第 八 章 吸 光 光 度 法-稍微修改

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1、第八章吸光光度法吸光光度法是基于物质分子对光的选择性吸收而建立的一种分析方法，包括比色法、可见及紫外吸光光度法和红外光谱法等方法。本章仅介绍可见分光光度法。可见分光光度法------VisibleSpectrophotometry特点：灵敏度高，可以测微量、痕量组分（10-4—10-5%），准确度高：2%-5%8.1物质对光的选择性吸收许多物质是有颜色的，物质之所以呈现五彩缤纷的不同颜色，就是因为选择性地吸收了某些特定波长的可见光所致。例如：高锰酸钾为紫色；重铬酸钾为橙色。有色溶液颜色的深浅，与有色物质的浓度成正比。

2、一、光是电磁波中的一个很小波段。光可进行以下分类：光紫外光：（10-400nm）可见光：（400-760nm）红外光：(0.76-300um)光单色光：单一波长的光。复合光：不同波长的光。白光属于复合光。一束白光（复合光）通过三棱镜分光，便可得到红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等色光，这些色光也并非原来意义上的单色光（因其不纯）。将红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等色光按一定比例混合，就可得到白光。互补光：红橙绿青青蓝蓝紫红-青为互补光紫-绿为互补光等等两种互补光按一定比例混合，也能得到白光。黄物质颜色与吸收光波长的关系物质颜色

3、吸收光波长/nm物质颜色吸收光波长/nm黄绿400~450（紫）紫560~580（黄绿）黄450~480（蓝）蓝580~610（黄）橙480~490（绿蓝）绿蓝610~650（橙）红490~500（蓝绿）蓝绿650~760（红）紫红500~560（绿）高锰酸钾之所以显示紫红色，就是选择性地吸收了可见光里波长500～560nm范围的绿光，绿光得不到互补，因此显示绿光的互补色紫红色。将不同波长的光通过某一固定厚度和浓度的有色溶液，测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度（即吸光度），然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，作图，

4、可得一曲线，称为吸收曲线。吸收曲线吸收曲线中吸光度最大值称为最大吸收，它所对应的波长称为最大吸收波长，用λmax表示。现用4种不同浓度的高锰酸钾溶液，分别测量它对不同波长的吸光度，绘出的曲线见图8-1。高锰酸钾溶液对波长为525nm附近的绿色光有最大吸收，而对紫色和红色光则吸收很少。虽然高锰酸钾溶液浓度不同，但最大吸收波长不变，都是525nm。在最大吸收波长处测定吸光度，则灵敏度最高。在实际测定中，常选用该物质的最大吸收波长作为测量波长。8.2朗伯-比尔定律被溶液吸收的光的强度为IabcmI0入射光透射光It界面反射

5、损失Ir当一束平行单色光通过有色溶液（液层厚度为b）时，光的一部分被溶液吸收，一部分透过溶液，一部分被器皿表面反射。它们之间的关系为:朗伯和比尔分别于1760年和1852年研究了光的吸收与有色溶液的液层厚度及溶液浓度的定量关系。朗伯指出：如果溶液的浓度一定，则光的吸收程度与液层厚度成正比，该关系用下式表示：Io—入射光强度；It—透过光强度；A—吸光度；b—深层厚度（即光程长度）；K1—比例常数。c—有色溶液的浓度；K2—比例常数比尔指出：当液层的厚度一定时，溶液的吸光度与溶液的浓度成正比，这个关系称为比尔定律，用下

6、式表示：朗伯-比尔定律：朗伯-比尔定律通常写为以下两种形式：①②a为吸光系数，单位为L/g·cm；b为液层厚度，单位用cm表示；c为有色溶液的浓度，单位用g/L表示。为摩尔吸光系数，单位为L/mol·cm；b为液层厚度，单位用cm表示；c为有色溶液的浓度，单位用mol/L表示。吸光度具有加和性：在多组分体系中，如果各种吸光物质之间彼此不发生作用，这时体系总吸光度就等于各组分吸光度之和，这一规律称为吸光度的加和性。在吸光度的测量中，有时也用透光度T（或透光率）表示有色物质对光的吸收程度。A与T的关系：透光度T定义为透射

7、光强度It与入射光强度Io之比8.3吸光光度法的灵敏度与准确度8.3.1灵敏度的表示方法1．摩尔吸光系数摩尔吸光系数表示浓度为1mol/L的有色溶液，其液层厚度为1cm时的吸光度。例10.0880mgFe3+在酸性溶液中，以硫氰酸钾显色后，用水稀释到50.00ml，在480nm处用1cm比色皿测得吸光度A为0.220，计算该显色反应的摩尔吸光系数。解已知A＝0.220，b=1cm2．桑德尔（Sandell）灵敏度S桑德尔灵敏度S表示：规定仪器的检出极限A=0.001时，单位横截面积液柱内能够检出的物质最低含量为桑德尔

8、灵敏度。单位：3.摩尔吸光系数与桑德尔灵敏度之间的关系：S值越小，灵敏度高，反之，灵敏度越低。8.3.2影响测定结果准确度的因素1仪器的测量误差及其减免方法从左到右，仪器的测量相对误差↓透光率T↑，吸光度A↓从左到右，仪器的测量相对误差↑透光率T↑，吸光度A↓仪器的测量相对误差为最小时，所对应的T=36.8%，A=0.434若要满足微量组分或痕