腰痛宁胶囊药材活性部位不同组合对大鼠软骨细胞的影响_张立国

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1、腰痛宁胶囊药材活性部位不同组合对大鼠软骨细胞的影响张立国1，欧阳霄雯1，吴婷婷1，史万忠2，倪力军1*(1.华东理工大学化学与分子工程学院，上海200237；2.上海中医药大学附属曙光医院，上海200021)［摘要］目的:评价腰痛宁胶囊中各活性部位对白介素1β(IL-1β)诱导大鼠软骨细胞的影响及其相互作用。方法:根据腰痛宁组方原则，将腰痛宁组方药材中的黄酮、皂苷、挥发油(含水提液)、多糖等活性部位依次加入马钱子与麻黄生物碱中，得到6个腰痛宁拆方及全方样品。取7日龄SD大鼠6只，采用Ⅱ型胶原酶消化法分离大鼠软骨细胞，接种24

2、h后随机分空白对照组(含5%小牛血清(FBS)及0.02%吐温-80的－1DMEM培养基)、模型组(含5%FBS，0.02%吐温-80及10μg·LIL-1β的DMEM培养基)及受试药物组(含－1－15%FBS，0.02%吐温-80，10μg·LIL-1β及9.77～0.08mg·L受试药物的DMEM培养基)，给药48h后用CCK8及亚甲基蓝染色法测定各样品对大鼠软骨细胞增殖及葡萄糖胺聚糖蛋白(GAG)合成的影响。同时采用最小二乘优化方法，计算各样品的半数有效浓度(EC50)叠加值，将其与EC50实验值进行比较，以分析各活性

3、部位间的相互作用关系。结果:较腰痛宁拆方样品，腰痛宁组方及全方在考察浓度范围内均对IL-1β诱导的软骨细胞具有较显著的促增殖及促进GAG合成的作用。各拆方样品中可观察到不同程度的协同、拮抗和叠加作用，其中腰痛宁全方样品中各活性部位间的协同及叠加作用更为显著。结论:药引黄酒可显著提高腰痛宁药材组方对大鼠骨关节炎的治疗作用，显示了腰痛宁处方的合理性及其促进软骨细胞增殖及GAG合成的优势。[关键词]增殖；葡萄糖胺聚糖蛋白；骨关节炎；腰痛宁胶囊；活性部位；黄酒[中图分类号]Ｒ285.5［文献标识码］A［文章编号］1005-9903(

4、2014)10-0151-05[doi]10．13422/j．cnki．syfjx．2014100151EffectandInteractionsofActiveFractionsinYaotongningCapsuleonChondrocytesinＲatinvitroZHANGLi-guo1，OUYANGXiao-wen1，WUTing-ting1，SHIWan-zhong2，NILi-jun1*(1.SchoolofChemistryandMolecularEngineering，EastChinaUniversity

5、ofScienceandTechnology，Shanghai200237，China；2.ShuguangHospitalAffiliatedtoShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai200021，China)［Abstract］Objective:ToevaluatetheinvitroeffectsandinteractionsofactivefractionsinYaotongningcapsule(YTNC)byutilizinginterle

6、ukin-1β(IL-1β)activatedchondrocytes．Method:Sixsampleswerepreparedbymixingdifferentactivefractionsincludingalkaloids，flavonoids，saponins，volatileoil，hydrousextractandpolysaccharidesaccordingtotheformulatingprincipleandtheratioofmaterialsinYTNC．Chondrocyteswereobtain

7、edfromsixseven-dayratsusingcollagenaseII，beforetheyweredividedintothreegroups:controlgroup(Dulbecco'smodificationofEagle'smediumDulbecco(DMEM)containing5%fetalbovineserum(FBS)and0.－102%Tween-80)，modelgroup(DMEMcontaining5%FBS，0.02%Tween-80and10μg·LIL-1β)andsamplegr

8、oup(DMEMcontaining5%FBS，0.02%Tween-80，10μg·L－1IL-1βand9.77-0.08mg·L-1samples)．After48h，theproliferationsofchondrocyteswereexaminedthroughcellcoun