免疫胶体金技术的应用与展望

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1、免疫胶体金技术的应用与展望陈俊彦，肖琼(南京信息工程大学滨江学院，南京210044)摘要免疫胶体金技术是一种新型固相标记免疫检测技术，因其独特的性质在许多领域得到广泛应用和快速发展。简述了免疫胶体金技术在电镜、光镜快速检测诊断中的发展以及在生物医学、免疫组织化学和细胞生物学等领域的研究和应用。未来免疫胶体金技术在提高胶体金制备质量的同时将实现定量和多元化检测。关键词免疫胶体金技术；快速诊断；生物医学；应用中图分类号：O657文献标识码：A文章编号：1008–6145(2014)01–0101–04Applicationa

2、ndProspectofImmuneColloidalGoldTechniqueChenJunyan，XiaoQiong(NanjingUniversityofInformationScience&Technology,BinJiangInstitute，Nanjing210044，China)AbstractImmunecolloidalgoldtechniqueisanewkindofsolidphasemarkedimmunedetectiontechnology，itiswidelyappliedinmanyfi

3、eldsanddevelopedrapidlyowetoitsuniquecharacteristics.Theresearchandapplicationoftheimmunecolloidalgoldtechniqueintherapiddiagnosiswithelectronmicroscope，lightmicroscope，andthefieldofbiomedical，immunohistochemicalandcellbiologywerebrieflydiscussed.Inthefuture，thet

4、echniqueofimmunecolloidalgoldwillimprovethequalityofcolloidgoldandachievequantitativeanddiversitydetectionatthesametime.Keywordsimmunecolloidalgoldtechnique;rapiddiagnosis;biomedical;application分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程［6］。利用还原法从氯金酸溶液中可制备直径1～150nm大小不同的胶体金颗粒。溶胶的颜色与粒径大小相对

5、应：5～20nm溶胶呈葡萄酒红色；20～40nm液体为深红色；60nm以上金溶液呈紫红色［7］。在适宜条件下，抗原和抗体与胶体金颗粒反应产生聚集，达到一定的密度时，大量聚集的标记物显示出肉眼可见的红色或粉红色斑点。因此免疫胶体金技术在基础研究和检验检疫中定性或半定量的快速检测中得到广泛的应用［8］。2免疫胶体金在电镜水平的应用免疫胶体金电镜技术是在分子水平上对细胞抗原进行形态学研究较为理想的方法［9］，其最大优点是通过不同大小金颗粒或结合酶标进行双标记或多标记，在同一标本上显示两种不同抗原，有助于细胞内生物活性物质的定位

6、，同时观察不同抗原及受体在细胞表面和细胞结构中的定位，了解细胞组织中的相互关系及代谢过程。Jia等应用免疫胶体金电镜技术对蚕豆叶片细胞研究，发现蚕豆幼嫩叶片和成熟叶片叶肉细胞中金颗粒分布的不同。陈以峰等研究发现烟草受精前后卵细胞内吲哚乙酸(IAA)的分布变化。免疫胶体金技术(immunecolloidalgoldtechnique，ICG)是以胶体金为标记物，利用特异性抗原抗体反应进行的固相标记免疫检测技术。继荧光素、放射性同位素和酶检测技术之后，免疫胶体金技术已广泛应用于生物医学、免疫组织化学和细胞生物学等研究领域。1

7、971年Faulk等［1］首次将胶体金与抗体结合应用于免疫电镜，研究沙门菌壁细菌表面抗原的分布。1977年Geoghegan等［2］应用免疫胶体金染色技术(immuno-goldstaining，IGS)，在光镜水平检测B淋巴细胞表面膜免疫球蛋白。1983年Holgatet等［3］在胶体金染色的基础上，增加了银显影技术，免疫金银染色技术(immuno-goldsilverstaining，IGSS)取代了传统的荧光素和酶等物质。随着研究的不断深入，以肉眼观察水平的免疫胶体金快速诊断技术在快速检测中得到了广泛的应用和发展［

8、4］。1免疫胶体金技术的基本原理胶体金是氯金酸(chloroaurieacid，HAuCl4)在还原剂(白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠和鞣酸等)作用下，聚合成带负电的疏水胶溶液。胶体以金颗粒为核，表面吸附AuCl4和H+双层离子，与蛋白质分子及其它非共价的生物大分子(毒素、酶、抗生素、激素、多肽等)正电荷基团形成静电结合，