伤残短体线虫的检验鉴定方法

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1、ICSxx.xxx.xxXXXSN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/Txxxx——xxxx伤残短体线虫的检验鉴定方法MethodsfordetectionandidentificationofPratylenchusvulnusAllen&Jesen（送审稿）XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布本标准依据GBfT1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》给出的规则编制。本标准由国家认证认可监禅管理委员会捉出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院、

2、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局、中华人民共和国伊利出入境检验检疫局。本标准主要起草人：龙海，李一农，王金成，李芳荣，顾建峰、乾义柯。伤残短体线虫检疫鉴定方法1范围本标准规定了进出境植物检疫中伤残短体线虫的检疫鉴定方法。本标准适用于进出卅i物及卅i物产品、土壤等传带的伤残短体线虫的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于木标准的应用是必不可少的。凡是注口期的引用文件，仅注口期的版木适用于木标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。SN/T2757植物线虫检测规范3符号下列符号适用于本标准。n——测计的线

3、虫样木数冃；L虫体体长(Pm或mm)；a体长/最大体宽;b——体长/虫体前端至食道与肠连接处的距离；b，——体长/体前端至食道腺末端的距离c——体长/尾长；L——尾长/肛门处体宽gubornaculums弓

4、带长度St——口针长度(刚)；spicule交合刺长度T——泄殖腔开口至精巢末端的距离XI00/体长；V——虫体前端至阴门的距离X100/体长。4原理屮文名称：伤残短体线虫学名：PratylenchusvulnusAllen&Jesen,1951界名:An^uillulinapratensisThorne,1934PratylenchusniusicolaCondi

5、t&Home,1938PratylenchuspratensisAllen,1949;Serr&Day,1949英文名：Walnutmeadownematode；Walnutroot-lesionnematode分类地位：线虫门(Nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)>垫刃目(Tylenchida)、短体科(Pratylenchidae)>短体亚科(Pratylenchinae)>短体属(Pratylenchus)o伤残短体线虫是一种根部迁移性内寄纶性线虫，通常破坏寄主植物根的外层组织，随着线虫的取食,根部大量细胞受损，当线虫数量多时，根出现广泛病变，可

6、以从病变部位分离到大量线虫。受害植株幼根减少，根系不发达，当有其他存害微生物参与时，导致根腐烂。伤残短体线虫危害80余种植物。其寄主范围、传播途径、生物学和形态学特征是其检疫鉴定方法的依据。伤残短体线虫的寄主范围、分布和传播途径参见附录A。5仪器、用具和药品5.1仪器与用具生物显微镜、具透射光源的体式显微镜、冰箱、加热板、打孔器、载玻片、盖玻片、标准套筛(60冃〜500冃)、烧杯(500mL.1000ml,)、漏斗、漏斗架、乳胶悸、止水夹、凹玻片、剪刀、挑针、浅盘、玻璃纤维丝、酒精灯、培养皿、试管、纱布、干燥器、记号笔。5.2药品指甲油、4%甲醛、乳酚油(苯酚20mL、

7、乳酸20mL、甘油40mL和蒸馅水20mL混合而成)、石蜡、冰乙酸。6检疫与鉴定6.1现场检疫与取样对植物及其产品的根、鳞球茎、块茎、根状茎等地F部分进行检查，是否有根腐症状。收集上述可疑植物材料及所附带的土壤，送实验室检验6.2实验室检验对于抽取的样品，可用浅盘分离法或漏斗法分离线虫，具体操作过程见SN/T2757。将分离得到的水样在体视显微镜下检查，挑取或吸取疑似线虫若十条，制成临时玻片在显微镜下镜检，观察线虫的形态。线虫标本制作方法见SN/T2757o7伤残短体线虫的形态学鉴定特征7.1形态特征图见附录B。7.2形态特征描述雌虫：虫体细长，温和热杀死后虫体直伸，头

8、区高连续，唇区有3〜4条环纹。口针发达，基部球圆形，有吋前端呈杯状；中食道球椭圆形形，较窄；排泄孔位于食道为肠交界处；食道腺从腹面以长叶状覆盖肠的前端。受精囊充满精子时呈长椭圆形，具长的和分化的麻阴子宫囊，长度为阴门处体宽的2倍，侧区具4条侧线，外侧的侧线光滑或略呈锯齿状，屮间2条侧线距离较近。尾圆锥形，尾尖细I员威亚锐尖、光滑，偶尔具1〜2条环纹。雄虫：常见，头区和食道的构造与雌虫相似。侧区在交合伞处终止，交合金延伸到尾尖。交合刺弯曲,引带简单。7.3测量值7.3.1雌虫L二0.46mm〜0.91mm；a二26.6〜39.5；b二5.3