微生物的利用

《微生物的利用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、微生物的利用一。培养基种类固体培养基，培养基，配制固体培养基时，需要添加凝固剂如成分：一般都含有水、、氮源和无机盐等最基本的物质，有时还需要加入特殊的营养物质。2．无菌技术①对实验空间、操作台可用或酒精消毒，操作者的手用消毒。②实验用的培养器皿和培养基一般用法灭菌，接种环方法灭菌。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。4.不能加热灭菌的化合物，要用过滤固体。。琼脂、碳源、紫外线酒精高压蒸汽灭菌法酒精灯火焰G6玻璃砂漏斗二、大肠杆菌的培养和分离1．大肠杆菌(1)性质：大肠杆菌是革兰氏性、的肠

2、道杆菌。(2)用途：大肠杆菌是技术中被广泛采用的工具。2．实验原理(1)扩大培养原理：将大肠杆菌接种在培养基中，使其快速分裂繁殖。(2)分离纯化原理：将待检测微生物样品通过或接种在培养基上，样品中的每一个细胞或孢子都可以生长繁殖形成单个菌落。将单个菌落接种到培养基上，经培养后，即可得到一个微生物的纯种。阴性、兼性厌氧划线或涂布LB固体斜面3．实验步骤　↓倒平板　↓接种　↓　↓　↓(1)稀释用1mL无菌吸管吸取1mL大肠杆菌培养液，加入到盛有9mL________的大试管中，充分混匀，稀释________倍

3、；按照同样的方法依次进行稀释制成10－1、10－2、10－3、10－4、10－5、10－6系列稀释度的大肠杆菌稀释液。(2)划线或涂布①划线分离法a．操作：在________旁，左手拿皿底，右手拿接种环，挑取大肠杆菌培养液在平板上划线。b．划线方法：________划线和________划线。c．平行划线时，第一次划线及每次划线之间都要接种环，划线结束后也要灼烧接种环②涂布分离法a．将________浸在盛有酒精的烧杯中。b．取不超过0.1mL的________，滴加到培养基表面。c．将蘸有少量酒精的玻璃

4、刮刀在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10s。d．用玻璃刮刀将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使菌液分布均匀。(3)培养：将接种的平板________于培养箱或温室中37℃培养12～24h。无菌水　10　(2)a.酒精灯火焰　b．平行　连续灼烧②a.涂布器　b．菌液　(3)倒置第2课时　分离以尿素为氮源的微生物1．实验原理(1)以尿素为氮源的微生物含有酶，可以通过降解尿素作为其生长的氮源。(2)尿素固体培养基的唯一氮源为，只有能合成的微生物才能分解尿素(3)脲酶可使尿素分解产生氨，从而可

5、使加入的尿素固体培养基变。其利用尿素的反应式为：脲酶尿素脲酶酚红指示剂红：(NH2)2C＝O＋H2O2NH3＋CO22．实验步骤(1)倒平板在60℃左右时，将两只三角瓶中已灭菌的培养基和培养基，在旁分别倒入两个培养皿中，在水平的超净台上，平放至。(2)制备细菌悬液在无菌条件下，将1g土样加到有99mL的三角瓶中，振荡10min，即成10－2土壤稀释液。依此法制备10－3、10－4和10－5土壤稀释液。取样时，尽量只取。摇匀，放在试管架上。(3)用法分离细菌取10－4和10－5的土壤稀释液各mL，分别加到有

6、LB培养基和尿素培养基的培养皿中，再将保存在中的玻璃刮刀(或涂布器)放在酒精灯火焰上，待刮刀(或涂布器)上火焰熄灭，在旁打开培养皿，将菌液涂布到整个平面上。(4)培养将培养皿，在37℃中培养24～48h。(5)观察3．实验结果(3)在尿素培养基上的菌落周围会出现的环带。LB固体培养基和尿素固体酒精灯摇匀，凝固无菌水悬液涂布分离法0.170%酒精酒精灯火焰倒置恒温箱红色第3课时　果汁中的果胶和果胶酶1．果胶(1)组成：果胶是植物的主要成分，由和组成。的果实中果胶含量最多。(2)作用：起着将植物细胞的作用，去

7、掉果胶，植物组织将变得。(3)性质：果胶不溶于，这是鉴别果胶的一种简易方法。2.果胶酶(1)来源：黑曲霉、等。(2)组成：果胶酶并不是特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，主要包括果胶酶和。细胞壁半乳糖醛酸半乳糖醛酸甲酯山楂粘合在一起松散乙醇苹果青霉果胶甲酯酶第4课时　α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测2．固定化酶：将的酶用或方法上，使之成为而又有。3．将酶改造成固定化酶的原因是由于酶，且不利于，所以要将酶改造成固定化酶。4．酶固定化的方法有法、法、法和法等。本实验用的是法。5．固定化酶作用的机理将

8、固定化酶，当时，在的作用下。水溶性物理或化学某种介质不溶于水酶活性的制剂在水溶液中很不稳定工业化使用吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法吸附法装柱底物经过该柱酶转变为产物二、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验1．实验原理将固定在上，一定浓度的淀粉溶液经过后，可使淀粉水解成。用测试，若流出物呈色，表明有生成。2．实验材料(1)α淀粉酶的固定化在烧杯中将5mgα淀粉酶溶于4mL中　　再加入5g，不时搅拌30min后将上述溶液加