HIV实验室检测及规范操作

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1、HIV实验室检测及规范操作xxx艾滋病检测的方法HIV抗体检测HIV抗体初筛检测HIV抗体确认检测(免疫印迹试验)HIV核酸检测▪核酸序列依赖性扩增(NASBA)▪HIV定量逆转录PCR系统(RT-PCR)▪HIVRNA定量检测的分支测定法(bDNA)艾滋病检测方法的意义HIV抗体检测酶联免疫吸附试验▪间接法▪直接法(双抗原夹心法)▪抗体竞争法明胶颗粒凝集试验(PA)快速法HIV/AIDS的筛查,但初筛阳性结果不能做为艾滋病诊断依据,需将该标本送地区筛查中心实验室用两种方法进行复核,仍为阳性或一阴一阳则须送省确认中心。艾滋病检测方法的意义HIV抗体确认检测(免疫印迹试验)H

2、IV/AIDS诊断的唯一依据,省CDC确认实验室负责全省监测哨点以及常规检测中阳性及可疑标本的确认和省内HIV初筛实验室的质量管理.另外,省检疫系统有一个确认实验室,设在省检疫局保健中心.艾滋病检测方法的意义HIV核酸检测►辅助诊断:在特殊情况下,如出现某些非典型的抗体反应,特别是不确定反应时,RNA的测定可提供有用的证据。►感染早期:在HIV感染的窗口期,无法使用抗体检测进行诊断,此时RNA的测定具有特殊的意义,提示是否有感染的可能,但仍需追踪检测HIV抗体,最终根据抗体的检测情况做出诊断。►病程监控:帮助确定疾病发展的阶段。►指导治疗方案及疗效测定►预测疾病进程我国常用

3、的HIV抗体检测试剂►HIV抗体筛查试剂▪酶联免疫:初筛实验室的常用基本试剂。▪明胶颗粒凝集▪其它快速诊断试剂:在尚未建立艾滋病筛查实验室的偏远地区由经过培训的技术人员在规定的场所使用。►HIV抗体确认试剂▪免疫印迹试剂快速检测试剂的优缺点硒标记法和金标记法与ELISA相比►优点所需时间短操作简便,不需特殊设备。试剂贮存于室温。►缺点特异性和敏感性与ELISA有差距。费用较高。HIV抗体检测程序及流程图1、筛查试验标本验收合格后,用筛查试剂进行检测,如呈阴性反应,报告为HIV抗体阴性;对呈阳性反应的标本须进行重复检测。2、重复检测用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的试剂

4、重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病确认实验室进行确认。3、筛查试验的流程图样品筛查检测筛查试剂阳性反应重复检测均阳性反应一阴一阳送确认实验室进行确认均阴性反应阴性报告阴性反应原有试剂加另一种筛查试剂HIV抗体筛查结果的报告和处理►筛查试验呈阴性反应,出具HIV抗体阴性报告(提示应考虑窗口期的可能)。►筛查试验呈阳性反应,可出具“HIV待复查”报告,不能出阳性报告。同时尽快进行以下处理:▪填写HIV阳性标本送检单,并随标本送至当地筛查中心实验室,或直接送确认实验室。▪筛查中心实验室应尽快用两种试剂进行复测,如结果

5、均阳性或一阴一阳,则应将该标本和送检单一并送至省艾滋病确认实验室确认。▪阳性标本必须送省确认中心,筛查实验室不能随意处理。▪做好检测后的咨询结果的解释问题:HIV抗体检测结果阴性是否表明未感染?对不确定结果如何解释?怎么样知道婴儿是否感染了HIV?HIV抗体初筛检测结果解释阴性(1)未感染HIV(2)可能感染了HIV,但处于窗口期,或HIV-1/2抗体和HIV-1O亚型抗体低于检测下限。(3)疾病晚期,免疫功能缺损,抗体可能呈阴性.确认阳性感染了HIV,样品含有HIV-1/2抗体和HIV-1O亚型抗体(未满18个月的婴儿除外).不确定:建议追踪检测.HIV抗体初筛检测

6、结果解释什么是不确定结果?HIV抗体确认试验时,试验条带上出现的蛋白带型不足以判断为HIV抗体阳性,应建议其3个月后复查.►如果复查结果阳转,表明受检者已感染HIV;►如复查时条带全部消失,则为阴性结果;►如复查时条带没有变化或有变化但仍不足以判断为阳性,则应建议其3个月后再复查一次,如还不能判断为阳性结果,则应作为阴性对待.HIV抗体初筛检测结果解释造成检测结果不确定的原因(1)处于窗口期,血清中还没有形成典型的HIV抗体。(2)艾滋病进展到终末期,人体免疫力缺陷,抗体水平下降。(3)与其他非病毒蛋白抗体有交叉反应.自身免疫性疾病、恶性肿瘤、怀孕、输血或器官移殖等,此时

7、,身体产生的一些抗体与P24核心蛋白抗体相似。(4)以前接种过HIV疫苗。HIV抗体初筛检测结果解释如何判断婴儿是否感染了HIV?通过胎盘,感染了HIV的母亲所生的婴儿可能带有来自母体的HIV抗体,此时HIV抗体检测阳性并不意味着已被感染。►建议在婴儿9个月时进行HIV初筛检测如阴性,则判定为未感染HIV。如阳性,则应在婴儿18个月时进行复检阴性:判定为未感染。阳性:则将血样送至省CDC确认中心进行HIV抗体的确认试验。HIV抗体初筛检测酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay

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