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《重组甘精胰岛素相关杂质的结构确认及质量分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、重组甘精胰岛素相关杂质的结构确认及质量分析1111＊2李晶,梁成罡,张惠,杨化新,王大梅(1.中国药品生物制品检定所,北京100050;2.北京甘礼药业有限公司,北京101102)摘要:目的结合国际通用标准,通过对甘精胰岛素主要相关杂质的定性研究和来源分析,促进国内同类产品的质量提高。方法首先将提纯冻干的杂质回加到对照品中进行液相色谱定位,继而分析HPLC肽图,结合激光辅助基质解吸附飞行时间质谱测定的分子量及肽质量指纹图谱初步定性,再以小分子电泳、N-端测序及二级质谱进一步验证。结果主要相关杂质均为甘精胰岛素的类似物,是在酶切过程中产生的副产物,即
2、为可预期的工艺相关杂质。结论该方法可对甘精胰岛素的主要相关杂质快速、经济、准确的定性,本实验对预期杂质的来源分析可为同类产品的杂质研究提供新颖的参考思路。关键词:甘精胰岛素;激光辅助基质解吸附飞行时间质谱;肽质量指纹图谱;小分子电泳中图分类号:R917文献标识码:A文章编号:1001-2494(2008)20-1588-05StructureIdentificationandQualityAnalysisofRelativeImpuritiesofRecombinantInsulinGlargine1111＊2LIJing,LIANGCheng-g
3、ang,ZHANGHui,YANGHua-xin,WANGDa-mei(1.NationalInstitutefortheControlofPharmaceuticalandBiologicalProducts,Beijing100050,China;2.GanLeePharmaceuticalCo.,Ltd.,Beijing101102,China)ABSTRACT:OBJECTIVEToimprovethequalityofinsulinglarginebyidentifyingprimaryimpuritiesandtheirsource.M
4、ETHODSFirstly,thepurifiedimpuritieswerespikedinthestandardofinsulinglargineandweredeterminedbyHPLC.Secondly,majorimpuritieswereindentifiedbyHPLCpeptidemap.MolecularweightandpeptidemassfingerprintingwithobtainedbyMALDI-TOF,andvalidatedbytricineSDS-PAGE,N-terminalsequencingandma
5、ss/massspectrometry.RESULTSMajorimpuritieswereanalogsofinsulinglargineandrelativetotheenzymaticstepsinthemanufactureprocess.CONCLUSIONThismethodisrapid,economicalandaccurateforidentifyingprimaryimpuritiesofinsulinglargine.Thenovelideainanalyzingthesourceofimpuritiescanbearefer
6、enceforthestudyofimpuritiesinotherinsulinanalogs.KEYWORDS:insulinglargine;matrix-associatedlaserdesorptionionizationtime-of-flightmass(MAILDI-TOF);peptidemappingfingerprint(PMF);tricineSDS-PAGE甘精胰岛素(Insulinglargine)是一种由重组6.7,使得皮下注射后的甘精胰岛素,在生理pHDNA技术在大肠杆菌中成功表达的具有长效作用条件下形成微溶的缓释沉
7、淀物,可在24h内不间[3]的人胰岛素类似物。由AventisPharma公司生产的断地吸收入血。因此成为一种可发挥长效作用甘精胰岛素已分别于2000年4月和6月经美国食的新型人胰岛素类似物,近年来得到了广泛的临床[1]品药品监督管理局与欧洲药品评价署批准上市。应用(图1)。而甘李药业有限公司(北京)自行研制的甘精胰随着检测技术的发展,对人胰岛素中的杂质研岛素也于2005年5月在中国获准上市,目前国内究日趋成熟。可将这些杂质分为3类:酰胺残基的[2]另有一家研究甘精胰岛素的公司也取得了临床批脱氨杂质、A链8～9位残基之间的肽键断裂杂[4]件。质、A
8、snA-21与PheB-1之间通过转酰胺作用形成的共[5]甘精胰岛素的相对分子质量为6063,分子式价二聚体杂质。但是,对
