221动物细胞培养和核移植技术导学案

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1、2.2动物细胞工程2.2.1动物细胞培养和核移植技术导学案【学习目标】•简述动物细胞培养的过程、条件及应用。•简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。【重点难点】重点■动物细胞培养的过程及条件。•用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。难点■川动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。【学习过程】动物细胞工程常用的技术手段有、、_、等，其中是其他动物细胞工程技术的基础。I动物细胞培养（1）概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的,将它分散成然后放在适宜的中，让这些细胞O（2）原理：（3）过程:取动物组织块剪碎组织用陕蛋白的处理形分散成单个细胞转入结养

2、液屮进行原代馅养用培养浪稀驿制成细胞总液取动物组织块一剪碎一用酶处理分散成（保证营养供应和有害代谢产物的及吋排出）〜制成-转入培养瓶中在适宜环境中进行培养,悬液中分散的细胞很快就，称为当贴壁细胞分裂生长到细胞就会，这种现彖称为时,转入培养液屮进行传代培养貼满瓶壁的细脂用眈蛋门的处理分散成单个细胞，制成细胞悬液初次培养称为O一贴满瓶壁的细胞重新用酶处理分散成单个细胞继续培养（使细胞从瓶壁上脱离下来便于分瓶后继续培养），称为代Z前的称为,遗传物质,遗传物质—,已经成为初次培养称为,分瓶后的培养都称为。传代培养的细胞一般传至_以示就不易传下去了，能传代培养到56，能

3、传代培养到50代Z后的称为。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。（正常细胞有接触抑制，通常是—层贴壁，癌细胞能无限增殖，没有接触抑制，可多层贴壁。）注：取材时i般选取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，因为这些细胞分化程度低、增殖能力强，更容易培养。（4）动物细胞培养的条件①:培养液和所有培养用具应进行处理。通常还耍在培养液添加一定量的,以防培养过程中的污染。此外，还应定期更换培养液，防止O②:合成培养基成分：糖、氨基酸、促主长因子、无机盐、微量元索等。通常需加入等天然成分。(3):适宜温度：哺乳动物多是:适宜pH：o④:@

4、是所必需的，002的主要作用是o细胞培养时，通常将其置于含的混合气体培养箱中进行培养。(5)动物细胞培养技术的应用：①许多有重要价值的纶物制站，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助动物细胞的大规模培养来生产。②动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞。③用于检测冇毒物质，判断某种物质的毒性。④科学家培养正常或者病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等。［问题］如何保证无菌、无毒环境？(1)对和所有进行无菌处理；(2)通常还需要在细胞培养液中添加一定量的；(3)应定期更换,以便清除,防止细胞代谢产物积累对细胞口身造成危害。为什么选

5、用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？用胃蛋白酶行吗?动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体?动物细胞培养瓶内表面为什么要光滑？动物细胞培养瓶内表面无毒、无菌的操作方法是什么？动物细胞培养中氧气和二氧化碳作用分别是什么？2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)概念：将动物的一个细胞的,移入一个已经屮，使其重组并发育成一个新的,这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为。哺乳动物核移植可以分为和o选用去核卵母细胞的原因:(2)原理：⑶种类r细胞核移植——易［细胞核移植——难(

6、4)过程供体体细胞卵巢卵母细胞减中劝»细胞培养一体细胞、注入去核一无核卵母细胞許细胞一胚胎膛堕代孕母牛一生出与供体遗传物质相同的个体①卵母细胞的采集：从屠宰场收集牛卵巢，在体外培养到期。②供体细胞的采集：从供体取体细胞进行培养。③供体的移入去核卵母细胞中，其实质是将与供体细胞进行细胞融合，一•般采用电激法使细胞融合，所以子代的细胞质基因來自于亲木。④供体核进入受体卵母细胞后，还需要物质或化学方法激活受体细胞，使其完成分裂，因为所选用的受体细胞是处于期的卵母细胞，减数分裂还没有进行完。⑤重组细胞在体外发育成,将早期胚胎移植到受体母牛体内。⑥代孕母牛最后生出与牛遗

7、传物质及性状的幼体。因为细胞质中遗传物质來自，同时，生物的性状不仅与遗传物质冇关，还受影响。（4）体细胞核移植技术的应用前景：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增人存活数量；③牛产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。（5）体细胞核移植技术存在的问题：成功率，克隆动物存在着问题，对克降动物也存有争议。［问题］受体细胞为什么选用卵母细胞？因为卵母细胞，易操作，而且含有促使细胞的某种物质和营养物质。【巩固练习】1、动物细胞工程技术的基础是（）A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植2、一只羊的卵细胞核被另

8、一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过