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1、黄连须根浸提液对土壤微牛物及酶活性的影响［摘要］黄连Coptischinensis是大量使用的中药材,连作障碍严重。试验在供试土壤中加入不同浓度的黄连须根浸提液（REC）,研究了它们对土壤微生物和酶活性的影响。结果表明，在加入REC的土壤中，微生物碳氮量显著降低，细菌和放线菌比对照降低约60%,但真菌增加3倍左右。自生固氮菌、磷细菌、钾细菌、硝化细菌和氨化细菌均显著减少，说明土壤固（供）氮、溶磷、解钾、促生等功能受到抑制。REC对土壤酶活性的影响表现出多样性，提高转化酶活性，降低JR酶活性，对脱氢酶活性无显著影响，妨碍了土壤生物化学反
2、应的有序进行。此外，REC减少微生物标记性磷脂脂肪酸（PLFAs）种类，降低PLFAs总量,提高真菌/细菌PLFAs比值，说明REC在抑制细菌繁殖生长的同时，相对的增加了真菌数量，致使后续作物容易发生真菌病害。REC还显著降低土壤微生物群落的多样性和均匀度指数，说明加入REC恶化了土壤生态环境，使微生物种群减少，密度降低。因此，在黄连生长过程中，根系分泌的化感物质可能改变土壤微生物种群结构，造成连作障碍。［关键词］黄连；土壤；微生物；酶黄连CoptischinensisFranch属毛萇科多年生草本植物，具有清热燥湿，泻火解毒之功效，
3、广泛用于肠道感染，对肺结核、猩红热、急性扁桃腺炎和呼吸道感染等也有一定疗效，是传统的大宗道地中药材［1-2］o在黄连种植过程中，通过茎叶淋溶，根系分泌和植物残体腐解等多种途径向土壤中释放小漿碱(berberine)、黄连碱(coptisine)、巴马汀(palmatine)、药根碱(jatrorrhizine)＞甲基黄连碱(worenine)和表小漿碱(epiberberine)、小漿红碱(berberrubine)等化感物质⑶。其中，以小漿碱的分泌量最高，可达总分泌物的80%以上⑷。种植黄连后的土壤必须间隔2〜3年才能再次种植，连作
4、障碍极其严重。相对于棉花-小麦-棉花轮作，棉花连作使土壤微生物种群数减少36.5%,种群结构改变，多样性指数显著降低⑸；在牧草地和种植芒果的土壤中，微生物碳氮量和标记性磷脂脂肪酸总量显著高于菜地，各磷脂脂肪酸的含量也因种植作物不同而异［6］；集约化农业生产降低土壤有机质，微生物种群减少，合理轮作能提供丰富多样的有机质，满足不同微生物的营养需要，微牛物活性与种群数显著高于单一种植⑺；在黄花蒿种植过程中，所释放的青蒿素对土壤某些细菌产生抑制作用，土壤微生物的多样性降低，种群结构改变⑻；在种植丹参的根际土壤中，氨化细菌、固氮细菌、有机/无机
5、磷细菌等显著减少，但亚硝化细菌、硝化细菌、反硝化细菌等微生物种群显著增加。因此可见，种植植物对土壤微生物产生深刻影响。目前，关于黄连根系分泌物对土壤微牛物影响的研究甚少，导致对其连作障碍的成因认识不足。此外，微生物是土壤酶的重要来源，其活性及种群对土壤酶产生潜在影响，而土壤酶催化土壤生物化学反应，如氧化还原、有机质降解、硝化与反硝化、腐殖质合成等,故微牛物活性、种群与土壤功能密切相关⑻。作者利用不同浓度的黄连须根浸提液，通过培养试验研究了它们对土壤微生物及酶活性的影响，为揭示黄连连作障碍发生机制积累了资料。1材料与方法1.1供试样品供
6、试土壤为西南大学农场的中性紫色土，质地中壤、pH6.68、有机质20.03g?kg-l＞全氮3.32g?kg-l>有效磷16.43mg?kg-l>速效钾119.8mg?kg-lo采集0~20cm耕作层，拣去杂物，风干,Hlmm筛，取250g土壤于500mL塑料杯中备用。供试黄连须木艮(fibrousrootextractsofCoptischinensis,REC)购自重庆市石柱县黄连有限公司，小漿碱50.20mg?g-l,（80±1）°C烘干，粉碎过2mm筛。准确称取20.00g,加1L蒸憾水37°C浸泡72h后抽滤，滤液用去离子水
7、定容至1L备用。1.2试验设计考虑到1g?L-l黄连根茎浸提液可抑制幼苗生长⑷，试验分别在供试土壤中加入0,6.25,9.375,12.5,25mL黄连须根浸提液,即土壤中的黄连须根浸提液质量分数为0,500,750,1000,2000mg?kg-l,相当于小葉碱质量分数为0,25,37.5,50,100mg?kg-l,混合均匀。然后,加水至土壤最大田间持水量（24.29%）的（70±2）%,（25±1）°C培养10do1.3测定项目利用稀释平板分离计数法测定土壤中的细菌（牛肉膏蛋口月东培养基）、真菌（马丁氏培养基）、放线菌（高氏一号
8、培养基），自生固氮菌（Ashby无氮培养基）、磷细菌（磷酸钙+植酸培养基）、钾细菌（铝土矿培养基）、氨化细菌（蛋白月东琼脂培养基）和硝化细菌数量（改良Stephenson培养基B）[9-11],并通过形态和生理生化反应等
