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《肌肉注射脂联素基因对高脂饮食大鼠氧化应激作用的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、生物医学工程研究2009,28(2):116～118JournalofBiomedicalEngineeringResearch肌肉注射脂联素基因对高脂饮3食大鼠氧化应激作用的影响12△111范颖,苏本利,孟秀香,刘丹丹,刘奔(1.大连医科大学诊断学试验中心,大连116045;2.大连医科大学附属二院内分泌科,大连116027)摘要:构建人脂联素(hAPN)基因的质粒表达载体,研究其体外转移后的表达情况。通过基因重组构建脂联素基因表达系统,电转导法导入大鼠股部肌肉,RT-PCR检测大鼠肌肉注射部位组织中mRNA水平的表达情况,同时监测外周血中SOD、MDA水平。结果表明:RT-PCR显示
2、该基因能在肌肉组织中表达,血清中SOD水平相应升高,注射后两周达到最高水平;MDA水平降低,注射两周后达到最低水平,持续大约两周。脂联素表达系统可以在动物体内表达,增加了自由基的清除,抑制了脂质过氧化物的产生。关键词:脂联素;氧化应激;超氧化物歧化酶(SOD);丙二醛(MDA)中图分类号:R318文献标识码:A文章编号:167226278(2009)0220116203TheEffectofTransferredHumanAdiponectinGeneonOxidationStressofRatsFedwithHigh2fatFood12111FANYing,SUBenli,MENGXi
3、uxiang,LIUDandan,LIUBen(1.LaboratoryCenterofDiagnosisinDalianMedicalUniversity,Dalian116045,China;2.DepartmentofEndocrinology,TheSecondAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity,Dalian116045)Abstract:ToconstructplasmidtransferredhumanAPNgeneandresearchhumanAPNexpressioninrats.HumanAPNexpressions
4、ystemwasconstructedbygenerecombination,transferedplasmidtoratmusclebyelectricalperforation;mRNAexpressionwasdetectedbyRT-PCR.SODandMDAlevelinplasmaweremonitored.ResultsshowedthatmRNAexpressedinratmuscle.SODlevelascendedaftergeneinjection,andreachedthehighestaftertwoweeks;MDAleveldescendedafterinj
5、ection,andwasthelowestaftertwoweeks.HumanAPNgenetransferresinplasmidexpressinratmuscle,andrestrainslipidperoxideproduce.Keywords:Adiponectin;Oxidationstress;Superoxidedismutase(SOD);Malondialdehyde(MDA)[2]肪酸与脂联素水平的升高相关。研究证实,高脂1引言饮食可诱导氧化应激和炎症反应。MDA则是脂质脂联素(APN)是脂肪组织表达最丰富的蛋白质过氧化反应的主要代谢产物,在体内的新陈代谢中产物
6、之一,其血浆浓度为5～30μgPml,约占总血浆起着重要作用,体内SOD降低和MDA增高,可引起[1]蛋白的0.01%。肥胖、胰岛素抵抗及冠心病时血自由基和活性氧等脂质过氧化毒副产品的急剧增浆中APN水平明显低于正常人。在针刺治疗单纯多,从而导致氧化和脂质过氧化损伤而诱发各种疾[3-5]肥胖的研究中,针刺后血浆脂联素水平增高,同时游病。在APN转基因小鼠中,脂联素的过度表达[6]离脂肪酸、胆固醇、胰岛素是降低的,降低的游离脂成为预防糖尿病和动脉粥样硬化的保护性因素。3大连市科技局项目(2002B3NS136)△通信作者Email:mxxsu@sina.com第2期范颖,等:肌肉注射脂联素
7、基因对高脂饮食大鼠氧化应激作用的影响117本实验将构建质粒转染大鼠肌肉组织,以期获得在脂饮食,自由食水。活体动物肌肉组织中人脂联素基因的表达规律,为2.3.3动物标本的留取转染第三天,pLNCX2-进一步研究APN的功能、调控机制及基因治疗提供hAPN组、pLNCX2组分别取3只大鼠,断颈处死,留基础。取两测股部肌肉,保存于-80℃冰箱中。三组实验动物分别于转染后一、二、三、四周,内眦静脉采血,2材料和方法分离血清,保存于-20℃冰
