全波长仪器功能概述

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时间:2019-06-29

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1、VarioskanFlash仪器功能概述VarioskanFlashVarioskan检测光路系统VarioskanFlash的光学部件结构VF的光学结构由以下六个部件组成激发光部件产生用于荧光和光密度检测的特定波长的光测量部件产生高清晰的光束用于荧光和光密度检测,激发光参比检测器被整合入测量部件发射部件对特定波长荧光和基于扫描模式的发光信号进行读数光吸收测量模块检测穿过微孔的光密度信号荧光底读模块引导来自光谱扫描模块的激发和发射光在底部检测微孔板荧光灵敏的化学发光检测部件检测微孔板的光信号激发光部件光源使用氙闪灯作为光源,氙闪灯提供光密度和荧光检测所

2、需的宽广的光谱范围,脉冲功率为100Hz,只在测量时才激活,短的光脉冲可以进行准确的时间分辨荧光检测。一次检测根据检测质量和检测速度的要求可包括1-1000次闪烁脉冲。衍射次序选择滤光片(截止滤光片)激发衍射次序滤光片实际就是Cut-off滤光片,用于阻止不想要的单色器的谐波发射,正确的衍射次序滤光片是自动选择的。单色器单色器是基于衍射光栅,光栅的凹槽表面将不同颜色分散至不同的角度,通过光栅的转动来选择不同波长的光。带宽选择带宽是由单色器的狭缝宽度来设定的,二种带宽的选择(5nm和12nm)通过控制狭缝来产生。干涉滤光片interferencefilm

3、利用干涉原理只使特定光谱范围的光通过的光学薄膜。通常由多层薄膜构成。干涉滤光片种类繁多,用途不一,常见干涉滤光片分截止滤光片和带通滤光片两类截止滤光片能把光谱范围分成两个区,一个区中的光不能通过(截止区),而另一区中的光能充分通过(通带区)。典型的截止滤光片有低通滤光片(只允许长波光通过)和高通滤光片(只允许短波光通过)它们均为多层介质膜,具有由高折射率层和低折射率层交替构成的周期性结构带通滤光片只允许较窄波长范围的光通过,常见的是法布里-珀罗型滤光片,具体结构为:玻璃衬底上涂一层半透明金属层,接着涂一层氟化镁隔层,再涂一层半透明金属层,两金属层构成了

4、法布里-珀罗标准具的两块平行板。当两极的间隔与波长同数量级时,透射光中不同波长的干涉高峰分得很开,利用别的吸收型滤光片可把不允许透过的光滤掉,从而得到窄通带的带通滤光片,其通频带宽度远比普通吸收型滤光片要窄。另外还有全电介质的法布里-珀罗型滤光片根据需要,带通滤光片的通频带可从红外到紫外。在可见光区,彩色电视摄像机中可利用这种滤光片把像分离成不同颜色;在红外区,常用于二氧化碳激光器、导弹制导系统及卫星传感器等测量部件测量光学部件是前表面的光镜系统,用于产生不受波长约束的,非常鲜明光束,在测量位F进行荧光和光密度检测。同时此测量部件收集进入发射读数通道的

5、发射光。在测量光束进入微孔前,先由参比传感器测一下光束密度,参比传感器的数据用于校准结果,以补偿光源长时间闪烁和短时闪烁强度的波动。发射光读数模块发射光单色器通过二个顺序连接的衍射光栅单色器获得高纯度的光线,带宽12nm。发射衍射顺序滤光片用于阻止不想要的单色器产生的谐波发射发射光检测器通过光电倍增管将发射光信号转化为电子信号,动力学范围自动可调或根据测量条件手工调节。手工调节有4种选择:低、中低、中高、和高范围。除荧光检测,此模块也可用于化学发光光谱扫描。光密度检测模块光密度测量是将激发光模块作为光度测量的光源。光密度测量模块位于测量位F荧光底读模块

6、此模块基于光纤将光由光谱扫描模块传输至底读模块。此底读光学部件位于测量位L。化学发光检测模块此模块是选项,位于仪器前部,自动进样器之间。连接至测量位L交叉干扰防护罩可阻止邻近孔的干扰,根据板的类型自动设定缝隙。有明确的缝隙选择可用于96、384和1536孔,大孔板还是使用96孔板的缝隙。光吸收检测模式波长选择器检测器Io=未被样品吸收光的强度光源波长选择器检测器光源样品I=被样品吸收光的强度透光率(%T)=I/Iox100,吸光度A=-lg(I/Io)光吸收检测模式原理VarioskanFlash光吸收检测模式特点---光谱范围光源:高能量氙灯通过双单

7、色光发生器(DoubleMonochromator)进行分光,最大程度消除光栅 分光过程中所产生的游离杂散光,确保所产生的光谱更纯波长范围200–1000nm,波长连续可调,1nm递增量光程校正技术---PathlengthcorrectionPathlength水平光路检测(分光光度计检测方式)使用比色皿光程通常固定为1cm光程与液体体积无关OD值只取决于液体浓度A=€cLA=吸光度值€=消光系数(摩尔吸光系数)C=浓度L=光程(incm)比尔定律垂直光路检测(微孔板检测方式)使用微孔板光程与液体体积有关OD值取决于液体体积和浓度对于已知浓度的样品,

8、其€c为常数(k=€c)公式中k为CorrectionFactor以水相溶液为例,水在970~

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