生物化学实验--蛋白质性质试验

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1、生物化学基础实验教学课件中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室生化与分子生物学实验室于乐军目录实验一生物化学实验技能培训实验二蛋白质部分性质实验实验三Folin-wu法定量测定血糖的含量实验四Folin-酚试剂法测定蛋白质浓度实验五氨基酸的纸层析实验六醋酸纤维薄膜电泳血清蛋白实验七酵母RNA的提取及鉴定实验八DNA的提取及测定实验九胰蛋白酶的活力测定实验十水果中维生素C的定量测定实验十一聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳牛血清中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室生物化学实验技能培训中国海洋大

2、学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室通过生物化学实验应该做到：⑴学习设计一个实验的基本思路，掌握各个实验的基本原理，学会严密地组织自己的实验，合理地安排实验步骤和时间。⑵训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生物化学实验仪器。⑶学会准确翔实地记录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力，能够整齐清洁地进行所有的实验，培养严谨细致的科学作风。⑷掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术，为今后参加科研工作打下坚实的基础。中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室实验室规则⑴实验前必须认真预习实验

3、内容，明确本次实验的目的和要求，掌握实验原理。⑵实验时自觉遵守实验室纪律，保持室内安静，不大声说笑和喧哗。⑶实验过程中要听从教师指导，认真按照实验步骤和操作规程进行实验。若想改进和设计新的实验方法，必须取得教师的同意。实验时认真进行实验记录，实验完毕及时整理数据，按时上交实验报告。中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室⑷实验台面、称量台、药品架、水池以及各种实验仪器内外都必须保持清洁整齐，药品称完后立即盖好瓶盖放回药品架，严禁瓶盖及药勺混杂，切勿使药品（尤其是NaOH）洒落在天平和实验台面上，毛刷用

4、后必须立即挂好，各种器皿不得丢弃在水池内。⑸配制试剂按实验实际使用量配制，多余的重要试剂和各种有机试剂要按教师要求进行回收；昂贵试剂需要回收，不得丢弃。中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室⑹配制的试剂和实验过程中的样品，尤其是保存在冰箱和冷室中的样品，必须贴上标签、写上品名、浓度、姓名和日期等，放在冰箱中的易挥发溶液和酸性溶液，必须严密封口。⑺强酸强碱以及其他实验废液必须倒入废液桶。电泳后的凝胶和各种废物不得倒入水池，只能倒入废物桶。⑻使用贵重精密仪器应严格遵守操作规程。使用分光光度计时不得将溶液

5、洒在仪器内外和地面上。仪器发生故障应立即报告教师，未经许可不得自己随意检修。中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室⑼实验室内严禁吸烟、饮水和进食，严禁用嘴吸移液管和虹吸管。易燃液体不得接近明火和电炉，凡产生烟雾、有害气体和不良气味的实验，均应在通风条件下进行。⑽实验完毕必须及时洗净并放好各种玻璃仪器，插好自动部分收集器上的试管，保持实验台面和实验柜内的整洁。⑾严禁抄拿他组仪器，不得将器皿遗弃在分光光度计内和其他实验台面上，打破了玻璃仪器要及时向教师报告，并自觉登记，学期结束时按规定进行处理。⒀每日实

6、验完毕，值日生要认真做好实验室的卫生值日工作。最后离开实验室的实验人员，必须检查并关好水、电、门、窗。中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室蛋白质部分性质实验—蛋白质颜色反应和沉淀反应中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用，产生颜色。不同的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦不完全相同。颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质也可产生同样的颜色反应，因此不能根据颜色反应的结果来决定被测物是否为蛋白质。另外，颜色反应也可作为一些常用蛋

7、白质定量测定的依据。第一部分蛋白质的颜色反应中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室一、试验原理二、实验仪器1、吸管2、滴管3、试管4、电炉5、pH试纸6、水浴锅三、实验试剂1、卵清蛋白液：鸡蛋清用蒸馏水稀释10-20倍，3-4层纱布过滤，滤液放在冰箱里冷藏备用。2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸馏水稀释至200ml。3、Millon’s试剂：40g汞溶于60ml浓硝酸（水浴加温助溶）溶解后，冷却，加二倍体积的蒸馏水，混匀，取上清夜备用。此试剂可长期保存。4、1%CuSO4：1gCuSO4晶体溶于蒸馏水，

8、稀释至100ml5、10%NaOH：10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml6、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%的乙醇并稀释至100ml.7、尿素晶体8、浓硝酸9、冰醋酸10、浓硫酸中国海洋大学生物基础实验教学中心生化与分子生物学实验室（一）米伦（Millon’s）反应原理：米伦试剂是硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸汞的混合物。他能与苯酚及某些二羟