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1、卩丫唳酯在免疫分析及DNA测定中的应用摘要:nr®酯作为一种高效的化学发光试剂，在临床免疫分析，DNA分析，牛物酶活性测定等方面有着广泛的应用。本文重点介绍卩丫噪酯在免疫分析及DNA测定屮的应用。其屮在免疫分析方面可以用于标记，跟踪蛋口等，在DNA方面，可用于基因测定或微生物测定。关键词:ny®酯，免疫分析，DNA测定，应用前言叶唏酯衍生物是一类量子产率较高的化学发光试剂，由于它发光过程所需的引发剂少、背景和噪音低、灵敏度高，常用于临床免疫测定，作核酸分子探针，测定生物酶的活性或其它应用[84-89],可以标记抗体广泛应用于免疫测定；这类化合物只要在过氧化氢存在下就迅速产牛化
2、学发光，具有很高的化学发光效率。又由于卩丫碇酯具有与乙酰苯酯相似的结构，具有单一酯键，检测的灵皱度高，因此可用于酶活性的检测。目前，亚科化学主要推岀了以下卩丫噪酯衍生物：卩丫噪酯（NSP-DMAE-NHS）,黄色粉末，CAS号：194357-64-7,分子式:C30II26N209S,分子量:590.6,含量:295.0%,储存条件:2-8°C冷藏,密封、干燥、避光保存。卩丫呢盐（NSP-SA-NHS）,黄色粉末,CAS号：199293-83-9,分子式：C32H31N3010S2分子量：681.733,含量：$97%,贮存条件：常温。卩丫噪盐（DMAE-NHS），黄色粉末,
3、CAS号：115853-74-2,分子式:C29I126N2010S,分子量：594.589。卩丫噪酯的应用卩丫噪酯在免疫分析中的应用lanweekL等人合成了[4-2-琥珀亚胺氧代碳酰乙基）-酚]10-甲基卩丫噪9-甲酸苯酯，用它标记在抗体上测定人胎蛋白，其检测灵敏度为1.3kiloIU/L,与放射免疫法分析结果一致。RichardsonAP报道的卩丫唏酯10-甲基卩丫唏9-甲酸对氨基苯酯，标记在黄体酮上作半抗原，测定沖怀孕灰女血浆中的黄体酮含量，其检测灵敏度达0.64mol/L0在国内罗世能等人报道的10-甲基卩丫噪9-甲酸对氨乙基苯酯，作者认为在保留被示踪物质牛物活性方
4、面具有更大的适用范围。庄惠生等人制备了叶呢9-竣酸，经酰氯化后，与3-（4-轻基苯基）-丙酸-N-耗基琥珀酰亚胺酯反应得4-（-琥珀酰亚胺基氧拨基乙基）-苯基9-卩丫噪竣酸酯，最后与氟磺酸甲酯反应即得化学发光免疫分析标记试剂4-（2-琥珀酰亚胺基氧按基）-苯基-10-甲基叮噪9-竣酸酯氟磺酸盐（俗称叮噪酯），研究了DNA对这类卩丫噪衍生物的化学发光增强特性，发现它们可作为DXA化学发光探针，并建立了一种测定DNA含量的化学发光分析新体系。促甲状腺激素(thyroid-stimulatinghormone,TSH)是一种由垂体前叶分泌的糖蛋口激素，血清TSII水平是临床上作为评
5、估甲状腺功能的一项重要指标，采用灵敏度高的TSH免疫分析法对区别甲亢、甲状腺癌与甲状腺功能正常具有重要意义。尹东光等成功地利用卩丫噪酯DMAE-NHSE2,6-二甲基-4-(N-琥珀酰亚胺氧拨基)苯基10-甲基-卩丫唏9-甲酸酯甲氧基硫酸盐］标记TSII单克隆抗体，建立了灵敏度较高的促甲状腺激素化学发光分析方法；除此之外叮噪酯已被用于肿瘤标志物甲胎蛋白的检测、免疫球蛋白和相关化合物等的分析。刘农乐等先后用卩丫噪酯作为标记物标记抗体用于测定结核病人的抗体水平、测定神经生长因子、表皮生长因子、组织型纤溶酶原激活剂，在这一系列测定屮发现此法灵敏度都很高，而叮噪酯标记物的稳定性因溶液
6、不同会发生变化，酸性溶液比碱性环境下稳定。对于肿瘤检测而言，由于肿瘤标记物含量非常低，很难进行精确地定量,而化学发光免疫分析法无疑成为了最佳检测方法，叮唳酯-H202发光体系已成功被应用于许多肿瘤标志物的检测中。叮噪酯在DNA测定中的应用除了在免疫测定中的应用之外，叮唳酯可以标记寡核昔酸片段探针应用于基因测定或微生物测定。卩丫噪酯化合物很适合于标记DNA链以制造化学发光DNA探针。现代医学研究成果表明，许多疾病如癌症和遗传疾病的发生都与DXA的突变有关，且许多传染性疾病是由环境中的病毒、病菌或寄生虫引起的，对病毒特定序列DNA的分析有利于疫情的控制。对DNA序列以及其链中碱基
7、突变的检测在基因筛选、遗传疾病早期诊断和治疗、病原基因测定方面具有十分深远的意义。在核酸杂交分析中，制备特异性强、灵敏度高的标记探针是核酸杂交分析成功的关键，叮唳酯衍生物可以直接标记在核酸探针上，不需催化剂且发光量子产率不受影响；另外，在一定条件下，未杂交的单链DNA上标记的叮噪酯被水解破坏，只有杂交形成的双链保护的叶噪酯才能产生化学发光，不需分离即可监测整个杂交过程。根据这一原理，GotoS等人建立了杂交保护检测醛脱氢酶和阿尔茨海默病相关基因ApoE的基因微阵列新方法。该方法设计了两根生物素标记的DN
