动物蛋白质的胃蛋白酶消化率(体外消化)

《动物蛋白质的胃蛋白酶消化率(体外消化)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、动物蛋白质的胃蛋白酶消化率（体外消化）一、适用范围：本方法适用于动物性原料品质的判定。二、原理：用脱脂的样本在一个热的胃蛋白酶溶液中，稳定地不断搅拌约16小时，予以消化。测定它的蛋白质含量。这种方法不能用于植物蛋白质饲料原料或混合饲料，因为，它们所含复杂的碳水化合物是不能被胃蛋白酶消化的。将溶解了的蛋白质全部作为可消化的，并用其对粗蛋白质的百分率来表示。三、设备：1、恒温水浴振荡器：45±2℃。2、测定粗蛋白质的全套设备。3、过滤装置。4、索氏脂肪浸提器。四、试剂：除测定粗蛋白质用的试剂外，尚需以下试剂：1、0.2%胃蛋白酶溶液的配制

2、：先稀释6.1ml盐酸到1L。在使用前，现配0.2%胃蛋白酶溶液。2、所有胃蛋白酶应具有1：3000的活性。3、加热稀盐酸至42—45℃，然后加入胃蛋白酶2g,轻轻地搅动，使其溶解（此时不要加热！）。即得在0.75mol/L盐酸中的0.2%胃蛋白酶溶液。五、测定步骤：1、准确称取1g脱脂试样，放入300ml碘量瓶内，加入经过预热（42—45℃）的0.2%胃蛋白酶溶液150ml，盖好塞子，在45℃下边搅拌边消化16小时，消化后用滤纸过滤，然后用温水洗净滤纸上的不消化物。将不消化物连同滤纸转入消化管中，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定不消

3、化物中的粗蛋白质含量。2、另取1份脱脂分析试样，按照测定粗蛋白质含量的方法，测定其粗蛋白质含量。然后，根据消化的和不消化的粗蛋白质含量计算出试样的胃蛋白酶消化率。六、测定结果计算与分析：1、计算：动物蛋白质胃蛋白酶消化率（%）=A-B×100A式中：A—试样中粗蛋白质的含量（%）。B—试样中的不消化物粗蛋白质的含量（%）。2、分析：合格的鱼粉，其粗蛋白质的胃蛋白酶消化率应不小于85%；羽毛粉应在75%以上。植物油脂检验不皂化物测定法GB5535-85本标准适用于商品植物油不皂化物的测定。油脂中不皂化物即油脂皂化时，与碱不起作用的，不溶

4、于水的物质，包括留醇，脂溶性维生素的色素等。一、仪器和用具：锥形瓶：250ml冷凝管恒温水浴锅电炉分液漏斗：250ml量筒：50ml索氏抽提器电热恒温烘箱烧杯、试剂瓶等天平：感量0.001g二、试剂：1.0N氢氧化钾乙醇溶液0.5N氢氧化钾水溶液乙醇、乙醚中性乙醚乙醇混合液(2：1)三、操作方法：称取混匀试样5g（W）注入锥形瓶中，加1.0NKOH乙醇溶液50ml，连接冷凝管，在水浴锅上煮沸约30min，煮到溶液清澈透明为止。用50ml蒸馏水将皂化液转移入分液漏斗中，加入50ml乙醚，趋温热时猛烈摇动1min后，静止分层。将下层皂化液

5、放入第二只分液漏斗中，每次用50ml乙醚提取两次。合并乙醚提取液，加水20ml轻轻旋摇，待分层后，放出水层，每次再加水20ml猛烈振摇洗涤两次。先后用0.5NKOH水溶液和水各20ml，充分振摇洗涤一次，如此再洗涤两次。最后用水洗至加酚酞指示剂时不显红色为止。用索氏抽提器回收乙醚，将抽提瓶中的残留物在105℃温度下烘1h，冷却称重，再烘30min，直至恒重为止。将儿重后的残留物溶于30ml中性乙醚乙醇中，用0.02N氢氧化钾滴定至粉红色。四、结果计算：油脂中不皂化物含量按下列公式计算：不皂化物（%）=式中：W1——残留物重量，gW——

6、试样重量，gV——滴定所消耗的氢氧化钾溶液体积，mlN——氢氧化钾溶液的当量浓度0.28——每毫克当量的油酸重量，g双试验结果允许差不超过0.2%，求其平均数，即为测定结果。测定结果取小数点后第一位。过氧化值的测定一、适用范围：本方法适用于油脂及动物性原料的测定。二、原理：油脂氧化过程中，产生的过氧化物，与碘化钾作用，生成游离碘；以硫代硫酸钠溶液滴定，计算含量。三、试剂：1、饱和碘化钾溶液：称取14g碘化钾，加10ml水溶解，必要时微热加速溶解，冷却后贮于棕色瓶中。现用现配。2、三氯甲烷冰乙酸混合液：量取40ml三氯甲烷，加60ml冰

7、乙酸，混匀。3、0.02mol/L硫代硫酸钠标准溶液：称取5g硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H2O）（或3g无水硫代硫酸钠），溶于1000ml水中，缓缓煮沸10分钟，冷却。放置两周后过滤备用。4、1%淀粉指示剂：称取可溶性淀粉0.5g，加入少许水调成糊状倒入50ml沸水中调匀，煮沸，现用现配。四、测定步骤：精确称取2—3g混匀的样品，置于250ml碘量瓶中，加30ml三氯甲烷冰乙酸混合液，使样品完全溶解；加入1.00ml饱和碘化钾溶液。紧密塞好瓶塞，并轻轻振摇0.5min，然后在暗处放置5min，取出加75ml水，摇匀。立即用硫代硫酸

8、钠标准溶液滴定，至淡黄色时，加1ml淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为终点。同时作空白试验。五、测定结果的计算与分析：1、计算：X=[（V-V0）×N×0.1269]/m式中：X—样品的过氧化值，%。V—样品消耗硫代硫酸钠