动物实验的基本技术操作方法

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1、第四章动物实验的基本技术和操作方法南开大学医学院张京玲主要内容动物实验基本技术和操作方法 　　一、动物实验的常用方法 　　二、实验动物的抓取固定方法 　　三、实验动物编号标记方法 　　四、实验动物的随机分组方法 　　五、实验动物被毛的去除方法主要内容六、实验动物给药途径和方法七、实验动物用药量的确定及计算方法八、实验动物的麻醉九、实验动物采血方法十、急性动物实验中常用的手术方法十一、实验动物的急救措施十二、实验动物的处死方法一、动物实验的常用方法动物实验方法是多种多样的，在医学的各个领域内都有其

2、不同的应用，其中一些基本方法都是共同性的，如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等，不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法，因此，动物实验基本方法，已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。一、动物实验的常用方法无损伤整体实验整体实验有损伤整体实验动物实验亚细胞实验(按机体水离体实验细胞实验平不同分)组织实验器官实验急性实验（2天以内）动物实验亚急性实验（1～4周）(按实验时慢性实验（2～6个月或更长时间间长短分)甚至整个生命期）一、动物实验的常用方法生理学的动物实验

3、方法病理生理学的动物实验方法动物实验药理学的动物实验方法(按不同病理解剖、组织学动物实验方法学科分)微生物、免疫学的动物实验方法下面举一些动物实验的常用方法：一、动物实验的常用方法1．复制动物模型法此法是动物实验最基本的方法，是采用人工的方法使动物在一定致病因素（机械、化学、生物和物理）作用下，造成动物的组织，器官或全身的一定损伤，复制成与人类疾病相似的动物疾病模型，来研究各种疾病的发生、发展规律及防治方法。一、动物实验的常用方法2．切开、分离法此法是以活体动物为对象的整体实验常用方法。习惯上把在麻醉情况下，

4、制备一些实验条件（如活体解剖、分离暴露器官、组织或进行一些手术制备等措施）进行研究者称“急性动物实验”。其优点是比较简便，操作后可以立即进行观察，实验条件相对地较易控制，对要研究的器官，有可能直接观察。一、动物实验的常用方法3．切除和注入提取液法常用于研究内分泌器官的生理和病理病变，如研究切除某一腺体后看辐射对机体的影响，切除某一腺体后看出现什么症状而推论这种腺体的功能；如蝌蚪无甲状腺素，如注入甲状腺素，蝌蚪很快变成了蛙。一、动物实验的常用方法4．离体组织器官法它是利用动物的离体组织、器官或生物性致病因子（微

5、生物、寄生虫等），置于一定的存活条件下（如温度、营养成分、氧气、水、pH等）进行观察的一种实验方法。一、动物实验的常用方法动物组织、细胞的培养也常用此种方法。离体实验的优点是方法比较简单，一般不需要很复杂的仪器设备。实验条件比较容易控制，牵涉的人力较少，因此常被列为分析性研究的一种手段。不足之处是模拟的存活条件毕竟与整体的实际情况有较大的出入，其结果也往往与体内的变化有一定距离，因此可以作为整体研究的补充和参考。一、动物实验的常用方法5．瘘管法用无菌手术方法给动物造成不同的人造瘘管如胃肠道瘘管、膀胱瘘管、唾液

6、腺瘘管、食道瘘管、胆囊瘘管等。这些瘘管可以收集内脏液体，是生理学消化研究的主要方法。此种方法是慢性动物实验所常用的方法。慢性动物实验一般是先在无菌操作下制备好实验模型（瘘管法是其中一种），待动物恢复健康后进行研究。一、动物实验的常用方法这类研究方法的优点在于被研究的对象，其机体内外环境已处于较自然的相对平衡状态，条件比较稳定，所得的结果接近生理情况。但需要事先制备，术后护理，等动物恢复健康后才能从事实验，花费时间较长，工作量较大，因而在选用上受到一定限制。除了用手术制备的动物实验外，运用药物或食铒等措施制备病

7、理模型，如诱发各种实验性动物疾病模型的方法也可归为慢性动物实验。一、动物实验的常用方法6．移植法一般是将动物的器官、组织或细胞进行相互移植的一种方法。如骨髓移植时，将小鼠A（供体）的骨髓注入到小鼠B的血液中（受体），很快可见脾结节化（脾造血）。脾结节的数量反应了造血干细胞的多少，由此可以观察干细胞的变化。动物各种组织、器官的移植也是实验研究中常用的方法。一、动物实验的常用方法7．生物电、活性观察法对动物体各种生物电用电生理记录仪进行观察记录，如心电、肌电、脑电等；对动物组织中各种活动物质用生物化学法测定，如各

8、种酶，激素等。一、动物实验的常用方法8．病理解剖学、组织学观察法采用肉眼观察、光镜和电镜检查，来观察、分析动物各种疾病时病理组织学改变。可从组织学的角度来探讨疾病防治机理，例如通过阑尾组织切片和肉眼观察，分析口服中药、针刺或局部敷药对有炎症阑尾的影响，阐明不同证型时阑尾变化的病理学特点以及某些病人用中西医结合非手术治疗后复发的原因。一、动物实验的常用方法近年来由于电子显微技术的进展，不仅可以观察到病