专题1基因工程章末复习

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1、专题1基因工程章末复习知识体系构建专题整合一、基因工程的基本工具限制酶DNA连接酶载体作用切割H的基因和载体连接DNA片段,形成重组DZA携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苗酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键作用特点(条件)(1)识别特定的核昔酸序列;(2)在特定位点上切割(1)F・coliDNA连接酶只连接黏性末端;(2)T』NA连接酶连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;(2)有多个限制酶切割位点;(3)具有特殊的标记基因常用类型尿oRI限制酶®7日I限制酶E・coQDNA连接酶T』NA连接酶质粒、噬菌体、动植

2、物病毒【训练1】下列有关基因工程技术的正确叙述是()A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶、载体B.为育成抗除草剂的作物新品种,导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体细胞0.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功表达二、基因工程的操作程序1.目的基因的获取(1)目的基因:指编码蛋白质的结构基因。(2)获取方法:从基因文库获取,原核基因也可直接分离获得;真核基因主要是人工合成,人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。1.基因表达载体的构建(1)目的:使目的基因在受体细胞屮稳定存在,

3、并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。(2)组成:启动子+目的基因+标记基因+终止子。①启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录tBmRXA,最终获得所需要的蛋白质。②终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。③标记基因的作用:鉴定受体细胞屮是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选岀来。常用的标记基因是抗生素抗性基因。3.将目的基因导入受体细胞生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术c(+处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞

4、转化过程将日的基因插入Ti质粒T—DNA上农杆菌〜导入植物细胞一整合到受体细胞的DNA-表达将含有目的基因的表达载体提纯一取卵(受精卵)一显微注射一受精卵发育一获得具有新性状的动物CJ+处理细胞f微生物细胞壁的通透性增加f重组质粒与感受态细胞混合f感受态细胞吸收DNA分子4.日的基因的检测和表达类型步骤检测内容方法结果分子检测第一步目的基因是否进入受体细胞DNA分子杂交(DNA和DNAZ间)是否成功显示出杂交带第二步目的基因是否转录出信使RNA分子杂交技术(DM和RNA之间)第三步目的基因是否翻译出蛋白质抗原一抗体杂交方法个体水平检测包括抗

5、虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天然产品的活性比较,以确定功能是否相同等【训练2】正确表示基因操作“四步曲”的是()A.提取目的基因一目的基因导入受体细胞”目的基因与载体结合”目的基因的检测与鉴定B.目的基因的检测与鉴定一提取目的基因一目的基因与载体结合一目的基因导入受体细胞0.提取目的基因一目的基因与载体结合一目的基因导入受体细胞一目的基因的检测与鉴左D.目的基因与载体结合一提取目的基因一目的基因导入受体细胞一目的基因的检测与鉴定三、蛋白质工程1.蛋白质工程流程■DNA合成蛋白质工程分子设计中心法则1.蛋

6、白质工程与基因工程的区别:蛋白质工程的本质是通过改造基因进而形成自然界不存在的蛋白质,所以被形象地称为笫二代基因工程;基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。【训练3】利用蛋白质工程改造天然蛋白质,进而改变其功能,可获得毒副作用减小,专一性、药效和稳定性都增强的理想的药物。如胰岛素是治疗依赖型糖尿病的特效药物,但是天然胰岛素在人体内寿命只有儿小时,重症病人每天得注射好儿次药物,给病人增加了不便和痛苦。通过蛋白质工程改变胰岛素的空间结构,以延长胰岛素的半衰期,得到长效胰岛素;还可以在不改变胰岛素活性部位结构的前提下,增强其他部位结合强度

7、,使之难以被酶所破坏,从而增强其稳定性。(1)若要批量生产以上提到的长效胰岛素,根据所学知识,需要用到哪些生物工程()A.发酵工程B.基因工程A.蛋白质工程D.胚胎工程(2)用蛋白质工程生产的胰岛素,与天然胰岛素比较,显著的优点是课后作业1.据下图所示,有关工具酶功能的叙述错误的是0.解旋酶可以使b处解开B.DNA连接酶可以连接c处2.利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需耍的产品。下列选项中能说明冃的基因完成了在受体细胞中表达的是A.棉花二借体细胞屮检测到细菌的抗虫基因A.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNAB.山羊乳腺细胞中检测

8、到人生长激素DNA序列C.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白2.某生物学家把从神经细胞屮提取的基因植入到细菌的DNA屮,该基因在细菌体内表达出的蛋白质在氨基酸序列上发生了很大的变化,

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