2019食品微生物检验期末复习资料

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1、食品微生物检验期末复习资料　　食品微生物检验复习资料回答题　　一菌落总数的检测方法　　答：菌落总数的检测方法主要是平板菌落计数法。　　1检样，取25g(ml)样品置于225ml无菌生理盐水中制成1：10的样品匀液，固体或半固体样品放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2min。　　210倍系列稀释，用1ml无菌吸管吸取1：10样品均液1ml，沿管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管，振摇试管使其混匀，制成1：100的样品均液。3选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，每个稀释度分别吸取1mL样品匀液于

2、2个无菌平皿内。同时分别取1mL稀释液加入2个无菌平皿作空白对照每个培养皿加入15-20ml平板计数琼脂培养基，混匀　　4培养，琼脂凝固后，将平板翻转，36℃±1℃，培养48h±2h　　5菌落计数，可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。选取菌落数在30cfu～300cfu之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。6结果报告，称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/ml为单位报告二大肠菌群的检测方法　　答大肠菌群的检测老方法是30-3步法，新方法是大肠菌群MPN计数法老方法30-

3、3步法　　1检样，取25g(ml)样品置于225ml无菌生理盐水中制成1：10的样品匀液，固体或半固体样品放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2min。　　210倍系列稀释，用1ml无菌吸管吸取1：10样品均液1ml，沿管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管，振摇试管使其混匀，制成1：100的样品均液。3初发酵，选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管乳糖胆盐发酵培养基，双料管，取10ml/管1：10的稀释液，单料管，取1ml/管1：10的稀释液和取1ml/管1：100的稀释液，置

4、于36℃±1℃培养箱，培养24h±2h，观察倒管内是否产气，都未产气者，则报告大肠菌群阴性，如产气，则进行下一步实验　　4分离培养，将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上，置于36℃±1℃培养箱，培养18h-24h，观察菌落形态，并作革兰氏染色和证实试验，5在上述平板上，调取可疑菌落1-2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置36℃±1℃培养箱，培24±2h，观察产气情况，凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性　　6根据证实为大肠菌群阳性管数，查MPN检索表，报告每100ml(g)大肠

5、菌群的MPN值。新方法大肠菌群MPN计数法　　1检样，取25g(ml)样品置于225ml无菌生理盐水中制成1：10的样品匀液，固体或半固体样品放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2min。　　210倍系列稀释，用1ml无菌吸管吸取1：10样品均液1ml，沿管壁缓慢注入盛有9ml稀释液的无菌试管，振摇试管使其混匀，制成1：100的样品均液。　　3初发酵，选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤，每管接种1ml,置36℃±1℃培养箱，培养24h±2h，观察倒管内

6、是否有气泡产生，24h±2h产气者进行复发酵试验，未产气则继续培养致48h±2h，未产气者，为大肠菌群阴性4复发酵试验，用接种环从所有48h±2h内发酵产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中，置36℃±1℃温箱内，培养48h±2h，观察产气情况。产气者，计为大肠菌群阳性管　　5报告　　按复发酵试验确证的大肠菌群LST阳性管数，查MPN表，报告每g(ml)样品中大肠菌群的MPN值。　　三霉菌、酵母菌的检测方法　　答：霉菌、酵母菌的检测方法目前主要是平板计数法　　1检样，取25g(ml

7、)样品置于225ml无菌蒸馏水中制成1：10的样品匀液，固体或半固体样品放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1-2min。　　210倍系列稀释，用1ml无菌吸管吸取1：10样品均液1ml，注入含有9ml无菌水的无菌试管，另换一支1ml无菌吸管反复吹吸使其混匀，制成1：100的样品均液。　　3选择2-3个适宜稀释度的样品匀液，各取1ml分别加入无菌培养皿中，每个培养皿加入15-20ml马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基，混匀4培养，琼脂凝固后，将平板翻转，28℃±1℃，培养5d,　　5菌落计数，可

8、用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。选取菌落数10～150CFU之间的平板进行计数　　6结果报告，称重取样以CFU/g为单位报告，体积取样以CFU/ml为单位报告　　填空题　　1菌落总数的概念，是指在被检样品的单位重量、容积、或表面积内，所含能于某种固体培养基上，在一定条件下培养后所生成的细菌集落