7第五章 核酸

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1、第七章核酸本章内容概述DNARNA核酸的性质核酸的发展历史及研究现状核酸化学研究史(1)1863年Miescher,博士论文工作中测定淋巴细胞蛋白质组成时,发现了不溶于稀酸和盐溶液的沉淀物,并在所有细胞的核里都找到了此物质,故命名"核质(Nuclein)"1879年Kossel经过10年的努力,搞清楚核质中有四种不同的组成部分:A,T,C和G;核酸研究史1核酸化学研究史(2)1889年Altman建议将“核质”改名为“核酸”,因为已经认识到“核质”乃“核酸”与蛋白质的复合体。1909年Levene发现酵母的核酸含有核糖1930年Levene发现动物细胞的核酸含有一种特殊的

2、核糖--脱氧核糖,得出了一个错误概念:植物核酸含核糖,动物核酸含脱氧核糖。这个错误概念一直延续到1938年,这时方清楚RNA和DNA的区别。Levene还提出了核酸的“磷酸-核糖(碱基)-磷酸"的骨架结构,解决了DNA分子的线性问题,还在1935年提出"四核苷酸",认为这四种碱基的含量是一样的。核酸研究史2核酸化学研究史(3)1950年Chargaff,E和Hotchkiss,R.D.采用纸层析法仔细分析了DNA的组成成分,得知[A]=[T],[G]=[C],[A+G]=[C+T]1953年Watson,Crick根据DNA的X射线图谱的研究结果,提出了DNA的双螺旋模型

3、(Doublehelix)。几星期后提出了半保留式复制模型。1957年Meselsnhe&Stahl用密度梯度超离心法,证实半保留复制假说。核酸研究史3核酸化学研究史(4)1958年Kornberg得到高纯度的DNApolymerase,这种酶需要一个模板DNA。1960年Cairns索性将复制中的细菌DNA的电镜照片拍了下来。1970年发现第一个DNA限制性内切酶。1972年DNA重组技术的建立。1978年双脱氧DNA测序法的建立。1990年人类基因组计划实施。核酸研究史4第一节概述核酸是由碱基(嘌呤碱和嘧啶碱)、戊糖和磷酸组成的高分子物质,是生物体的基本组成。二、种类

4、及分布DNA(脱氧核糖核酸)RNA(核糖核酸)一、概念分布:DNA:主要在细胞核中,是染色体的主要成分。此外在线粒体、叶绿体、质粒及细胞膜上.RNA:细胞核——核仁;细胞质——核糖体及上清液中。三、核酸的组成核酸是一种线形多聚核苷酸,其基本结构单位是核苷酸。戊糖(核糖和脱氧核糖)碱基(嘌呤碱和嘧啶碱)磷酸核苷核苷酸核酸核苷酸的基 本结构腺苷酸(一)核酸中的戊糖D-核糖D-脱氧核糖核酸据此分类:脱氧核糖——DNA;核糖——RNA;核酸中的戊糖均为β-D-型一、核苷酸(二)碱基尿嘧啶胸腺嘧啶胞嘧啶核酸中的碱基分两类:1、嘧啶碱(pyrimidine):是嘧啶的衍生物。一、核苷

5、酸2、嘌呤碱(purine):由嘌呤衍生而来。腺嘌呤鸟嘌呤尿嘧啶胞嘧啶胸腺嘧啶(三)核苷核苷:戊糖与碱基缩合而成,并以糖苷键相连接。糖苷键:二者的连接是C-N键,称N-糖苷键。一、核苷酸(四)核苷酸1、种类:1)按酯化位点:可在核糖的2’-,3’-,5’-;2)按核糖类型:核苷酸、脱氧核苷酸一、核苷酸核苷中戊糖的羟基被磷酸酯化,即为核苷酸。基因是细胞内DNA分子上具有遗传效应的特定核苷酸序列的总称,是具有遗传效应的DNA分子片段。DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接,然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的

6、分子操作的过程,因此DNA克隆又称分子克隆,基因操作或重组DNA技术。克隆动物的历史鲤鱼:1963年,中国科学家童第周早在1963年就通过将一只雄性鲤鱼的遗传物质注入雌性鲤鱼的卵中从而成功克隆了一只雌性鲤鱼,比多利羊的克隆早了33年。绵羊:1996年,多利(Dolly)猕猴:2000年1月,Tetra,雌性猪:2000年3月,5只苏格兰PPL小猪;8月,Xena,雌性  牛:2001年,Alpha和Beta,雄性猫:2001年底,CopyCat(CC),雌性鼠:2002年兔:2003年3-4月分别在法国和朝鲜独立地实现;骡:2003年5月,爱达荷Gem,雄性;6月,犹他先

7、锋,雄性鹿:2003年,Dewey马:2003年,Prometea,(普罗米修斯)雌性狗:2005年,韩国首尔大学实验队,史纳比猪:2005年8月8日,中国第一头供体细胞克隆猪克隆羊

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