豚鼠耳蜗电位实验报告

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1、豚鼠耳蜗电位实验报告一、实验目的①学习豚鼠耳蜗电位的记录方法。②观察耳蜗微音器电位及听神经动作电位，并了解其产生机理。二、实验原理听觉的适应刺激是声波。外界的声波振动先经过外耳道、鼓膜和听骨链传到内耳，引起耳蜗中的内淋巴和基底膜振动，使毛细胞兴奋产生去极化电位，然后再通过突触传递使听神经纤维末梢产生类似兴奋性突触后电位的局部电位和动作电位。当动作电位经听神经传导通路传向皮层中枢时，则产生听觉。在实验条件下，从耳蜗中可记录到四种电位变化：①耳蜗内电位（EP），②耳蜗微音器电位（CM），③总合电位（SP），④听神经总合动作电位（CAP）。在短声的刺激下，可记录

2、到两种明显的电位变化，即耳蜗微音器电位（CM）及复合神经动作电位（CAP）。记录耳蜗微音器电位和复合听神经动作电位有三种方法：（1）将记录电极放置在圆窗上，（2）将记录电极直接插入耳蜗内，（3）将记录电极插入颅骨表面的面神经孔内。本实验采用方法（1）进行记录。三、实验动物与器材年幼豚鼠（体重300-400g、击掌反应呈阳性），常用手术器械（豚鼠类），钟表镊子，丝钻一套（钻头直径:1mm、0.5mm及锈花针型），扬声器，RM6240B生理信号采集处理系统，引导电极，手术冷光灯，20%氨基甲酸乙酯、纱布、棉球。四、实验方法与步骤1.手术(1)用20%氨基甲酸乙

3、酯，按7.5ml/kg体重腹腔注射，将豚鼠麻醉。待动物没有明显挣扎反应后，剪净一侧耳廓四周的毛，腹位固定在解剖台上。(2)沿耳廓根部的后上缘切开皮肤，剪掉耳廓，暴露耳道孔。用双氧水或粗纱布将耳道孔上部及后部的头骨上的皮肤及结蒂组织去除（注意:因皮肤较厚，去皮时要注意止血）。先找到顶间骨、颞骨与枕骨粗隆，然后沿枕骨外缘下行，用手指边探摸颞骨的乳突部，边做钝性分离，充分暴露颞骨乳突。此乳突部位在枕骨粗隆的下方1.5cm左右，外耳道开口后方约0.5cm处。(3)用丝钻在颞骨乳突靠近耳道孔处钻一小孔（直径约1mm）。此处骨质很薄，切勿用力过猛而插入鼓室过深，伤及耳

4、蜗。钻孔后，用钟表镊子尽力将孔扩展，充分打开鼓室，以便暴露耳蜗。借助冷光灯照明，此时可见其耳蜗呈淡黄色，壁上有细的血管走行。耳蜗底圈在外，正圆窗在底圈上方，可见其膜，卵圆窗膜见不到。(4)借助冷光灯照明，将银丝电极放置在圆窗上。2.测试电极安放将银丝电极放置在圆窗膜上，记录电极（红）与银丝电极相连，参考电极（绿）夹在耳廓皮肤创口上，地线（黑）插在背部皮肤上。3.RM624OB生理记录系统参数设置刺激器选择:同步触发，单刺激，正电压刺激，刺激强度3V，波宽0.1ms记录通道参数设置。4.观察短声（方波）刺翠下引发的耳蜗微音器电位和听神经动作电位。5.语音刺激

5、下，观察观察耳蜗微音器电位现象。16.深度麻醉下微音器电位和听神经动作电位观察。五、实验数据及分析（1）正向、反相单刺激PositiveStim.200CM1000-100N2Response/μV-200CAP-300N1-40000.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.0090.01Time/sNegativeStim.2001000CM-100N2CAPResponse/μV-200N1-300-40000.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.0090.01Tim

6、e/sFig1如图1所示，蓝色箭头表示刺激开始时刻。正相和负相单刺激均可明显观察到耳蜗微音器电位（CM）、复合动作电位（CAP）和N1、N2。可见耳蜗微音器电位潜伏期极短，均小于0.3ms，且很忠实地记录了刺激声，因为正相刺激下CM的谷恰好对应了负相刺激下CM的峰。刺激声反相时，N1、N2并不反相。（2）正相刺激，逐渐增大刺激强度我们以1V为步长，从1V到12V依次增加正相刺激强度。检测的结果发现：当刺激强度在1V~5V时，随着刺激的强度增加，耳蜗微音器电位越来越强，在刺激为5V时达到最强；当刺激强度等于6V时，微音器电位显著变小，而大于6V时，微音器强度

7、与6V时基本类似，略微减弱。下面仅以4、5、6、12V等刺激的结果展示。22004V5V1006V12V0-100Response/μV-200-300-40000.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.0090.01Time/sFig2（3）测定产生听神经动作电位的刺激阈值及此时耳蜗微音器电位的阈强度2001000-100Response/μV0.4V-2000.5V0.6V3V-3000.1V0.2V-40000.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.0090.01Ti

8、me/sFig3如图3所示，我们从0.1V起给刺激声，步长为0.1