辨率为0.2mm,观察细菌要用光学显微镜放大几百倍到上千倍才能看到。细菌的结构细胞质核区质粒鞭毛细胞壁细胞膜液泡荚膜菌毛细菌的结构基本结构细胞壁：肽聚糖，保护细胞膜细胞质(核糖体、质粒:控制抗药性固氮抗生素形成)核区：未成形的细胞核(拟核)特殊结构荚膜：粘性，保护作用鞭毛：运动器官芽孢：细菌休眠体，对恶劣的环境有抵抗力细菌芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢

3、又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。菌落细菌的菌落特征因种而异如：无鞭毛的球菌，常形成较小较厚边缘较整齐的菌落，有鞭毛细菌形成大而扁平、边缘波浪或锯齿状菌落放线菌1、结构：单细胞原核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的应用:病毒的结构病毒SARS病毒、禽流感病毒朊病毒（蛋白质病毒）2

4、、病毒的增殖：真菌如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉1.何为培养基？3.不同的培养基有不同的配方，但是其基本成分都相同，都包括哪些营养元素？有何作用？请举例说明。阅读教材P14~15相关内容，回答以下问题：2.按照不同的培养基划分标准，培养基有哪些种类、配制特点及其应用？（一）培养基一、基础知识：（一）培养基培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。1.培养基的类型和用途根据物理状态分固体培养基——纯化，增菌半固体培养基——动力检测，保种液体培养基——增菌根据化学成分分合成培养基——成分明确,常用于分类,鉴定天然培养基—

5、—成分不明确,常用于工业生产根据功能分选择培养基——用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长,如：加高浓度的食盐,抑制多种细菌生长,分离到金黄色葡萄球菌鉴别培养基——在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物,如：伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽,可以用来鉴别大肠杆菌基础培养基含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）选择培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基分离

6、金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基分离导入了目的基因的受体细胞液体培养基表面生长均匀混浊生长沉淀生长固体培养基：菌落，菌苔固体培养基液体培养基有无凝固剂琼脂半固体培养基无动力有动力(弥散)(是否运动？)【例】以下是单克隆抗体制备流程示意图：根据培养基的________分类，图中HAT培养基属于________培养基选择用途2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)3.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、和氮源、无机盐、等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物

7、质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等牛肉膏蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物①合成微生物的细胞物质和一些代谢产物②异养微生物的能源微生物生长不可缺少的微量有机物如：维生素、氨基酸、碱基等生长因子：牛肉膏当中含有肌酸、