动植物细胞培养产酶

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1、第三章动植物细胞培养产酶细胞培养(cellculture)技术即是选用各种细胞的最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术，是广泛应用于生物技术研究领域的重要技术。细胞系培养物开始第一次传代培养后的细胞有限细胞系（FiniteCellLine）连续细胞系或无限细胞系（InfiniteCellLine）肿瘤细胞系或株我国已建细胞系主要为这类细胞。肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞。具有不死性和异体接种致瘤性。细胞株用单细胞分离培养增殖形成的具特定生长特性的细胞群再由原细胞株进一步分离培养出与原株性状不同的细胞群，

2、亦可称之为亚株。原代培养直接从体内取出的细胞进行的第一次培养物。优点：组织细胞刚脱离机体，生物性状尚未发生较大变化，在一定程度上能够反映体内的状态。大鼠肝细胞原代培养1.细胞种类：大鼠原代肝细胞；2.培养的天数：刚分离，未经培养；3.细胞状态与特征简述：刚分离时球形透亮，贴壁，后呈不规则。传代培养将细胞从一个培养瓶转移到另一个培养瓶即称为传代培养原代培养的细胞在生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致营养枯竭，会影响细胞的生长，因此需要进行扩大培养，即传代或称为传代培养。HepG2细胞细胞种类：人肝肿瘤细

3、胞；培养的天数：传代培养2天；细胞状态与特征简述：呈多角型、不规则贴壁生长，成团聚集。细胞分离方法离心机械或酶法杂交瘤愈伤组织酶消化原生质体动物细胞植物细胞细胞培养方法悬浮固体贴壁液体浅层微载体液体悬浮动物细胞植物细胞细胞培养目的疫苗色素激素药物多肽药物香精抗体酶酶皮肤等动物细胞植物细胞第一节动植物细胞中酶生物合成的调节动植物细胞的基因表达和调节控制比微生物复杂得多。转录水平翻译水平激素水平神经水平…1、细胞分化改变酶的生物合成基因表达的时间性和空间性2、基因扩增加速酶的生物合成通过增加基因的数量来调节基因表达的

4、一种方式。3、增强子促进酶的生物合成高效增强某些酶基因的表达，具有细胞或组织特异性。4、抗原诱导抗体酶的生物合成抗体酶抗体的高度特异性酶的高效催化能力抗体酶或催化抗体（Catalyticantibody)是一种新型人工酶制剂，是一种具有催化功能的抗体分子，在其可变区赋予了酶的属性。它是利用现代生物学与化学的理论与技术交叉研究的成果，是抗体的高度选择性和酶的高效催化能力巧妙结合的产物。制备的方法主要有：修饰法和诱导法。诱导法：半抗原诱导法和酶蛋白诱导法。与微生物细胞相比，动物细胞和植物细胞具有各自不同的特性，需采用各自

5、不同的培养工艺。动物细胞模式图植物细胞结构动物，植物和微生物细胞特性比较细胞种类植物细胞微生物细胞动物细胞细胞大小/um200～3001～1010～100倍增时间/h﹥120.3-6﹥15营养要求简单简单复杂光照要求大多数要求不要求不要求对剪切力敏感大多数不敏感非常敏感主要产物色素、药物、香精、酶等醇、有机酸、氨基酸、抗生素、核苷酸、酶等疫苗、激素、单克隆抗体、酶等三者之间的差异主要有：植物细胞>动物细胞>微生物细胞。动物细胞、植物细胞的生产周期比微生物长。植物细胞和微生物细胞的营养要求较简单。植物细胞的生长以及次级

6、代谢物的生产要求一定的光照。植物细胞和动物细胞对剪切力敏感。植物、微生物和动物细胞的主要目的产物各不相同。第二节植物细胞培养产酶1902年，德国植物学家G.Haberlandt就预言植物细胞培养的可能性。1937年前后，法国和美国科学家分别成功的进行了胡萝卜和烟草的组织培养。1966年Klein指出，能利用植物细胞培养物代替收集或栽培植株来生产生化制品。近40年来，植物细胞培养研究成功的例子已有不少，如用紫草悬浮培养物生产紫草宁；烟草细胞的大量培养等等。与微生物相比，植物细胞具有的特性细胞大，细胞壁以纤维素为主要成分

7、，耐拉不耐扭，抗剪切能力低；与动物细胞培养类同，生长速率慢，为防止培养过程中染菌，需加抗生素；细胞培养需氧，而培养液粘度大，且不能强力通风搅拌；产物在细胞内且产量低；细胞常生长成各种大小的团块，增加了悬浮培养的难度等。20世纪90年代以来，伴随着紫杉醇的研究成功并应用于临床，植物细胞培养及其次级代谢产物的研究进入了新的发展时期，尤其是诱导子、前体饲喂、两相法培养、质体转化、毛状亘和冠瘿瘤组织培养等新技术和新方法的发现和发展，更显示了植物细胞培养工程制药的广阔发展前景。另外，将固定化技术应用于植物细胞培养中的研究对有效

8、的改善植物细胞培养中出现的不足有一定成效。可以认为，固定化技术是有可能在植物细胞培养中得以应用。植物细胞培养是指在离体条件下将愈伤组织或其他易分散的组织置于液体培养基中，将组织振荡分散成游离的悬浮细胞，通过继代培养使细胞增殖来获得大量细胞群体的方法。一、植物细胞培养产酶1.植物细胞培养的特点（1）提高产率（2）缩短周期（3）易于管理，减轻劳动强