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1、乌蕨抗氧化活性探究范文［摘要］目的研究乌蕨总黄酮体外抗氧化活性。方法采用分光光度法，测定乌蕨总黄酮对疑自由基、脂质过氧化的清除能力、总述原力和总抗氧化作用，并通过多元线性凹归分析，考察了乌蕨总黄酮含量及其体外抗氧化活性的相关性。结果乌蕨总黄酮具有较强的抗氧化性能、H由基清除能力和一•定的还原力，可有效抑制脂质过氧化，且抗氧化作用与乌戯总黄酮含量呈正相关。结论乌嗾总黄酮具有显著的抗氧化活性，黄酮类化合物可能是其抗氧化作用的主要物质基础。［关键词］乌蕨;总黄酮;抗氧化耳蕨［Stenolomachusanum(L.)Ching］为鳞始蕨科植物乌蕨的全草，又名
2、野鸡尾、金花草、屮华金粉蕨，具有清热、解壽、利湿、止血的功效［1］。其主要含有芳樟醇、松汕醇和香叶醇等挥发性成分以及木犀草素、牡荆素等黄酮类化合物［2〜4］。据报道，乌嗾具有抑菌、护肝、止血、解毒等作用，且安全，无毒副作用［5〜7］。口前国内研究主要集中在乌蕨抗菌作用，笔者未见对其抗氧化作用的报道。为了合理利用该植物资源并确定其主要抗氧化活性成分,笔者对其进行了体外抗氧化研究，现报道如Fo1仪器与试药1.1仪器BS224S精密电了天平(北京赛多利斯仪器系统冇限公司)，TU-1900双光束紫外叮见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司），KQ-5000超声
3、波清洗器（昆山超声仪器有限公司）。1.2试药乌蕨药材于2008年1（）刀采口杭州九溪，经熊解康教授鉴定为乌蕨[Stenolomachusanum（L.）Ching]的地上部分，阴干，粉碎，备用。芦丁标准品购白中国药品生物制品检定所（批号:100080-20030）豆卵磷脂购自Sigma公司（批号:F20070207）;其他试剂均为分析纯。2方法2.1乌蕨提取物的制备定量称取乌蕨干燥粗粉10g,加16倍量含0.1%盐酸的60%乙醇回流提取4h,提取1次，提取液减压浓缩至含醇量约10%抽滤，除去朵质，加60%乙醇定容至lOOmL,作为供试品溶液，备用。参照
4、文献[8],经测定其总黄酮含量为11.89%。2.2抗氧化活性实验[9-11]221磷钥络合物法总抗氧化活性的测定在5mL具塞试管屮加入供试品溶液适量，加试剂液4mL,加纯化水定容至5mL,加盖，混匀，置95°C水浴反应30min,冷却后，以纯化水作空口，于695nm波长下测定其吸光度。222还原力测定取供试品溶液适量，加入磷酸缓冲液（0.2mol・L・l,pH6.6）1.5mL及1%铁氧化钾溶液ImL,50°C保温20min后，加入10%三氯乙酸溶液ImL,混匀，加纯化水2.5mL及().1%三氯化铁溶液().1mLo在700nm处测定反应液吸光度值
5、。吸光度值越人，表示述原力越强。2.2.3脂质体氧化法将人豆卵磷脂分散于去离子水中，20kHz超声波处理30min,周围以冰水冷却，制得大豆磷脂浓度为0.8%的人工脂质体。取脂质体ImL,加入供试品溶液适量，以lOmmol・L-1乙酸铜溶液20uL催化氧化反应，混匀后放置于I叫转式恒温水浴振荡器上，于賠处37°C、100rTnin-1进行开口氧化，每隔一定时间，取氧化液0.5mL,加纯化水至5mL,于235nm处测定其吸光度，以摩尔消光系数£=2600()(mol)-l・L・cm-1计算脂质体体系屮共轨二烯氢过氧化物的卞成量。2.2.4抗耗H由基(・O
6、H)作用实验在5mL具塞试管小加Tris-HCl缓冲液l.OmL,加入供试品溶液适量、亚甲基蓝溶液l.OmL、过氧化氢溶液().5()mL、硫酸亚铁溶液().50mL,加纯化水稀释至刻度。用直径lcm比色皿，以纯化水作空白，于663nm波长处测定吸光度(A),其清除率可用下式计算：A样:加入清除剂后测得的反应体系吸光度值;A未损:指示剂木身的吸光度值;A损:未加清除剂时反应体系吸光度值。3结果3.1乌蕨总黄酮体外抗氧化活性见表lo样品还原力和总抗氧化值均以吸光度(A)值表示。由表1可见，乌蕨总黄酮具有较强的抗氧化活性，可提高拜白由基的清除率，抑制卵磷脂
7、氧化产物的生成。3.2乌蕨总黄酮与抗氧化活性相关性分析以瓮自由基清除率(XI)、还原力(X2)、CD抑制率(X3)和总抗氧化值(X4)为横处标，乌蕨总黄酮含量(Y)为纵坐标，采用SPSS13.0软件对表1结果进行线性关系考察，得方差分析表(表2)和冋归标准残差正态P-P
8、^
9、(图l)o由表2和图1可知，PvO.Ol,口变E(Xn)lj因变量(Y)服从正态分布，证明乌蕨总黄酮含量与抗氧化活性ZI'可存在显著的线性关系。进而对其进行多元线性回归分析，得回归系数分析表(表3)o在95%可信区间内，线性相关系数=0.9995。证明回归方程真实、可靠，具有统计学
10、意义。可用于替代实验点对实验结果进行分析。由此得拟合方程:Y=-17.453+11.015X1
