我国EAEC 分离株对HEp2 细胞的粘附特征及集聚性粘附相关基因分析

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1、我国EAEC分离株对HEp-2细胞的粘附特征及集聚性粘附相关基因分析刘学通，陈强，孙晖，赵爱兰，徐建国，熊衍文【摘要】：目的了解我国EAEC分离株的HEp-2细胞粘附特征、毒力基因和集聚性粘附基因情况，探讨建立有效PCR检测方法的可能。方法选择31株分离自腹泻患者粪便的大肠杆菌，采用HEp-2细胞粘附试验，获得菌株的粘附表型；采用PCR方法检测毒力基因（astA、aggR、pic）及集聚性粘附相关基因（aggA、aafA、agg3A、hdaA）。结果不同菌株在HEp-2细胞粘附试验中表现为不同的粘附表型，所含有的毒力基因及粘附相关基因不

2、同。aggR基因阳性的13株菌中，7株表现为集聚性粘附（AA）表型，其中5株具有集聚性粘附相关基因。此外存在aggR基因阴性但对HEp-2细胞表现为集聚性粘附的非典型EAEC以及具有集聚性粘附相关基因hdaA却表现为对HEp-2细胞不粘附的菌株。结论EAEC是一类高度异质性的大肠杆菌，HEp-2细胞粘附试验仍然是检测EAEC的“金标准”；aggR基因仍不失为一种较好的PCR诊断靶基因。在aggR基因的基础上组合其它基因，建立EAEC检测的多重PCR方法具有重要的实际意义。【关键词】肠集聚性大肠杆菌；粘附表型；粘附基因；HEp-2细胞Ad

3、herenceCharacteristicstoHEp-2CellsandAggregativeAdherenceAssociatedGenesofEAECStrainsIsolatedfromChinaLiuXue-tong,ChenQiang,SunHui,ZhaoAi-lan,XuJian-guo,XiongYan-wen【ABSTRACT】ObjectiveTounderstandadherenceandvirulencegenecharacteristicsofEAECisolatestoexplorethepossibili

4、tyofestablishingPCRdetectionmethods.Methods31Escherichiacolistrainsisolatedfromdiarrheapatients’stoolswereselected.TheadherencephenotypesweretestedbyHEp-2cellsadherenceassay.Thevirulencegenes(astA、aggR、pic)andaggregativeadherenceassociatedgenes(aggA、aafA、agg3A、hdaA)weret

5、estedbyPCR.ResultsDifferentstrainsshoweddifferentadherencephenotypetoHEp-2cellsanddifferentvirulencegenesandaggregativeadherenceassociatedgenesprofiles.ThirteenofthetestedstrainsareaggRpositive,sevenamongwhichshowedaggregativeadherence(AA)phenotype.Fiveofthesevenstrainsc

6、andetectaggregativeadherenceassociatedgenes.Besides,wefoundanatypicalEAECstrainwhichwasaggRnegativebutshowedAAphenotypetoHEp-2cells.Inaddition,therewerealsostrainswhichhadtheaggregativeadherenceassociatedgenehdaAbutdidn’tadheretoHEp-2cells.ConclusionsEAECisahighlyheterog

7、eneousgroupofE.coli.;HEp-2cellsadherenceassayisstillthe‘goldstandard’toidentifyEAEC;theaggRgeneisstillagoodtargetgeneforPCRdiagnostic.ToestablishamultiplexPCRwhichcombinesothergenesonthebasisofaggRforEAECdetectionhasimportantpracticalsignificance.【KEYWORDS】EAEC;adherence

8、phenotype;adherenceassociatedgenes;HEp-2cell【基金项目】国家“艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”科技重大专项(2011ZX10004-001)【作者单位】中国疾