《交叉配血知识》PPT课件

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1、12021/8/6交叉配血知识讲座检验科马燕22021/8/6RBC表面有丰富唾液酸,在中性环境中带负电荷,互相分离。可通过缩短细胞间距,以及在致敏细胞上的抗体之间搭桥使RBC凝集。凝集一般为二个步骤抗体吸附于RBC抗原上成为致敏状态致敏RBC凝集形成块状ΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫΫ32021/8/6标本的采集及要求一血型二不规则抗体的筛选三交叉配血四一二三四42021/8/6标本的采集与要求52021/8/61.标本要新鲜:前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取<48h,避免因回

2、忆反应产生的抗体漏检。新近的输血或妊娠:可引起意外抗体迅速出现,如果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是输血前48h内抽取的。血量约为5ml。2.使用右旋糖酐、pvp等:治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰标本要具有代表性,能代表患者目前状况62021/8/63.24小时内输了12u血后:可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。4.防止血样的稀释和溶血的产生:溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩盖在输血前实验中抗体反映引起

3、的溶血5.标本标识:唯一性标识无误、与输血申请单一致6.使用血浆标本:应排除纤维蛋白原的干扰7.输血后标本保存:2-8℃,至少一周。72021/8/6血型1.红细胞悬液的配制2.离心力的标准3.离心后结果观察4.盐水试验5.正反定型结果不一致原因及处理82021/8/61.红细胞悬液的配制洗涤洗涤目的:去除RBC表面物质少量的血浆蛋白已溶解红细胞的基质(有竞争抗体的作用)抗凝剂(有抗补体的作用)至少要用大量生理盐水洗一次浓度2%:一般用于抗体效价的测定5%:一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验等大多

4、数血型血清学试验10%:一般用于测定抗体的亲和力试验92021/8/62.离心力的标准不同规格离心机,力矩不同,统一离心转速,但没有统一离心力。离心转速换算公式:RCF=1.118×10-5×(rpm)2×R(cm)3.离心后结果观察注意事项将试管成30-45℃角拿在手上,细胞扣朝上,手腕轻轻用力,用液体去冲细胞扣。切不可用力使劲摇试管,那样凝集颗粒会被摇散,弱凝集则会误判为阴性。-细胞成细沙状沿试管壁流下+细胞成块状或成齿状沿试管壁流下102021/8/6常用的记录符号及所示的凝集强度4+一个大的凝集

5、块,背景透明,无游离细胞3+数个大凝集块,背景透明,无游离细胞2+许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离细胞1+很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要用显微镜观察W+微小凝集块,肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察O无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察PH部分溶血H完全溶血WF混合外观112021/8/64.盐水试验多采用立即离心法正确的操作是:RBC悬液加到血清后立即离心并观察结果反应时间过长而延误离心对ABO血型系统的抗体检出影响室温2分钟后离心可能使3+

6、~4+的凝集减弱为0+~1+,并有溶血室温5分钟后离心原有凝集可能消失,并有溶血有的标本延迟离心原有凝集会变为既不凝也不溶血,难以发现ABO血型的不配合。(多发生在O型人的血清抗体与A型、B型或AB型红细胞反应的试验中,发生率为2%-3%.发生机制是反应强的抗A、抗B和抗原强度强的A、B抗原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下,固定到红细胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶血)解决的方法:A:血清与红细胞混合后立即离心。B:用血浆或灭活的血清做试验C:用EDTA盐水配制红细胞悬液,D:稀释血清

7、122021/8/6加样时先加血清再加红细胞,以避免漏加;抗体和抗原的比例一般为2:1。必须要做正反定型实验才能确定血型。正定型试验有条件可加做抗AB(检测弱A、弱B)反定型一定要加做O细胞,(发现不规则抗体)132021/8/65.正反定型结果不一致原因:技术、受检红细胞或血清本身(1)技术和管理错误器材不洁——假阳试剂污染或不足——假阳标本和试剂搞错——假阳、假阴离心过度或不足——假阳、假阴结果记录或判断错误——假阳、假阴漏加试剂——假阴阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴142021/8/6(2)

8、标准血清效价太低、亲和力不强。如抗A血清效价不高,可将A亚型误定为O型,AB型误定为B型。(3)红细胞悬液过浓或过淡,抗原抗体比例不适当,使反应不明显,误判为阴性反应。(4)血清异常华通胶或血清蛋白异常引起串钱状形成,影响反定性结果(5)红细胞致敏在含高蛋白介质试剂中可发生凝集,产生假阳性(6)近期曾异型输血,病人血液标本成为不同型别的红细胞混合物,定型时显示“混合外观凝集”现象。(7)疾病因素导致抗原减弱某些白血病病人ABO血型抗原可受到

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