茶多酚总量的测定

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1、茶多酚总量的测定─酒石酸铁比色法制作人：汪小钢实验目的茶多酚是茶叶中多元酚类物质的总称，具有苦涩味，对茶叶的品质有非常重要的影响。此外，药理学试验表明，茶多酚对心血管疾病、癌症等具有一定的防治效果。因此，检测茶叶中多酚类物质总量对评价茶叶的品质具有非常重要的作用。深加工和综合利用需要对原料茶以及产品中茶多酚总量进行检测；品种选育需要检测鲜叶中多酚总量；实验原理在一定pH条件下，酒石酸铁与茶多酚类物质形成蓝紫色或红紫色的络合物，在波长540nm处出现最大吸收，在适当的浓度范围内，茶多酚的量与呈色的深浅成正

2、比。试剂酒石酸铁溶液：称取硫酸亚铁（FeSO4.7H2O）1g酒石酸钾钠（KNaC4H4O6.4H2O）5g加水溶解并稀释至1L。此溶液可稳定10天。pH7.5的索伦逊缓冲液：pH7.5的索伦逊缓冲液先配制以下两种溶液（1）1/15M的Na2HPO4溶液：称取Na2HPO4.2H2O11.876克，加水溶解并稀释至1L。（2）1/15M的KH2PO4溶液：称取经110℃烘干2h的KH2PO49.078克，加水溶解并稀释至1L。取溶液（1）85ml和溶液（2）15ml混匀，主要仪器分光光度计，恒温水浴，分

3、析天平。测定方法茶汤制备：准确称取磨碎试样3克，加450毫升沸水，在沸水浴中浸提45分钟，每隔10分钟摇瓶一次，过滤。洗涤残渣，滤液合并于500毫升容量瓶中，冷却后加水定容至刻度，摇匀。测定：准确吸取茶汤1毫升，注入25毫升容量瓶中，加水4毫升、酒石酸铁溶液5毫升，用缓冲溶液定容至刻度，混匀。用10mm比色皿，以试剂空白作参比，于波长540nm处测吸光度，根据经验系数求得茶汤中茶多酚含量。结果计算测试效果pH对测定结果有影响，在pH6.24时连位羟基和铁起反应，而邻位几乎不起反应；在pH6.8和8.1时

4、，连位羟基变化不大，颜色的加深是由邻位羟基引起的。低于pH7.0，酒石酸铁和索伦逊缓冲液会形成乳状混浊液干扰比色结果。酒石酸铁主要与茶多酚中的邻位羟基和连位羟基功能团呈色，而对间位羟基和单羟基不呈色，而且与连位羟基呈色能力比与邻位羟基呈色强3倍。由于不同种类茶叶的多酚组成不完全相同，对酒石酸铁的显色强度也有差异。