苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶水解作用研究【毕业论文】

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1、毕业论文（设计）苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶水解作用研究专业：食品科学与工程13目录1前言41.1壳聚糖41.2壳寡糖51.3壳聚糖酶52材料和仪器62.1实验材料62.2主要仪器73实验方法73.1还原糖的测定73.2粘度的测定93.3不同结构壳聚糖对酶促反应的影响94结果与分析94.1酶的用量对酶促反应的影响94.2底物浓度对酶促反应的影响104.3反应时间对酶促反应的影响114.4反应温度对酶促反应的影响124.5反应pH对酶促反应的影响124.6金属离子对酶促反应的影响134.7酶促反应过程中粘度的变化134.8不同结构壳聚糖对酶

2、促反应的影响145结论14参考文献14致谢1613苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶水解作用研究[摘要]壳聚糖酶是专一性降解壳聚糖产生壳寡糖的水解酶，壳聚糖酶可有广泛的微生物产生。本论文在已经筛选得到产壳聚糖酶的苏云金芽孢杆菌和分离纯化得到壳聚糖酶的基础上，对苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶水解壳聚糖的作用影响因素进行研究，并对酶促反应动力学和酶促反应的特性进行研究。结果表明苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶适宜水解的温度条件为55℃；适宜水解的反应时间为3~4h，适宜水解的反应pH为5.0~5.5，在这个pH条件下，底物壳聚糖也更容易溶解和降解；Ca2+、Zn2+

3、对酶促反应有一定的促进作用，而Hg2+对该反应有明显的抑制作用。通过测定酶促反应过程中粘度的变化，表明苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶可能以内切的方式作用水解壳聚糖。本论文为明确苏云金芽孢杆菌壳聚糖酶的酶学特性和性质和为探索壳聚糖酶促水解适宜的条件提供基础和依据。[关键词]壳聚糖；水解；壳聚糖酶；苏云金芽孢杆菌13CharacterizationofchitosanhydrolysisbythechitosanasefromBacillusthuringiensis[Abstract]Chitosanaseisanenzymethatcanh

4、ydrolysevarioustypesoflinksinchitosan.Chitosanasecanbeproducedbyvariousmicroorganisms.Inourpreviousstudy,theisolatefromBacillusthuringiensiswhichcanproducechitosanasewerescreenandchitosanasewasproducedandpurified.Theeffectsofreactiontemperature,reactiontime,pHandamount

5、enzymeonthehydrolysisofchitosanbychitosanasefromBacillusthuringiensiswasinvestigatedinthepresentstudy.TheresultsshowedthatheoptimumtemperatureandpHofchitosanasefromBacillusthuringiensiswas55°Cand5.0~5.5,respectively.Theoptimumreactiontimewas3~4h.Theactivityofchitosanas

6、efromBacillusthuringiensiswasmarkedlyenhancedbyCa2+andZn2+.Howerver,TheactivityofchitosanasefromBacillusthuringiensiswassignificantlyinhibitedbyHg2+.ThechitosanasefromBacillusthuringiensiscouldhydrolyzethechitosanbyendo-splittingmanner.Thisstudywouldprovidetheoreticalf

7、oundationforoptimintionofhydrolysisofchitosanbythechitosanasefromBacillusthuringiensis.[Keywords]Chitosan;Hydrolysis;Chitosanase;Bacillusthuringiensis131前言1.1壳聚糖壳聚糖(chitosan)是目前研究最多的多糖类分子，由几丁质(chitin)经脱乙酰作用得到，是甲壳素最基本、最重要的衍生物。纯净的壳聚糖为白色粉末或片状固体，比重0.3，常温下能稳定存在。由于其化学性质较为活泼，

8、可以发生多种化学反应，因而在化妆品、医药、农业、环保等多个领域中被广泛应用[1]。1.2壳寡糖壳寡糖[2](Chitooligosaccharides，简称COS)，学名β-1，4-寡糖-葡萄糖胺，壳聚糖经降解后得到的产物。与壳聚糖相