一株焦化废水降酚菌的质粒初步研究

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1、应用与环境生物学报C垴I．】．^p畦．／}nv／ron1099，5(smI)=55—58B娃?1999—10-05一株焦化废水降酚菌的质粒初步研究L．——一一一一赵立平肖虹(山西大学生物技术研究所李艳琴太原030006)摘要从处理焦化废水的括性污扼池中，分离得到了一株具有阵酚能力的细菌，JAJA可以在合酚的HP复杂培养基中生长，也可以在以砑为唯一碳源的ttl3P培养基中生长，且冉有产黑色素的特点．用麓裂解提取质粒的方珐发现它古有一千质柱，定名为pxHl，并测定7茸十质牲的太小约为26ida．用限村性内留酵剜f和两af进行取酶切，作出了初步的物理脚谱．pxrn经过20次没

2、有醣作为选择压传代培养后仍然能loD％保留，同时，】^菌仍具有障酚能力。表明其具有很高的遗传稳定性．*t词戽醣菌；质粒；糖理图谱；遗传稳定性帽鼢船唧“1q芒7过703CHARACTERIZATIoNoFpXttl。AND旺)IGENorosPLASM口DOFPHENOLDEGRADDqGSTRADgJAIsoLATEDFRoMTHEWASTEWATER0FACOKEPLANTZHAOLiping．XIAOHong＆LIYanqirt(B／oteehno／％,ylrⅡtltLae．Shattd曲mdT，Tniyttan030006)AbstractAbacterialst

3、zalnJAWaSis山tedanditwlfiehcouldgr“wonphend船B鲫lee盯bon舯眦∞inwa＆ewaterfromacokepl呲．Aninalgenr雌pl蛆midw蚰dlse州eredbyming出alllysism小}lodBndn8In亡dpXHlvi出asI僻about2．6kh．Ap兕H而naryp蛔啦札呲pw鹪衄如bydoul)lecut6唱诫thIe5dc由Ⅱenzymes强fI蚰dmⅡI．After缸丑II如rofculturewitll叫lphenda8selectivepressurefor211li口瑚，100％0fpX

4、ttlm3s蝴Ⅲitl“nedinthelⅪeleriumandJA5tilllladthe”pac畸ofdeedingphen01．ne∞Ⅻ,dtssJ．。涮吐呲pxHJh鲥蝇b学口糟如出b讲睁．The硝日·洒曲jPbehr蛐pbe蒯姆ad叩删d

5、be姗dneedsfurthers山dy．Thisplas嘶dmaybeusefulin00瞄tn蛇d呻0fnewvec【o雌hgeneticen舀neoMl'qgofpllenol蛔diElg[meteria．Keywormphenoldegradalingbacterium；plosmid；physicalrap；目en

6、etiestability随着我国工业建设的迅速发展，来自石油化工、煤炭焦化各种工业废水的捧酚t日盎增加．严重地污染了环境．目前对含酚废水的各种处理方莹中，徽生物阵解方法显示较多优越性【l。1国内外有^从酚库髀基因的定位和结椅组成等角度凡手对降酹茵进行研究【4州】．研究表明，编码陴解有毒有害物庙的基目～般位于质粒上kII,”’我们从处理焦化废水的活性污泥池中分离到一株能降解酚类物质的细菌，车支对分离株质艟进行研究，以期为梅建降酣工程菌．提高障酚能力奠定基础．1材料与方法1．1培养基1．J1LB培养基100mL培养基中古胰蛋白胨Ig，酵母提取物05g，氯化钠Ig，pH70

7、．i1．2I-IP培养基100mL培养基中含苯酚0．Ig，l”gS04005g，(N凰)2s04O．3g，KH2Pq0．2g，玉米浆0．02g，琼脂2g，pH70—75．1．1．3ABP培养基100nlL培养基中含苯酚0．05g，MgS029mg，CaCl20．017755mg，FeS04·7H2005mg，MnS04‘H2001mg．(Nil,)2s0402g，KH2P04J．07g，pH70(过滤除菌)．收槁口崩：1999加5．r9接受日村：1999_05．3应用与环境生物学报5卷1．2降酚菌的筛选从处理焦化废水的活性污泥池中取回的样品中取1mL放入50ⅡIL液体L

8、8培养基中，28℃富集培养，转速为170r／niln．培养过夜，取原液100口L在HP固体培养基上涂板，生长72h后出现菌落．从平板上挑取单茁落分别在ABP培养基和lip培养基上划线，挑选单菌落．1．3质粒的提取及其研究将挑选出的单菌落分剐接于5mLliP液体培养基中，28℃摇床上培养72h，将菌体收集于1．5mLEppcndorf管中．，用碱裂解的方法进行质粒的小规模提取【l”．用0．8％琼脂糖凝胶电诛，EB染色，在GDS8000凝胶图像处理仪中观察井记录结果1．3．I降酚菌质粒的单酶切试验殛其大小的确定用19种限制性内切醇却aIBam