rna的生物合成-转录药学

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1、第十一章RNA的生物合成——转录RNA的生物合成包括RNA转录—生物体以DNA为模板合成RNA的过程称为转录或基因转录。RNA复制—某些RNA病毒传递遗传信息的方式第一节RNA转录体系DNA模板四种NTPRNA聚合酶某些蛋白因子必要的无机离子一、DNA是RNA转录的模板(一)转录是不对称的*不是细胞内DNA全长都转录*转录时一条DNA链起转录生成,称模板链(templatestrand),或称有意义链与其互补的DNA链无转录活性称编码链(codingstrand),或称反意义链。编码链与RNA的序列完全

2、相同,只是T换成UDNA双链中包含许多基因,而各基因的模板链不全在同一条链上,这种现象称为不对称转录。即:(1)DNA双链中一条转录时,另一条链不被转录;(2)模板链并非永远在同一条链上。5’5’3’3’(二)可转录的DNA一个区段为一个转录单位5’3’转录单位调节组件结构基因启动子调节基因操纵基因可转录出RNA的区段启动子(promotor):是转录起始点之前的一段核苷酸序列,是RNA聚合酶识别和结合的部位,又称启动基因。*原核生物启动子:-35区-10区+1转录方向终止位点3’5’*真核生物启动子:

3、核心启动子:TATA盒、起始子(initiator)近侧序列元件:GC盒、CAAT盒、OCT盒等RNA二、RNA聚合酶是转录的主要酶RNA聚合酶即DNA指导的RNA聚合酶(DNAdirectedRNApolymerase,DDRP)模板:单链DNA原料:4种NTP产物:RNA(一)RNA转录的化学反应NTP(NMP)n+ppiRNA聚合酶(二)RNA聚合酶具有多种功能*5’→3’聚合活性*解旋解链酶的活性使核苷酸通过磷酸二酯键依次聚合将模板DNA链解开一小段(≤20个碱基对)--缺乏3’5’外切酶活性

4、,无校读功能全酶:五个亚基(2’)组成2’称为核心酶参与RNA链的延长亚基称为起始因子辨认启动子,协助转录起始(三)原核生物的RNA聚合酶参与核心酶的组装抗结核菌药利福霉素可抑制原核生物转录:与亚基非共价结合,阻止第一个NTP的进入结合底物并催化形成磷酸二酯键催化活性中心(hnRNA)、snRNARNA聚合酶I、II、III(四)真核生物的RNA聚合酶第二节RNA转录的基本过程三个阶段:起始延长终止以原核生物为例:一、链的起始因子辨认启动子并与核心酶结合为全酶识别转录起始点RNA聚合

5、酶将DNA局部解链17bp,*起始点,RNA聚合酶催化2个NTP按碱基配对原则以氢键结合于DNA模板,生成第1个磷酸二酯键*通常转录开始即5’端是pppA或pppG*RNA聚合酶全酶-DNA-pppGpN-OH-3’称为转录起始复合物*转录起始不需要引物*转录开始后,因子脱落并可反复利用由核心酶催化RNA链延长方向5´3´二、链的延长核心酶三、链的终止原核生物转录终止方式:1、不依赖因子的终止富含CG的发夹结构(terminaor)终点的寡聚U*六聚体,50kD,有依赖RNA的ATP酶活性,是一种

6、RNA-DNA解旋酶。*识别新生RNA链上的终止信号,使RNA-DNA双螺旋解开,释放RNA,并和RNA聚合酶一起脱落。2、依赖因子的终止因子(终止因子,terminationfactor)第三节RNA转录后的加工过程真核:有核,断裂基因,需加工,才成为有生物功能的RNA,即RNA的成熟过程。原核:无核,连续基因,很少加工转录产物在原核和真核生物的去路:一、信使RNA(mRNA)的加工真核细胞的mRNA是由其前体hnRNA加工而成1、剪接(splicing)*剪内含子,接外显子*选择性剪接产物不同2

7、、5’端加m7GTP“帽”3、3’端加polyA“尾”4、碱基的修饰5、RNA的编辑与RNA沉默二、转运RNA(tRNA)的加工1、切去5’端部分核苷酸2、切去3’端几个核苷酸,加入CCA末端3、含多个tRNA前体的剪切4、碱基的修饰三、核蛋白体RNA(rRNA)的加工1、rRNA的剪切2、碱基的修饰第四节核酶——具有催化功能的RNA1982年,美,ThomasCech,四膜虫的rRNA存在自我剪接*核酶:具有催化功能的RNA(ribozyme)。*核酶发现的意义:(自学)十一章作业一、简答1、简述mR

8、NA转录后加工的方式。2、简述何为模板链和编码链?二、论述从模板、原料、产物、碱基配对、聚合酶等方面列表比较复制和转录的异同点。复制转录原料dNTP(N=A.T.C.G)NTP(N=A.U.C.G)模板DNA双链DNA的一条链产物DNA三种RNA方向5’端→3’端5’端→3’端方式半保留复制不对称转录配对A-T;C-GA-U;T-A;C-G主要酶及因子DDDP,拓扑异构酶,解链酶,引物酶,DNA连接酶,SSBDDRP,ρ因子等产物加工无剪接

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