《酶促反应影响因素》PPT课件

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1、影响酶促反应的因素酶反应速度不同的酶在不同的条件下反应速度曲线都不一样，但大致相似以产物浓度对反应时间作图，可得到酶促反应速度曲线0酶反应速度正确的酶促反应速度应该是在反应初期短时间内的反应速度，即反应初速度一.底物浓度的影响(一)酶反应速度与底物浓度的关系曲线对于简单的酶反应，当酶浓度和其他条件恒定时：一.底物浓度的影响(一)酶反应速度与底物浓度的关系曲线对于简单的酶反应，当酶浓度和其他条件恒定时：v[S]0Vmax零级反应一级反应混合级反应该曲线可以用米氏方程来描述(二)米氏方程v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程对于单底物、单产物反应，其反应过程需经过中间复合物E

2、S，即1.米氏方程的推导E＋SK1K-1ESK2K-2E＋Pv=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程1.米氏方程的推导Michaelis-Menten的三个假设：(2)反应体系处于稳态即[ES]不变→ES的生成量=ES的分解量。→[S]>>[ES]→[S]0=[S]+[ES]≈[S](3)[S]>>[E]v=Vmax·[S]Km+[S](1)推导的v为反应初速度E＋SK1K-1ESK2E＋P[E]0=[E]+[ES]E＋SK1K-1ESK2E＋Pk1[E][S]=k-1[ES]+k2[ES]=(k-1+k2)[ES]设Km=(k-1+k2)/k1→[E][S]=Km[ES]

3、[E][S]=Km[ES][ES]=[E]0·[S]Km＋[S]v=k2[ES]=k2[E]0·[S]Km＋[S]Vmax=k2[E]0v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程2.米氏方程的讨论(1)当[S]→∞时，v≈Vmax∴为零级反应(2)当[S]→0时，v≈Vmax/Km·[S]∴为一级反应(3)米氏方程的曲线为双曲线v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程2.米氏方程的讨论有两条渐近线：当[S]→∞时，逼向渐近线v=Vmax当[S]“→”-Km时，逼向渐近线[S]=-Kmv=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程3.米氏方程中常数的意义(1)Vmax——

4、最大反应速度由于Vmax=k2[E]0，∴Vmax与酶浓度成正比，v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程3.米氏方程中常数的意义(2)Km——米氏常数由于Km=(k-1+k2)/k1，∴为复合常数。Km的值是当酶促反应速度为最大反应速度的一半时的底物浓度。所以Km的单位为浓度单位。Km是酶的特征常数，表示酶与底物的亲和力。Km值越大，亲和力越小。v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程3.米氏方程中常数的意义(2)Km——米氏常数v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程3.米氏方程中常数的意义由于Vmax=k2[E]0，∴k2=Vmax/[E]0酶的转换数是指

5、酶充分被底物饱和时，每个酶分子在单位时间内转化底物的分子数。用Kcat表示。Kcat的单位是s-1。Kcat也是酶的特征常数，反映酶的催化效率。由于酶的高催化效率，这个值常常很高。(3)k2——酶的转换数v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程3.米氏方程中常数的意义一些酶的转换数酶底物Kcat(s-1)过氧化氢酶乙酰胆碱酯酶b-内酰胺酶延胡索酸酶RecA蛋白酶H2O2乙酰胆碱青霉素C延胡索酸ATP4000000014000020008000.4(3)k2——酶的转换数v=Vmax·[S]Km+[S](二)米氏方程4.米氏方程中常数的测定(1)解方程组：只要知道两组v,[S

6、](2)作图法：比解方程组法更具统计意义，所以要准确。②　双倒数作图法：即1/v-1/[S]作图①v-[S]作图法：Vmax难确定，从而导致Km也难确定。此法较前一种作图法准确。.1vVmaxKmVmax=[s]1＋1v=Vmax·[S]Km+[S]酶浓度曲线二.酶浓度对酶反应速度的影响Vmax=k2[E]0在一般的酶促反应中，常常[S]>>[E]，酶反应速度达到最大反应速度。v[E]0三.pH对酶反应速度的影响pH对酶反应速度的影响较大：pH影响酶分子极性基团的解离，也就影响了酶与底物的结合及催化。pH影响底物的解离，从而影响酶与底物的结合。极度pH的条件引起酶分子构象的改变，

7、甚至引起变性。0最适pHpHv三.pH对酶反应速度的影响酶的最适pH一般在7左右也有很多例外，如胃蛋白酶的最适pH只有1.5酶的最适pH并非酶的特征性常数，它与底物的种类、浓度等因素有关三.pH对酶反应速度的影响四.温度对酶反应速度的影响温度对酶反应速度的影响具有双重性：随着温度的升高，反应速度会加快。和一般化学反应相同，在达到最适温度之前，温度每升高10℃，反应速度是原来的1~2倍。随着温度的升高，酶蛋白会失活，使反应速度下降。绝大多数酶在60℃以上即失去活性。四.温度对酶反应