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1、细胞遗传学和PT-PCR对APC诊断的临床意义临床血液学杂志1999年第2期第12卷论箸作者：仇惠英王阳王玮孙爱宁薛永权夏学鸣陈子兴单位：苏州医学院附属第一•医院、江苏省血液研究所关键词：早幼粒细胞白血病,急性；细胞遗传学;RT-PCR摘要目的：探讨细胞遗传学及RT-PCR检测对APL诊断的临床意义。方法：直接法或24h培养法处理骨髓标木，采用只带或G带方法显带检测t(15；17)易位，RT-PCR检测PML-RARa融合基因。结杲：形态诊断M355例，3例疑诊M3或M2；染色体检测50例发现1(15；17),敏感率90.91
2、%,3例形态不能肯定诊断者染色体发现t(15；17),诊断为M3v型；有t(15；17)易位者均检测到PML-RARa融合基因，3例无t(15；17)易位者，RML-RARa检测阳性。3例误诊者均经染色体及融合基因检测排除。结论：细胞遗传学t(15；17)及融合基因RML-RARa检测是诊断APL的可靠指标，RT-PCR融合基因检测更为敏感。TheClinicalSignificanceofCytogeneticsandRT-PCRintheDiagnosisofAcutePromyelocyteLeukemiaQiuHuiy
3、ing.WangYang,WangWei,etalTheFirstHospitalofSuzhouMedicalCollege,Suzhou,215006AbstractObjective:WithtoinvestigatetheclinicalsignificanceofcytogeneticsandPT-PCRinthediagnosisofAPL.Methods:WithKandQbindringtedhiguetranslocationt(15;17)andPT-PCRdetectPML-PARafusiongene.
4、Results:58patientswereprimarydiagnosedasAPLbasedonmorphologicfeature,50patients(90.91%)werefoundtohavet(l5;17)and3casesmorphologicalsuspectedAPLwereconfirmedasM3vaccordingtocytogenetics.Thepatientswitht(15;17)havealldetectedPML-RARafusiongene,3patientswithnot(15;17)
5、werefoundPML-RARa,3casesweremorphologicalmisdiagnosed.Conclusio:CytogeneticsandRT-PCRdetectionoft(15;17)(q22,ql2)andPML-RARafusiongenewerereliableevidencesRT-PCRmethodismoresensitivethanothermethods.KeywordsAcutepromyelocyteleukemiaCytogeneticsRT-PCR急性早幼粒细胞性白血病(APL)
6、是一•种特殊类型的急性白血病，临床上易并发弥漫性血管内凝血(DIC)o细胞毒化疗在诱导治疗中死亡率高，全反式维甲酸(ATRA)的应川，使初诊患者的死亡率明显下降，完全缓解率(CR)显著提高，因此快速、正确的诊断特别重要。APL具有特殊的形态特征，人部分患者口J仅凭形态得到诊断，但仍有部分患者仅靠形态学难以诊断，故细胞遗传学及分子生物学检测对APL的诊断具有重要的临床意义。1材料和方法1.1病例58例初诊病例，男26例，女32例，年龄19〜63岁。根据形态学检查确诊或疑诊为APL,参照犬津标准和FAB标准，将APL分成M3a、M
7、3b、M3v三种亚型。1.2细胞遗传学检查58例患者治疗前均常规作染色体检查，标本采口骨髓，直接法或24h培养法处理标本，采用R带或G带方法显带，根据《国际人类染色体命名法(ISCN)1991年》命名核型。1.3RT-PCR检测31例患者同期行RT-PCR检测PML-RARa融合棊因。方法：①骨髓标木，Ficoll方法分离单个核细胞；②RNA抽提：川异硫氧酸弧一步法抽提。③RT-PCR检测PML-RARamRNA。逆转录CDNA反应：取RNA2ug、六随机引物(promega)100ng,dH2O调至20u1,700°C10m
8、in预变性，再加入反应休系液(RNAsin1.25ul、dNTP2u1、dTT4ul、dH2O3.75u1、MMIV逆转录酶1u1、5xbuffer8u1),反应条件370°C、45minc筑巢式PCR反应：根据文献门)修改而成。PCR反应在两个体系中进行，第1体系检测L型，
