色谱分析法概述

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1、色谱分析法掌握色谱法的基本原理、基本术语及定性定量分析的方法。教学要求1906年由俄国植物学家茨维特（Tswett）首先提出的（见右图），1930年后得到快速发展，自50年代以来，从基础理论、实验方法到仪器研制已发展成为一门趋于完善的分析技术。1、色谱分析法的诞生一、色谱过程和基本原理Tswett色谱说固定相（stationaryphase）色谱柱（column）流动相（movingphase）色谱图（chromatogram）洗脱（elution）色谱法是一种分离技术，试样混合物的分离过程也就是试

2、样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配过程。其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。利用固定相与被分离的各组分产生的吸附(或溶解)作用的差别，被分离的各组分在固定相中的滞留时间不同，使不同的组分按一定的先后顺序从固定相中被流动相脱附（或挥发）出来，从而实现不同组分的分离。原理：2、色谱法的分离原理及特点当流动相中携带的混合物流经固定相时，其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力

3、的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础色谱分离特点凡是色谱分离都具有以下共同点：都具有两相：流动相和固定相，固定相是不动的，流动相携带样品并冲洗样品对固定相作相对运动；被分离组分对流动相和固定相有不同的作用力（吸附、溶解、离子交换、渗透）按照固定相和流动相的状态分类1、气相色谱（流动相为气体）：（1）气—固

4、色谱（2）气—液色谱2、液相色谱（流动相为液体）：（1）液—液色谱（2）液—固色谱二、色谱法的分类气相色谱：流动相为气体（称为载气）。按分离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱液相色谱：流动相为液体（也称为淋洗液）。按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱。离子色谱：液相色谱的一种，以特制的离子交换树脂为固定相，不同pH值的水溶液为流动相。按固定相的形态分类2、柱色谱：固定相装在管柱中，被分离的样品沿一个方向移动而进行分离的方法（1）填充柱色谱：固定相装在一

5、玻璃或金属柱中（填充）（2）毛细管柱色谱：固定相附在空心管内壁上（开管柱）1、纸色谱：固定相为滤纸，把试样点在滤纸上，用溶剂将其展开，不同组分分离开。3、薄层色谱：将固定相研成粉末，再在玻璃板上压成或涂成薄膜，其余同纸色谱。其他色谱方法薄层色谱和纸色谱：比较简单的色谱方法按照色谱分离过程的物理化学原理分类1、吸附色谱：固定相为吸附剂，不同组分被其吸附的能力不同。2、分配色谱：不同组分在两相间的溶解能力不同。3、离子交换色谱：固定相为离子交换剂，分离离子型化合物4、凝胶色谱：用化学惰性的多孔性物质作固

6、定相，不同组分按分子量大小进行分离。色谱法的特点高效高灵敏度速度快样品用量少选择性好应用范围广色谱法的发展目前由于使用了高效能的色谱柱、高灵敏度的检测器及微处理机，使得色谱法成为一种分析速度快、灵敏度高、应用范围广的分析方法。如气相色谱与质谱（GC－MS）联用、气相色谱与Fourier红外光谱(GC－FTIR）联用等。二、色谱法基本术语固定相：在色谱法中，将填入玻璃或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相；流动相：自上而下运动的一相（一般气体或液体）称为流动相；色谱柱：装有固定相的管子称色

7、谱柱。被分析的样品从进样开始，经色谱柱分离，到各组分全部流出、经检测器检测，由记录仪绘出样品中各个组分的流出曲线，即色谱图。色谱图是以组分的流出时间(分钟或秒)为横坐标，以检测器对各组分的电讯号响应值(mV)为纵坐标。即：色谱图是由检测器输出信号强度对时间作图所绘制的曲线。1、流出曲线（色谱图chromatogram）：二、色谱法基本术语气相是在操作条件下，没有组分流出时（即纯流动相）的流出曲线。稳定的基线是一条平行于时间轴的直线。基线反映了检测器的电噪声随时间的变化。造成基线不稳定的因素是噪声和漂

8、移。2、基线（baseline）1）噪音(noise，N)：各种未知的偶然因素引起的基线起伏现象称为噪音。通常因为电源接触不良或瞬时过负荷、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所产生。2）漂移(drift)：基线随时间朝某一方向的缓慢变化称为漂移，用学位时间基线水平的变化来衡坦。漂移主要由产操作条件如电压、温度、流动相及流量的个稳定所引起，柱内的污染物或固定相被连续不断地洗脱下来也会产生漂移。是组分从色谱柱中流出过程的记录曲线。是流出曲线上突起的部分，即组分流经