嗜酸性粒细胞和血小板计数

嗜酸性粒细胞和血小板计数

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1、嗜酸性粒细胞和血小板计数医学检验系一、嗜酸性粒细胞计数目的掌握显微镜手工计数的方法。原理用稀释液将血液稀释一定倍数,冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的嗜酸性粒细胞数量,经换算求出每升血液中的嗜酸性粒细胞数。一、嗜酸性粒细胞计数器材显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球试剂嗜酸性粒细胞稀释液标本EDTA抗凝血6操作1加稀释液取小试管1支,加稀释液0.38ml。2加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,轻轻加至红细胞稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,立即混匀。3充池混匀后用微量吸管将红细胞悬液

2、冲入计数池,室温下平放3~5分钟,待细胞下沉后于显微镜下计数。4计数用低倍镜依次计数两边计数池四角和中央五个大方格(共计十个大方格)的红细胞数。5计算细胞/L=N×10/10×20×106=0.02N×109注意事项1.嗜酸性粒细胞易于破碎,振荡不宜太猛烈。2.将嗜酸性粒细胞稀释液充入计数池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足的现象。3.计数应在60min内完成。4.每份标本最好计数2次,若计数误差在10%以内,取其均值报告,若计数之差大于10%,应作第3次计数,取2次相近结果的均值报告。二、血小板计数目的掌握显微镜血小板计

3、数的方法。原理用血小板稀释液将血液稀释一定倍数,同时破坏溶解红细胞。将稀释的血液冲入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的血小板数,经换算求出每升血液中的血小板数。器材显微镜、改良计数板、试管、微量吸管、移液管、洗耳球试剂血小板稀释液标本EDTA抗凝血二、血小板计数1.加稀释液用吸管吸取稀释液0.38ml于小试管中。2.加血用清洁干燥微量吸管吸取抗凝血20μl,擦去管外余血,轻轻加至血小板稀释液底部,再轻吸上清液清洗吸管2~3次,混匀。3.充池混匀后用微量吸管将血小板悬液充入计数池,室温下静置10~15分钟,待血小板充分下沉后于显微

4、镜计数。4.计数用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的血小板数。5.计算血小板/L=N×5×10×106×20=N×109/L操作1.混匀充分,不可过度振荡,以免血小板破坏、聚集或有气泡,引起计数误差。2.在充池时要一次完成,不能产生满溢、气泡或充池不足及充液后玻片移动的现象。3.时间较长,血小板会失去光泽而不易辨认,应在1h内计数完毕4.每份标本最好计数2次,若计数误差在10%以内,取其均值报告,若计数之差大于10%,应作第3次计数,取2次相近结果的均值报告。注意事项思考题:你的计数结果与同组同学结果有何差别,试分

5、析原因。

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