肿瘤动物模型构建实验技术

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1、肿瘤动物模型的建立可以：（1）评价抗肿瘤免疫治疗的疗效；（2）作为抗肿瘤药物筛选模型；（3）为肿瘤转移研究提供更好的研究平台；（4）为研发抗肿瘤转移性药物提供良好的实验工具。实验方法：诱发性肿瘤动物模型实验方法原理：诱发性肿瘤动物模型是指研究者用化学致癌剂、放射线、致癌病毒诱发动物的肿瘤等。实验材料：肿瘤细胞小鼠试剂、试剂盒、无血清培养基质、3%中性甲醇石腊仪器、耗材、低温离心机、血球计数器、游标卡尺实验步骤一、肝癌1.二乙基亚硝胺（DEN）诱发大白鼠肝癌（1）取体重250g左右的封闭群人白鼠，雌雄不拘：（2）按性

2、别分笼饲养。除给普通食物外，饲以致癌物，即用0.25%DEN水溶液灌胃，剂量为10mg/kg,每周一次,其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中,任其自由饮用;（3）共约4个月可诱发成肝癌；（4）也可以单用0.005%掺入饮水中口吸服8个刀诱发肝癌。2.4-2甲基氨基氮苯（DBA）诱发大鼠肝癌（1）用含0.06%DBA的饲料喂养大鼠,饲料中维生素B2不应超过1.5-2mg/kg；（2）4〜6刀就有大量的肝癌诱发成功。3.2■乙酰氨基酸（2AAF）诱发小鼠、狗、猫、鸡、兔肝癌（1）给成年大鼠含0.03%2AAF标

3、准饲料；（2）每日每平均2〜3mg2AAF（也可将2AAF混于油中灌喂），3〜4月后有80〜90%动物产生肝肿瘤。4.二乙基亚硝胺诱发人鼠肝癌：（1）用剂量为每日0.3〜14mg/kg体重，混于饲料或饮水中给予；（2）6〜9个月后255/300大鼠发生了肝癌。5.亚胺基偶氮甲苯（OAAT）诱发小鼠肝癌（1）用1%OAAF苯溶液（约0.1ml含1mg）涂在动物的两肩胛间皮肤上，隔日一•次，每次2〜3滴，―•般涂100次。（2）实验后7〜8周即而出现第一个肝肿瘤,7个月以上可诱发小鼠肝肿瘤约55%。（3）或用2.5mg

4、OAAT溶于葵瓜子油中,给C3H小鼠皮下注射4次,每日间隔10天，也可诱发成肝癌。6.黄曲霉素诱发大鼠肝癌（1）每日饲料中含0.001〜0.015ppm,混入饲料中喂6个月后，肝癌诱发率达80%。FHJ一、冃削？1.甲基胆恿诱发小鼠胃癌（1）取20g左右的小鼠，无菌手术下，在腺胃粘膜面穿挂含甲基胆恵（MC）线结。（2）含MC的线结是用普通细线，在一端打结后，将线结迸于盛有MC小玻璃试管内，在酒精灯上微微加温，使MC液化渗入线结。MC浓度为0.05〜0.1g20•甲基胆恵内浸入10〜20根线。（3）手术埋线后4〜8个

5、月可诱发成功胃癌。1.不对称亚硝胺诱发小鼠胃癌剂量为0.25ml/kg体重，3个月后全部动物发生前胃乳头状癌，7〜8个月后有85〜100%发生前胃癌。昆明种最敏感。A系次之，615系小鼠敏感性最差。2.甲基亚硝基酣酸尿素诱发小鼠胃癌给BD大鼠饮水中加甲基亚硝基酷酸尿素，剂量为2mg/kg体重，每周饮用5次，520天后全部大鼠均发牛了腺胃癌。三、食管癌1.甲基节基亚硝胺（MBNA）诱发大鼠食管癌（1）取体MlOOg以上的Wistar大鼠;（2）任其食川含甲基节基亚硝胺的饮水，并将MBNA掺入饲料屮使每Fl摄入量达0.

6、75〜1.5mg/kg体重；（3）80〜100天可诱发成食管癌。2.二坯黄槿素（Dihydrosafrole）诱发大鼠食管癌（1）二姪黄樟素是一种制备啤酒的调味詁，在大鼠饲料中加入百万分之二千五百至一万（2500-10000ppm）黄樟素,就能引起20〜75%的食管癌。3.甲基茉基亚硝胺诱发人鼠食管癌（1）用0.2%或0.005%的甲基节基亚硝胺水溶液，给动物经口灌喂，每天一次，大鼠灌注剂量为1mg/kg体重；（2）至笫27天即发现一例食管乳头状瘤，154天发现笫一例食管癌，11个月食管癌的发生率为53%。四、肺癌

7、1.二乙基亚硝胺（DEN）诱发小鼠肺癌（1）小白鼠每周皮下注射1%DEN水溶液一次，每次剂量56mg/kg,DEN总剂量达到868mg；（2）观察时间为100犬左右时，发癌率可达40%o（3）DEN总剂量达到1176mg,观察时间为半年左右时；发癌率可达94%。2.乌拉坦诱发肺腺癌（1）小鼠（A系，1-11/2月龄）较大鼠敏感，每次每只腹腔注入10%乌拉坦生理盐水液0.1〜0.3ml,间隔3〜5日再注，共注2〜3个月，每只小鼠用量约为100mg；（2）注后3个月肺腺癌发主率为100%,而且多数为多发性，这种诱发瘤为

8、良性。3.苯并花诱发肺腺癌（1）猴气管内注入3,4•苯并陀（苯并花为3〜15mg与等fiZFe2O3混合液），每周一次,共10次；（2）6只猴中有2只诱发肺的鳞状上皮癌。4.硫酸钱气溶胶诱发肺腺癌（1）用硫酸胺气溶剂给100只人鼠吸入；（2）13个月后所有大鼠都发生了肺腺癌。5.甲基胆恿诱发肺腺癌（1）用0.2%明胶作悬浮剂将甲基胆恵混合后给金地鼠气管内注入