《蛙的系列实验》PPT课件

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1、蛙的系列实验动物学教研室顾勇实验目的1.学习坐骨神经——腓肠肌标本的制备技术。2.了解蛙微循环区各类血管血流特点及某些药物对血管舒缩活动的影响。3.了解脊髓反射和反射弧的组成及反射弧各部位的作用。4.了解迷路在维持动物姿势平衡和正常运动中的作用。5.初步培养学生合理利用实验材料进行综合实验的能力。1．蛙类心跳起源的分析。2．蛙类微循环的观察。3．脊髓反射和反射弧的分析。4．蛙一侧迷路破坏的效应。5．蛙类坐骨神经－腓肠肌标本的制备。实验内容（供选择）材料与用品（一）材料活蛙（限1人1只蛙）。（二）用品显微镜、解剖器具、毁

2、髓针、玻璃针、蜡盘、有孔橡皮蛙板、铁支架、细铁丝钩或蛙嘴夹、电炉、温度计、秒表、注射器、小烧杯、大烧杯、滴管、培养皿、大头针、纱布、棉球、细线、小滤纸片。0.65%生理盐水、0.01%去甲肾上腺素、0.01%组织胺、20%氨基甲酸乙酯、1％可卡因、任氏液、0.5％、1％和2%硫酸溶液、瑞氏染液、蒸馏水、冰水、水。操作与观察（具体实验项目及其顺序由学生自行选择和安排）1．左手握蛙，背部向上，用食指下压其头部前端，使头前俯，中指抵住其胸部，拇指按其背部，使头与脊柱相连处凸起。右手持毁髓针自两眼之间沿中线向后端触划，当触到一

3、凹陷处即枕骨后凹。2．将毁髓针由凹陷处垂直刺入，再将针尖从枕骨大孔向前刺入颅腔，并在颅腔内搅动，捣毁脑组织。如针确在颅腔内，则可感到针触及颅骨（图16－1）。3．将针退回至枕骨大孔，然后针尖转向后方与脊柱平行插入椎管，一边伸入，一边旋转毁髓针以毁髓。当蛙四肢僵直而后又松软下垂时，即表明脑和脊髓完全破坏。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，则必须重新毁髓。4．拔出毁髓针，用一小干棉球将针孔堵住，以止其出血。（一）双毁髓（二）心搏起源的分析1．暴露心脏(1)将双毁髓蛙背位置蜡盘中，展开四肢，用大头针于腕部和跄部钉人，以将蛙

4、固定在蜡盘中。**为什么用双毁髓蛙进行心搏起源的分析？(2)左手持镊提起胸骨后方腹部皮肤，右手持剪剪开一小口，然后将剪刀由切口处伸入皮下，向左右两侧锁骨的外侧方向剪开皮肤，并向头端掀开皮肤。(3)再用镊子提起胸骨后方的腹肌，用金冠剪在腹肌上剪一小口后，沿皮肤切口方向剪开胸壁，**剪时剪刀尖紧贴胸壁，以免损伤内脏和血管，剪断左右乌喙骨和锁骨，剪去胸壁，使创口成1个倒三角形，此时可见到心脏在围心腔内搏动。(4)左手持眼科镊提起半透明围心膜，右手用眼科剪剪开围心膜，暴露心脏。**以下实验中应不时用任氏液保持心脏湿润。为什么？

5、2．观察心脏的构造（图16－2）参见本实验“蛙的外形及内部构造”中“心脏及其周围血管”部分。3．观察心搏过程观察静脉窦、心房和心室收缩的顺序，并用秒表记录心搏频率。注意心室收缩时容积和颜色的变化。4．不同温度刺激蛙心各部位用盛有约40。C温水的小试管底部分别接触心房、心室和静脉窦1min，重复3次并记录每次温度刺激时心脏各部位的搏动频率。换用盛冰水的小试管，重复上述试验并记录。**小试管底部接触所刺激部位时，不能接触到心脏其他部位，以免影响实验结果。根据实验结果，分析心脏何部位的搏动为心搏的起源。5．斯氏结扎(1)用眼

6、科镊在左右动脉干下穿一线备用，将心尖翻向头端，暴露心脏背面，然后将放置在动脉干下的那条线在窦房沟处作一结扎（图16－3），即为斯氏第1结扎（图16－2A）：观察心脏各部分搏动节律的变化，可见心房、心室立即停止搏动，而静脉窦仍继续搏动，用秒表记录静脉窦搏动频率。待心房和心室恢复搏动后，分别记录它们的搏动频率。(2)然后在冠状沟处穿线做第2结扎，即斯氏第2结扎（图16－2B）。这时心房和静脉窦仍继续搏动，心室则停止搏动。待心室恢复搏动后，记录心脏各部位的搏动频率。**根据试验结果，分析蛙心脏不同部位节律性的高低，正常情况下

7、心脏节律活动的顺序。（三）蛙类徽循环的观察蛙的肠系膜、舌及后肢足蹼等部位的组织较薄，适于用来制备微循环观察标本。1．蛙肠系膜标本的制备(1)取蛙I只，称重后于其皮下淋巴窦注人20%氨基甲酸乙酯(2－3mg/g体重)，约10－15min，动物即进入麻醉状态。(2)将已麻醉的蛙背位固定于蛙板上，使其身体左侧紧靠蛙板上的小孔。用镊子轻轻提起左侧腹壁，**不要将内脏也夹起。再用剪刀在腹壁上剪一长约1cm的纵向切口。轻轻拉出小肠拌，将肠系膜展开过蛙板上的小孔，并用大头针固定在蛙板上（图16－4）。**小肠拌不能绷得太紧，以免拉破

8、肠系膜或阻断血流，另需要适量任氏液润湿肠系膜，以免干燥，影响血液循环。2．若用蛙舌或足蹼作观察标本，则用大头针将麻醉的蛙固定在蛙板上，使其鼻端离板孔0.5cm，拖出舌头，拉紧过孔，并用大头针将舌缘固定在蛙板孔的周缘；或将蛙两足趾展开，使趾蹼过孔，用大头针固定。3．观察将标本置低倍镜下观察。可见有许多纵横交错粗细不等的血管。根据血管