DB13T 553-2004 波尔山羊胚胎移植技术规程

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1、DB省方标准DB13/T553-2004波尔山羊胚胎移植技术规程2004-07-OS发布2004-07-OS实施河北省质量技术监督局发布DH13/I'553-2004前言本标准附录A和附录B为规范性附录.本标准由河北省畜牧局提山。本标准起草单位:河北科技师范学院。本标准主要起草人:李佩国、冯敏山、张香斋、李索芬、李组玉、李雪竹、孙铁路、赵宝华、姜中伸DB13!1'553-2004波尔山羊胚胎移植技术规程1适用范围本标准规定了波尔山羊胚胎生产中供体羊的选择、超数排卵及配种、手术冲卵技术、胚胎质量鉴定、受体羊的选择和胚胎手术移植技术.本标准适用于波尔山羊的胚胎生产和移植.2供体羊的

2、选择2.1供体羊应符合波尔山羊的品种特征，谱系清楚，遗传性稳定.生产性能良好.2.2供体羊健康状况良好，体质健壮.无通传性和传染性疾病。繁殖机能正常.既往繁殖力高.2.3有1胎以上的繁殖史，年龄在2--5岁，产后3个月的空怀母羊.3供体羊的超致排卵及配种3.1超致排卵3.1.1超数排卵的季节和发情周期波尔山羊最适超数排卵季节为当年9月下旬至11月下旬和次年的2月下旬至3月下旬。波尔山羊的发情周7}l在18d^}21d,3.1.2激素选择和剂最根据供体羊个体情况，选择适宜的激素和剂量.一般采用:e)促卵泡素(FSH)，肌注100IU/只一150IU/只:b)促黄体生成素(Lli)

3、。根据FS11的注射剂量，肌注100IU/只一120IU/只，c)氯前列烯醉(ICl)，肌注0.08m以次，每天注射两次.3.1.3超数排卵方法3.1.3.1以母羊发情之日作为发情周期的Od，在母羊发情周期的第15d开始.每天6:00^-7:00和18:00^-19:00各注射1次FSH,连续3d，递减注射.3.1.3.2在第5,6次注射FSH时，同时肌肉注射ICle3.1.3.3确定供体羊发情后立即注射LH，如果}}i未注射完供体羊己发情，停止注射FSH，立即注射LH.3.1.4供体羊发悄鉴定3.1.4.1时间在第s次注射rsii时即对超排供体羊观察发情。3.1.4.2方法试

4、情公羊扎好试情布，放入母羊群中试情，傅30^-40只供体羊需1只健康试情公羊，当母羊接受公羊爬跨，站立不动，或母羊围着公羊旋转，并不断摆尾，作为发情的标准.3.2配种3.2.1种公羊的选择种公羊应符合波尔山羊的品种特征，谱系清楚，遗传性稳定.生产性能优良;健康状况良好，体质健壮.无遗传和传染性疾病;繁殖机能正常.3.2.2本交从供体羊接受爬跨进行第一次交配，侮8h-r12h配种1次，直至发情结束。学兔兔www.bzfxw.comDH13/T553-20043.2.3人工授精3.2.3.1操作要求a)采精、抽液稀释、输精用的器械严格灭菌、消毒。6)采栩前对种公羊外生殖器清洗消毒。

5、c)稀释后的精液rn}度要保持在250C-300C的环境中。d)输精前.母羊州男部必须经过清洗消毒。e)输入的鲜精活力在0.6以上，侮次输精有效精子数不少于3X10'.输粉次数不少于2次.f)选择适宜的输稍部位。3.2.3.2时间确认发情时立即进行第一次输精.之后侮间隔8h^-12h输精1次。直至发情结束.4手术冲卵技术4.1主要器材a)手术台:b)剃须刀;c)创布;d)止血纱布:。)}7毛17;f)手术刀柄;B)手术剪;h).if.-血钳;;)}p帕钳;」)持针器:k)肠4'1t(带乳胶管);I)手术刀片:m)缝合线，n)缝合针:o)摄子;P)中120mm表面皿;。)}1dO

6、mm表面皿;r)6#--d#头皮针(尖端磨钝);s)18#-2D#头皮针(尖端磨钝);t)}10二透明硅胶管:u)lOmL注射器;v)20mL注习寸器;w)中8mm玻璃管:x)}35mm培养皿.Y)体视显微镜.4.2药品a)7b96酒精、5%碘配、新洁尔灭、生理盐水、液体石蜡、双蒸水，b)青霖索、链霖素、牛血消白蛋白、氯化钠(NaCI)、磷酸二氢钾(KH,POa)、磷酸氢二钠(Na}lIPO,)、氯化钾(KCl).4.3试液的配制学兔兔www.bzfxw.comDH13/T553-20044.3.1砚酸缓冲盐水(PBS)称取NaCl8.0g.KHPPO,0.2g,Na,HPO,

7、2.13g.RCl0.2g，加双蒸水1000mL，完全溶解后加适量的3MNaOH调pH为7.4.即为PBS液.4.3.2冲卵液量取配置好的ice.液1000mL.加入牛血消白蛋白4g.充分摇匀即成.4.4冲卵步骤4.4.1手术4.4.1.1术前准备手术前24h停止饲喂草料，限量饮水，手术器械在使用前用0.5%新洁尔灭液浸泡0.5h:严格按外科手术要求进行自身消毒.术者分工要明确。4.4.1.2保定与麻醉将母羊仰卧保定，麻醉。4.4.1.3手术部位在离乳房前端约2cm处，腹中线的两侧均可。4.