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1、同种异体黑素细胞移植治疗白瘢风作者：卢涛，高天文，刘玉峰，李春英，孙林潮【关键词】移植关键词:移植，同种;黑素细胞；白瘢风0引言白瘢风患者免疫紊乱，黑素细胞（melanocyte,MC）异体移植有可能不被排斥，治疗如成功将有很大临床前景[1]•探索同种异体黑索细胞移植后的效果很有意义.1病例报告女，27岁，确诊白瘢风（稳定期），患者皮肤自幼出现色素脱失斑，逐渐增多扩大・1996年外用“敏白灵”,前2mo有效.1999-07外用补骨酯酊,日服5g・L-l硫酸铜lOmL和中药1剂,转移因子4mL,sc,l・：2d-l.皮损缩小，4mo后稳定•用健康男
2、青年环切的包皮培养MC,第4代大约80%融合时,用2.5g・L-l胰酶消化5min,加入含200g・L-1小牛血清的生理盐水终止，离心洗涤后加入牛:理盐水吹打制成不同密度的细胞悬液•移植时在患者腹部白斑处（约4X5cm2）用表皮分离机吸疱，工作负压48kPa,43°C,约40min后4个皮疱形成•从皮疱内抽出大部分渗液，再从原针孔处分别注入不同密度的MC悬液，A,B处MC密度为2X108・L-l,C,D分别为1X108・L-1、1X1O7・L-1.每孔注入大约0.ImL悬液.术后连续观察色素恢复情况.6
3、mo后，在C点用表皮分离机吸疱取疱皮,提取DNA,作PCR检测Y染色体特异性片段;在A点活检取材黑素银氨染色•术后Imo移植点发红，有轻微色素沉着•术后1.5mo移植点色素加深，周圉略发红.2.5mo后4个移植点色素恢复明显，颜色与邻近正常皮肤颜色基本匹配,D点移植细胞少，色素恢复区面积较小•术后6mo恢复的色素仍在•在表皮基底层和棘层之间有MC存在;真皮层有少量淋巴细胞浸润•黑素银氨染色显示:黑素细胞周围的表皮细胞内可见黑素颗粒，以基底层较多•疱皮DNA内含有Y染色体特异性片段.2讨论从临床结果看，接受MC异体移植的白斑区色素恢复比较满意，基本接近于周围正常皮肤•移植6
4、mo后恢复的色素仍在•组织病理学结果显示移植区有MC,并分泌黑素颗粒.存活的MC我们推测是移植的异体MC.首先，疱皮DNA经PCR检查其中含有Y染色体特异性片段，证实成活的MC來源于男性供体•其次,患者毛囊根部黑素染色阴性，说明在移植操作刺激下患者自身MC没有增殖•异体MC在受体体内存活，我们认为:①免疫排斥反应是一种迟发性变态反应，多数白瘢风患者迟发性变态反应低下，这种缺陷可能有利于MC异体移植[1];②白瘢风与自身免疫非常相关，机体产生的自身抗体或致敏的淋巴细胞能侵袭、破坏、损伤自身的组织和细胞成分,引起了MC破坏•当进入稳定期或恢复期时，病灶大小不变或缩小，对MC停
5、止发生免疫应答•此时异体MC“以假乱真”进入机体，可能免受破坏得以存活；③MHCII类分子在移植排斥反应中发挥重要作用,MC在止常情况下不表达或低表达MHC1I类分子，体外培养传代次数高时才开始表达[2]•低传代次数的MC异体移植不易被排斥.以上结果启示同种异体黑素细胞移植治疗白瘢风具有成功的希望.异体黑素细胞成功存活的机制尚待进一步探讨.参考文献：[1]刘玉峰•黑素细胞培养[A].见:朱铁君•色素性皮肤病[M].北京:北京医科大学中国协和医科大学出版社，1996:15-29.[2]HedleySJ,MetcaalfeR,GawkrodgerDJ,WeetmanAP,Ma
6、cNails・Vitiligomelanocytesinlong—termcultiireshownonTialconstitutiveandcytokine-inducedexpressionofintercellulareid-hesionmolecule-landmajorhistocompatibilitycomplexclassIandclassIImolecules[J].BrJDermatol,1998;139:965-973・
