HBV耐药性及防治策略

(8页)

'HBV耐药性及防治策略'
实用HBV耐药性及防治策略南昌市第九医院     徐龙乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus , HBV) 是目前世界上流行最广泛的病毒之一, HBV有较高的变异性,其原因是由于HBV的复制是通过RNA中间体(前基因组RNA)利用病毒本身的DNA多聚酶(polymerase)─DNA-P反转录成负链DNA,在反转录过程中,DNA-P缺乏校对酶活性,不能修正核苷酸的错配,导致HBVDNA序列发生变异。HBVDNA至少含有4个开放读码框(open-reading frames,ORF),即S区(包括S区、前S1区和前S2区)、C区(包括C区和前C区)、P区和X区。本文就HBV耐药及防治策略的最新研究进展作一综述。 一、HBV 分子结构及复制周期HBV属于嗜肝DNA 病毒, 其基因全长仅3. 2 kb。在HBV包膜内, HBV 基因以不完全双链环状DNA 形式存在。HBV 感染人体肝细胞后,将包膜内HBV DNA 释放入肝细胞核内并形成共价闭合环状DNA(cccDNA) 。宿主RNA 聚合酶以cccDNA为模板,转录成mRNA。mRNA 亦为前基因组RNA。HBV 多聚酶以前基因组RNA为模板,逆转录合成负链HBVDNA ,然后再以负链DNA 为模板合成正链HBV DNA。最终形成子代HBV DNA。由此可见, HBV 多聚酶在HBV 复制过程中起着至关重要的作用。二、HBV 耐药突变的定义及命名病毒对抗病毒药物的耐药分为表型耐药和基因型耐药。表型耐药是指:在治疗期间病毒水平上升,一般用抗病毒药物浓度(IC50)测定,IC50增加说明药物敏感性下降或耐药程度增加,需要更大的药物剂量才能抑制变异的病毒。基因型耐药是指病毒聚合酶基因突变,形成新的病毒基因序列,一般采用DNA测序、基因芯片等方法测定。发生变异的病毒常可改变其生物学特性,给临床的防治带来一系列问题。针对HBV耐药可分为表型耐药、基因型耐药、临床耐药,临床耐药( clinical resistance)指临床出现病毒复制不能被抑制,或HBV 复 制一度被抑制后又出现HBV DNA反跳, 同时并伴有ALT 升高。已知核苷类药物耐药突变均发生在HBV多聚酶(DNA-P)上。HBV 分为8 个基因型(A~H) 。各基因型HBV多聚酶长短不尽相同。以A基因型HBV 为参照,HBV 多聚酶总长845 个氨基酸。HBV多聚酶可分为4 个功能区: 终端蛋白(terminal protein) 、间隔区 (spacer) 、逆转录酶区( reverse transcriptase) 及RNA 降解酶区 (RNase H) 。HBV 耐药变异以国际通行的氨基酸单字母加变异位点来标记。例如, YMDD 代表逆转录酶区的4 个氨基酸(酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸) ,其中的蛋氨酸(M) 变为亮氨酸(V) 或异亮氨酸( I) 则会引起拉米夫定耐药。起初,HBV 耐药突变的位置是从HBV多聚酶的第一个氨基酸数起。由于HBV 8个基因型的HBV多聚酶长短不同,以不同HBV 基因型为参照, YMDD 所处的位点不同。同样的YMDD 变异被报道成M552V、M550V、M539V 等不同命名。为避免混乱,Stuyverg 等提议将HBV 耐药突变统一从逆转录酶功能区(各基因型均为344 个氨基酸) 的第一个氨基酸数起并加前缀rt (例如YMDD 变异被命名为rtM204V) 。HBV多聚酶逆转录酶区包含7 个基因保留亚区(A~ G) 。拉米夫定耐药突变主要发生在B 和C 亚区中。HBV多聚酶逆转录酶的三维结构犹如一只半张开的右手。B 和C 亚区均位于手掌部位,紧靠拉米夫定结合位点。rtM204V 或rtM204I 突变是引起拉米夫定耐药的一个直接因素。从分子结构上讲,V 和I 均比M多了一个β甲基。而这个多出来的甲基造成拉米夫定结合位点的空间拥挤,从而使拉米夫定不能有效地与HBV多聚酶结合。三、HBV 耐药突变的机制由于HBV 在体内复制的过程需要经过逆转录这一步骤, 在反转录过程中,DNA-P缺乏校对酶活性,不能修正核苷酸的错配,导致HBVDNA序列发生变异,HBV 复制中的天然复制错误率比其它DNA 病毒要高10倍左右。HBV 基因在复制过程中不断产生天然变异,因而在HBV 感染者体内常形成一群由基因十分相似、但不完全等同的病毒株组成的准种(quasispecies) 。在未接受过核苷类药物治疗的患者中, HBV野型株占HBV 准种的绝大多数。耐药变异株在患者用药前就可能存在,也可在用药过程中产生。患者用药后,对药物敏感的野型病毒株受到抑制。含有耐药突变的病毒株得以有更多空间进行复制。当对某一药物有耐药性的病毒株成为准种中的主要病毒株时,此药就失去疗效。四、主要HBV耐药突变治疗乙型肝炎的核苷类药物主要是通过与HBV 多聚酶的天然底物(dNTP) 竞争来达到抑制HBV多聚酶的活性,从而达到抑制HBV 复制的作用。P基因区是HBV基因组中最大的ORF,全长2496bp,编码含832个氨基酸的多肽,称为HBVDNA多聚酶(DNAP),位于nt2357~0~1621之间。HBV耐药株的变异发生在DNAP基因的rt区。临床研究已发现有各种不同药物的H B V 耐药变异株,根据核苷(酸)类似物耐药变异株的不同形式,可将现有的药物分为三组:(1 )L-核苷(酸)类似物组包括拉米夫定(Lamivudine ,LMV)、依曲西他平(Emtricitabine,FTC),替比夫定(Telbivudine,LdT)、克拉夫定(Clevudine,CLV);(2 )无环磷酸酯组,包括阿德福韦(adefovir dipivoxil,ADV)和替诺福韦(tenofovir,TFV);(3)环戊烯组,包括恩替卡韦(entecavir,ETV)等。1. L- 核苷(酸)类似物组DNA聚合酶C区亚结构域(motif)是HBV进行逆转录的活性部位,由酪氨酸(Y)、蛋氨酸(M)-天门冬氨酸(D)-天门冬氨酸(D)即YMDD组成,该部位正是LAM干扰HBV复制的结合位点。研究证明,YMDD中的rt204位蛋氨酸可被缬氨酸(V)或异亮氨酸(I)取代,生成YVDD或YIDD,导致该亚结构域的空间构型改变,从而妨碍了与LAM的结合。YIDD变异可单独存在,而YVDD则常伴有多聚酶B区rt180位的亮氨酸(L)由蛋氨酸(M)取代的变异。变异后的HBV对LAM的敏感性显著下降。与拉米夫定有关的主要耐药变异位点为rtM204I/V,目前研究已发现与耐药有关的不同类型的突变形式包括:(1 )r t M 2 0 4 I / V +rtL180M;(2)rtM204I;(3)rtV173L +rtL180M + rtM204V;(4)r1L80I + rtM204I;(5)rtQ215S + rtM204I/V + rtL180M;(6)rtIl69T + rtV173L + rt 180M + rtM204V ;(7)rtA181T ;(8)rtT184S + rtM204I/V± rtL180M;(9)rtM204S +
关 键 词:
HBV 耐药性 防治 策略
 天天文库所有资源均是用户自行上传分享,仅供网友学习交流,未经上传用户书面授权,请勿作他用。
关于本文
本文标题:HBV耐药性及防治策略
链接地址: https://www.wenku365.com/p-44788817.html
关于我们 - 网站声明 - 网站地图 - 资源地图 - 友情链接 - 网站客服点击这里,给天天文库发消息,QQ:1290478887 - 联系我们

本站为“文档C2C交易模式”,即用户上传的文档直接卖给(下载)用户,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益归上传人(含作者)所有【成交的100%(原创)】。本站是网络服务平台方,若您的权利被侵害,侵权客服QQ:1290478887 欢迎举报。

1290478887@qq.com 2017-2027 https://www.wenku365.com 网站版权所有

粤ICP备19057495号 

收起
展开