实验六++植物抗氧化酶活性的测定

《实验六++植物抗氧化酶活性的测定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验六植物抗氧化酶活性的测定背景“控制与被控制”理论POD、SOD、CAT（AOX）（PPO）抗氧化酶与植物抗逆性关系JournalofExperimentalBotany,2009，60（2）：377–390H2O2H2O2李忠光，2009.10POD一、实验原理Peroxidase,POD（ROS,H2O2）PPOPolyphennoloxidase,PPO抗氧化酶动力学曲线植物抗氧化酶提取和测定参考文献二、实验方法1、提取：分别取0.5g实验材料→加入少许石英砂和3ml提取液（50mmol/LPBS,pH5.8,内含0.１m

2、mol/LEDTA,1%PVP）→充分研磨→转入离心管中→用2ml提取液洗研钵→5000rpm离心10min→上清液定容至5ml→用于测定POD和PPO酶活性或分装后转至-20或-80℃保存。2、POD测定：取POD反应混合液（10mmol/L愈创木酚，5mmol/LH2O2,用PBS溶解）2.90ml，25℃水浴5min，加入酶液100ml（空白调零用提取液取代），立即记时，摇匀，读出反应30s和3min时的A470。用ε计算POD活性。3、PPO测定：取PPO反应混合液（20mmol/L邻苯二酚，用PBS溶解）2.8ml，25

3、℃水浴5min，加入酶液0.2ml（空白调零用提取液取代），立即记时，摇匀，读出反应30s和2min时的A410。以每分钟A值变化0.01所需要的酶液的量为一个活力单位（U），则：PODactivities=(mmol.g-1FWmin-1)PPOactivities=(U.g-1FW)4、计算5、思考题5.1简述植物POD和PPO的生理意义。5.2在论述呼吸代谢多途径及其生理意义。