毛细管区带电泳分析

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1、毛细管区带电泳分析微米级和亚微米级粒子粒子在电泳中迁移的机制CZE在各种类型的粒子中应用粒子在CZE中的特殊电泳行为胶体粒子的电学性质胶体粒子表面带有电荷电泳Gouy-Chapman-Stern模型电离离子吸附离子溶解Smoluchowski认为在电场中粒子的运动是带电粒子表面的静电力F1及阻力F2的综合结果。在一定条件下，即F1＋F2＝0和当κα>>1时粒子表面可作为平面处理，u＝当κα<<1时u＝Henry等的研究证明，对电泳速度有影响的作用力除了Smoluchowski提出静电力F1及阻力F2外

2、，还有电泳滞后效应（retardationeffect）和电泳弛豫效应（relaxationeffect）的贡献。电泳滞后效应在外加电场的作用下，中心离子同其溶剂化分子一起向某一方向移动，而带有相反电荷的离子氛则同溶剂化分子一起向相反方向移动，从而增加了粘滞力，阻滞了离子在溶液中的运动，这种影响称为电泳滞后效应电泳弛豫效应＋－－－－－－不对称的离子氛对中心离子在电场中的运动产生了一种阻力，称为弛豫力在κα>>100（薄双电层），κα<<0.1（厚双电层）及粒子的ζ<25mV时弛豫效应的影响可以忽略。在

3、忽略弛豫效应的前提下，Henry对滞后效应予以校正后，得出粒子电泳速度的公式：u＝Henry公式中假设粒子使一种规则的球形，忽略了对粒子的真实形状的考虑。实际上，当粒子表面不规则尺寸远小于粒子粒径时，Stock力是主要阻力。而粒子很不规则时(不规则尺寸大于或等于双电层厚度)，粒子的电泳滞后效应变得显著了。聚苯乙烯胶乳微球无机胶粒和有机胶粒脂蛋白颗粒病毒脂质体和膜微囊生物细胞聚苯乙烯胶乳微球（PSL）PSL微球的大小和几何形状能被很好的确定，所以它已广泛地作为模型来研究胶体。表面电学性质：在PSL微球的

4、制备过程中，由于乳化剂的存在，使得聚合物乳液的乳胶粒表面吸附一层乳化剂分子，从而使胶乳微球表面带有某种电荷。CZE分离不同组成成分的PSL微球混合物CZE测定PSL微球的电泳淌度CZE用于研究两种不同组成成分的胶乳粒子之间的相互作用。CZE在PSL微球中的应用微球的表观电泳淌度与粒子的表面电荷（或荷质比）之间无线性关系。VanOman提出PSL微球的分离是因为各粒子与毛细管内壁相互作用造成不同程度的粒子滞后而产生的Ballou认为PSL微球的分离与粒子自身的性质有关检测器——UVVanifatova等

5、发现粒径在50nm～200nm内，UV的最大吸收波长在短波长范围内，粒径在400nm～600nm内，UV的最大吸收波长在长波长范围内。∴在相同粒径范围内，检测限与UV的检测波长有关。在分离不同粒径的粒子时，应选用长、短两种波长来检测。脂质体的应用由于它的磷脂双分子膜与细胞膜结构类似，可作为细胞模型可作为靶向药物的载体脂质体毛细管电泳自由脂质体毛细管电泳脂质体修饰的毛细管电泳在脂质体电动色谱中，其迁移指征（migrationindex）能够很好的与药物的logp相关，并且各指征有很好的重现性。其数据可应

6、用于定量构效关系（QSAR），定量保留-效应关系（QRAR），吉布斯自由能，溶剂化能力的线形关系模型（LSER）等数学模型的研究。脂质体有包封脂溶性药物或水溶性药物的特性，药物被脂质体包封后有主要特点：靶向性和淋巴定向性缓释性细胞亲和性与组织相容性降低药物毒性保护药物提高稳定性脂质体的评价指标脂质体的形态、粒径及其分布包封率的测定渗透率的测定药物体内分布的测定CZE在脂质体中的应用CZE测定粒径分布均匀程度CZE可用于分离了不均一组成成分的脂质体CZE可作为一种评价脂质双层刚性程度的分析方法CZE可测

7、定单个脂质体的电泳淌度Tsukagoshi和Roberts首次报道了利用CZE分析脂质体PCPC/CHPC/PE熔硅毛细管ID50μm，电泳缓冲液10mM磷酸盐缓冲液（pH9.0）实验表明，SUV的电泳峰较窄，MLV的电泳峰却相对较宽。且MLV的绝对电泳淌度平均值明显高于SUV的平均值。造成这种现象的原因可能是因为粒子的迁移依赖其粒子自身的大小。同时脂质体与毛细管内壁相互作用并不强Roberts等提出相反观点—认为脂质体与毛细管内壁之间有很强的作用ONLYONE当电泳温度达到脂质体组成成分的相变温度（

8、凝胶态转变为溶胶态或刚性转变为柔性）时，脂质体的电泳淌度会发生“跃迁”在“柔性”脂质体中渗入CH或带有丙烯酰基链的物质，脂质体的电泳淌度也会增加毛细管ID50μm，电泳缓冲液10mMHEPES-250mM蔗糖，pH7.5。中性聚合物涂层毛细管壁以抑制EOF。单个脂质体用荧光物质标记，在线检测，采用激光诱导荧光检测器（LIF）。根据单个脂质体的荧光强度可同时计算出该脂质体的电泳淌度和表观大小（包封体积）。微粒体－膜微囊细胞在水溶液中通过机械力让其破裂产生胞