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时间:2019-10-20
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1、贺兰山紫蘑菇抗肿瘤活性研究摘要:木项目以贺兰山紫蘑菇为材料,深度研究并分析其抗肿瘤、抗氧化活性及分子机理。通过95%乙醇渗漉捉取,捉取液浓缩后以右油瞇、乙酸乙酯和正丁聘萃取获得萃取物,MTT法体外抗肿瘤活性检测初步结果显示石油瞇、乙酸乙酯相抗肿瘤效果显著,经过人批量提取,硅胶柱层析、制备薄层层析分离,核磁谱图鉴定得到了3个化合物,抗肿瘤、抗氧化活性结果显示乙酸乙酯提取物抗氧化活性显著,从中分离所得的Moridolide有抗肿瘤活性,经过分子实验的条带分析,Moridolide对乳腺癌细胞的抗癌作用可能是
2、因为作用于cyclinD1及VEGF-C从而影响细胞的增殖,在IL-8上有一定的作用说明其在一定程度内减弱了肿瘤细胞的恶性程度。关键词:贺兰山紫蘑菇;抗肿瘤;提収;抗氧化;RT-PCRTheanticancerconstituentsofCortinariusrufo-olivaceusAbstract:toinvestigateoftheanti-tumoractivecomponents,antioxidantactivityandmolecukirbiologicalchiiracteristic
3、sofCortinariusnifo-olivaceus.toprovideatheoreticalbasisforthefollow-upwork・ThedriedCrufo-olivaceuswerepowderedandextractedwithethanol.Thesolventwasfullyrotaryevaporatedunderreducedpressuretoyieldabrownsolid,suspendedinwater,extractedwithpetroleumether(PE
4、),EtOAcandn-BuOHsuccessively,preliminaryresultsofMTTassayinvitroshowthatPEextractandEtOAcextracthavepotentantitumoreffects,3compoundswereseparatedwithSilicagelcolumnchromatographyandpreparativechromatography,indentifiedwithNMRspectrum.Theantioxidantactiv
5、ityandantitumoractivityresultsshowedthattheantioxidantactivityofEtOAcextractispotent,theobtainedcompoundMoridolidehasantitumoractivity,effectsoncyclinDIandVEGF-CtoinfluencecellproliferationmayaccountfortheanticanceractivityofMoridolideonbreastcancercells
6、,itiscertifiedthatMoridolidealsohascertaineffectonIL-8tomakesurethatMoridolidecanweakenedthemalignantdegreeoftumorcellsthroughtheanalysisofexperimentalmolecularbands・Keywords:Cortinariusrufo-olivaceus;antitumor;extract;antioxidant;Rl^PCR贺兰山紫蘑菇(Cortinariu
7、srufo-olivaceus)为外牛菌根菌,与青海云杉树的根系有着密切的共住关系叫它是生长在贺兰山白然保护区森林屮的一种肉质滑厚、口感纯正、气味香醉、含有丰富的粗纤维、总糖、蛋白质、多种矿质元素以及17种游离氨棊酸⑵的野生食川菌,被誉为“贺兰山珍”。初步研究显示,贺兰山紫蘑具有明显的抗氧化、抗炎、肿瘤活性卩创,但是其活性成分及抗性机制不明确,给该菌的深度开发带来障碍,本课题计划对■此进行深度研究,以期开发高附加值的产站。1材料与方法流程二:抗瘤活性定位波谱鉴定材料:贺兰山紫蘑姑了实体(采自W肃金昌,海
8、拔2300〜3300m,青海云杉林),乙酸乙酯,石油瞇,正丁醇,无水乙醇,丙酮,甲醇,氯仿,硫酸(上述均为分析纯),多规格层析硅胶,薄层层析硅胶板。主要仪器:MCO-20AIC二氧化碳培养箱,SCW-CJ-IF大直流单人超净工作台,NikonEcLIpseTS100,酶标仪,中压柱层析系统,核磁共振仪(VARIAN,400兆)等。1.2实验方法将紫蘑粗粉川95%乙醇回流捉取通过体外活性实验确定抗肿瘤活性成分所在体系(水相、石油醯相、乙酸乙酯
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